Інструкційна карта до лабораторної роботи №8
з дисципліни «Органічна хімія»
спеціальності «Виробництво хліба, кондитерських, макаронних виробів і харчових концентратів»
Тема: Вивчення кольорових реакцій білків
Мета:
дослідження якісних реакцій білків.
удосконалення умінь і навичок проведення хімічного експерименту;
формування умінь інтерпретації результатів хімічного експерименту (спостереження, складання рівнянь відповідних хімічних реакцій, висновки).
Забезпечення:
Посуд, обладнання: штатив з пробірками, нагрівальний прилад, пробіркоутримувач, хімічний стакан, універсальний індикаторний папір.
Реактиви: розчини яєчного білка, хлоридної кислоти, 10%-вий розчин лугу, 1%-вий розчин сульфату купруму(ІІ), дистильована вода, концентрована нітратна кислота, розчин ацетату плюмбуму (ІІ),розчин нінгідрину.
Хід роботи:
Дослід №1. Біуретова реакція
За допомогою кольорових реакцій в розчинах (часто в біологічних рідинах – наприклад, в сечі) встановлюється присутність білків, а в їх молекулах – певних угрупувань
Білки (поліпептиди) в лужному середовищі за наявності сульфату купруму(ІІ) утворюють комплексні сполуки купруму, забарвлені в синьо-фіолетовий колір, інтенсивність забарвлення якого залежить від кількості пептидних зв’язків у молекулі білка.
Ця реакція обумовлена наявністю пептидної групи:
Утворення пептидного зв’язку
Комплекси купруму з білками ‑ забарвлені сполуки, що мають максимум поглинання при 540 – 580 та 615 – 670 нм. За допомогою біуретової реакції можна визначити концентрацію білка у пробі 10-5 – 10-4М.
Продукти неповного гідролізу білка (пептиди) в біуретовій реакції утворюють червоне забарвлення.
До 3мл розчину яєчного білка додати 1мл розчину гідроксиду натрію, 1 – 2краплв розчину сульфату купруму(ІІ), перемішати. Спостерігати забарвлення розчину __________
__________________________ колір.
Зробити висновок._________________________________________________________
Дослід №2. Ксантопротеїнова реакція з білками для виявлення циклічних амінокислот
До 3мл розчину яєчного білка додати 1 мл концентрованої нітратної кислоти. Суміш перемішати і обережно нагріти до появи _________________________ забарвлення. Потім додати концентрований розчин нашатирного спирту. Спостерігати зміну забарвлення з жовтого на __________________________ внаслідок утворення аніонів з більш інтенсивним забарвленням.
Реакція свідчить про наявність у молекулах білках ароматичних ядер фенілаланіну, тирозину, триптофану.
Зробити висновок._________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Дослід №3. Реакція Фоля (сульфгідрильна) для виявлення Сульфуру в амінокислотах
Реакція зумовлена наявністю в молекулі білка SH-груп, а також – S – S- і – S – CH3 - груп. Вона дозволяє виявити в молекулі білка залишків амінокислот, що містять Сульфур – цистеїн, цистин, метіонін. Поява чорного забарвлення вологого паперу, змоченого розчином ацетату плюмбуму(ІІ) свідчить про початок псування м’яса.
До 3мл розчину яєчного білка додати розчини лугу, ацетату плюмбуму(ІІ) та нагріти на водяній бані протягом 2 хвилин. Після охолодження спостерігати утворення осаду __________________________ кольору. Скласти рівняння реакції взаємодії сірководню з ацетатом плюмбуму(ІІ)._________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Зробити висновок. ________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Дослід №4. Визначення азоту в органічних сполуках
Переглянути відеозапис досліду. Скласти схему визначення азоту в органічних сполуках.______________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Описати спостереження._________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Поява _______________________ забарвлення свідчить про наявність азоту в органічних сполуках.
Зробити висновок._________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Зробити висновок по роботі._______________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________