Посев на менингококк1

СМЖ на Сыв.А (КСА) и Шок.А. в мазке четкие бобовидные диплококки, одиночных не бывает.

Смыв из носоглотки на Сыв.А с ристомицином и Сыв.А без антибиотика. Посев секторами: 4-5 секторов. Могут расти без свечки (СО₂).

Если ни одна Neisseria на Сыв.А. не растет, надо заменить сыворотку или Сыв.А на КСА (кровяно-сыв.агар) т.к. лошадь могла быть иммунизирована и мко на Сыв.А не растут. Сыв.А должен быть прозрачным.

Колонии «сметана» с голубизной.

Проще смотреть колонии без стереомикроскопа, как и дифтерию. Снимать колонии на Сыв.А - чашку, каждую подозрительную колонию на сектор, 2-3 на чашку.

Исследование каждой колонии доводить до конца. Окраска мазка в модификации Калины. N.catarrhalis - равные по окраске и размеру. N.meningitidis обязательно различной окраски и размеров, различно окрашены центр и края. Можно сравнить с разбросанным горохом - разной величины. Кокки круглые, средние, не бобы. М.б. по 1 кокку. Пишем: полиморфные диплококки. Сахара в чашках, цвет среды Плоскирева – желтый - «+» Чашки с 1-чным посевом оставить при комнатной температуре. Если колонии пожелтели -это не менингококк.

N. sicca – колонии суховатые, как споровые палочки, плохо снимаются, голубоватые. Чувствительность не определяют.

теория

Менингококки

Это парные кокки, состоящие из двух парных кокков, лежащих вогнутыми сторонами друг к другу. Они полиморфны, неподвижны, грамотрицательны. В гнойном материале находятся внутри лейкоцита.

Культивирование.

Аэробы. Требовательны к питательным средам, размножаются только на средах, содержащих сыворотку или кровь. На плотных средах образуют колонии 2-3 мм, полупрозрачные, голубоватые. Для их размножения необходима повышенная влажность, свежеприготовленная среда, иногда добавка углекислоты в атмосферу. При понижении температуры ниже 36⁰ могут погибнуть, что необходимо учитывать при отборе, доставке, культивировании и пересевах менингококка. Из сахаров расщепляют только глюкозу и мальтозу с образованием кислоты.

Устойчивость.

Менингококки малоустойчивы. Температура 70⁰С губит их через 2-3 минуты, 55⁰ – через 5 минут. Обычные концентрации дезвеществ губят их быстро.

Антигенная структура.

По полисахаридному (капсульному) антигену менингококки разделяют на серогруппы A, B, C, X, Y, Z, 135W, 29E. Согласно международной классификации основными являются А, В и С. Менингококки группы А часто вызывают генерализованные процессы и имеют наибольшее эпидемиологическое значение. Менингококки В и С вызывают спорадические заболевания. Остальные серогруппы мало изучены.

Материал для исследования.

1. Спинномозговая жидкость

2. Оделяемое слизистой оболочки носоглотки

3. Кровь

Способы сбора материала.

СМЖ. Из спинномозгового канала, соблюдая правила асептики, берут стерильной иглой 2-5 мл спинномозговой жидкости. Собранный в стерильную посуду материал сразу переносят над пламенем горелки в центрифужную пробирку и доставляют в лабораторию. От момента сбора материала до посева должно пройти не более 2 часов. Во время транспортировки собранный материал следует предохранять от высыхания и охлаждения (температура поддерживается в термосе, вате или с помощью грелки).

Отделяемое слизистой оболочки носоглотки.

Материал собирают ватным тампоном, укрепленным на проволоке (лучше алюминиевой). Перед сбором материала проволоку изгибают о край пробирки под углом 135⁰ на расстоянии 3-4 см от конца с ватой. Стерильным шпателем, находящимся в левой руке, прижимают корень языка, а правой рукой вводят тампон концом вверх под мягкое небо в носоглотку и легкими движениями собирают отделяемое – слизь. Извлекать тампон надо осторожно, чтобы не задеть язык, щеки, зубы. Посев материала производят сразу на чашку Петри с сывороточным агаром, втирают в среду, поворачивая тампон. Так как слизь содержит разнообразную микрофлору, которая может подавить рост менингококков, то к среде с сывороткой прибавляют антибиотик линкомицин в концентрации, не действующей на менингококки. Засеянные чашки доставляют в лабораторию, предохраняя их от охлаждения и высыхания.

Кровь берут до начала лечения натощак или через 3-4 часа после приема пищи. 5-10 мл крови берут из вены и засевают во флакон с бульоном и 0,1% глюкозы 1:10.

Основные методы исследования: микроскопический, микробиологический, серологический.

Заболевания: назофарингит, эпидемический церебральный менингит, менингококцемия.

Приказ по менингиту № 375 (можно см. в Интернете)