Режим стерилізації середовища Сабуро

Середовище Сабуро -  селективне живильне середовище для вирощування патогенних грибів, дріжджів та ацидофільних бактерій, що складається з 2%-го агарового гелю, 1%-го пептону, 4%-ї мальтози, рН 6,5-7. Стерилізують дане середовище протягом 15 хв при 120°С. 

Призначення термостата, анаеростата, ексикатора

Термостат – прилад призначений для підтримки в середині робочої камери постійної температури, необхідної для проведення бактеріологічних та серологічних досліджень в клініко-діагностичних та санітарно-бактеріологічних лабораторіях лікарень, клінік, науково-дослідних інститутах та ін. закладах охорони здоров’я

Анаеростат – прилад, призначений для культивування в чашках Петрі мікроорганізмів групи облігатних анаеробів та мікроаерофілів.

Ексикатор - посудина, в якій підтримується певна вологість повітря (зазвичай близька до нуля), виготовлена з товстого скла або пластику. Використовується для повільного висушування при кімнатній температурі, зберігання гігроскопічних сполук, при гравіметрії, а також у ґрунтознавстві для зняття основних гідрофізичних характеристика. Для деяких цілей можливе створення вакууму всередині ексикатора.

Приготування препаратів з бульйонної культури

З бульйонної культури можна приготувати такі препарати: мазки, посіви (на різні поживні середовища) та посіви на тверді середовища для визначення чутливості до антибіотиків.

Приклади:

Виготовлення мазка. На чисте знежирене предметне скло нанести невелику краплю дистильованої води, в неї за допомогою стерильної бактеріальної петлі внести невелику кількість маси мікроорганізмів і розподілити по поверхні скла. Мазок повинен бути тонким, діаметром близько 1 см. Якщо культура мікроорганізмів вирощувалася на рідкому живильному середовищі, за допомогою стерильної піпетки на чисте знежирене предметне скло наносять невелику краплю культуральної рідини, яка містить мікроорганізми. Краплю, яка містить мікроорганізми можна розподілити по склу за допомогою стерильної бактеріальної петлі, або розподілити за допомогою грані іншого предметного (покривного) скла.

Техніка посівів мікроорганізмів.: стерилізують петлю у верхній частині полум'я газового пальника. Край пробіроки проносять через полум'я. Петлю опускають у пробірку, обережно торкаючись стінки, охолоджують. Петлю опус­кають у пробірку, набирають матеріал. Рідкий – крапля рідини. На поверхні середовища – набирають невелику кількість, без ушкодження живильного середо­вищя. Петлю виймають не торкаючись стінок, переносять в іншу пробірку з середовищем. Штриховими рухами від однієї стінки пробірки до іншої, починаючи з нижньої частини середовища, проводять посів матеріалу по скошеній поверхні агару знизу догори. При посіві на рідке жс – петлю за­нурюють у рідину. Якщо не знімається з петлі, обережно розтирають на стінці пробірки, омивають середовищем. Матеріал, набраний пастерівською/градуйованою піпеткою, вилива­ють у живильне середовище. Для рівномірного розповсюдження струшують/обертають. На щільне живильне середовище (ч. Петрі) матеріал набирають стерильною петлею, втирають у поверхню середовища біля краю чашки. Наступний етап починають з місця, де закінчився попередній. Петлю кладуть горизонтально на поверхню ага­ру (над посівом), проводять один-два рази по поверхні і роблять посів по решті середовища. Штрихи посіву тривають від краю до краго чашки, без пошкодіення агару і розташовувались близько один до одного для одержання ізольованих колоній.

Приготування препаратів із бульйонної культури стрептококів. Стрептококи не росьтуть на простих середовищах, їх вирощують на глюкозному бульйоні та кровяному агарі. У рідких середовищах утворюють осад, бульйон залишається прозорим. Матеріали та методи приготування препаратів: СЛИЗ - посів на агар з 5% крові обертаючи тампон по поверхні поживного середовища. Після посіву на щільне п.с. засівають на бульйон з глюкозою. ГНІЙ - каплю гною наносять на агар з 5% крові на чашки Петрі, також роблять мазок і фарбують по Граму. СЕЧА - центрифугують, осад засівають на агар з 5% крові, роблять мазок, фарбують по Граму. КРОВ - засівають на бульйон з 0,2% глюкози в співвідношенні 1:10.

Режим стерилізації середовища Олькеницького:

72 г – розмішати в 1 л дистильованої води. Кип’ятити 1-2 хв. Налити в пробірки по 7 мл. Стерилізувати 20 хв при температурі 112. Скосити до висоти стовпчика 2-2,5 см.

Перелік обладнання бак лабораторії:

Лабораторні меблі, автоклав, термостат, сушильна шафа, центрифуга, рН-метер, лабораторні ваги, бактеріальні фільтри, холодильник, дистилятор, бактеріальна лампа, мікроскопи, шафи, та інше.

Приготування дез. розчинів:

Для дезінфекції використовують такі групи р-н: галогени(йод), феноли, спирти, кислоти, луги, альдегіди, солі, барвники.

Правила приготування дез. Розчинів хлору вмісту:

Готують освітлений р-н хлорного вапна: 1 кг сухого хлорного вапна на 9 л води.

Відстоюють добу.

Зливають р-н в темний скляний посуд, закривають корком на 10 діб.

На етикетці ставлять дату, концентрацію, посаду та прізвище особи, що приготувала р-н.

Готують робочий р-н хлорного вапна.

Для інструментів без біолог. забруднення застосовують наступні концентрації дез. розчинів(повне занурення 30 хв): хлоранін 1%, гіпохлорид натрію 0,25%, гіпохлорид кальцію 0,5%, сульфохлорантин 0,2%.

Для інструментів з біологічним забрудненням використовують дез. розчини(60 хв): 6% р-н перекису водню, 3% р-н хлораніну, активований р-н хлораміну 0,5%, освітлений р-н хлорного вапна 3%, гідро хлориду натрію 0,75%.

Режим знезараження в автоклаві. Полягає в прогріванні будь-якого матеріалу насиченою парою за тиску вище атмосферного і температури більше 100. Температ залежить від тиску (чим більше тиск – тим більше температура). У результаті такої стерилізації при одноразовій обробці помирають як вегетативні так і спорові форми м.о. Автоклавування використовується для стерилізації пож середовищ, термостабільних речовин, скляного лаб посуду, а також для знезараження культур та відпрацьованих матеріалів.