МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ

ОДЕССКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КАФЕДРА

Реферат на тему:

Окраска препаратов в гистологии

Выполнил:

студент 1 курса

Группы 1М-04

Метелица Евгений

Одесса 2012

Содержание

Теории гистологических окрасок 4

Хроматическая теория 4

Теория Витта 5

Современная теория 7

К теории импрегнации серебром 8

Список использованных источников 11

Вступление

Гистология зародилась задолго до изобретения микроскопа. Первые описания тканей встречаются в работах Аристотеля, Галена, Авиценны, Везалия. В 1665 году Роберт Гук ввёл понятие клетки и наблюдал в микроскоп клеточное строение некоторых тканей. Гистологические исследования проводили М. Мальпиги, А. Левенгук, Я. Сваммердам, Н. Грю и др. Новый этап развития науки связан с именами К. Вольфа и К. Бэра — основоположников эмбриологии.

В XIX веке гистология была полноправной академической дисциплиной. В середине XIX века А. Кёлликер, Лейдинг и др. создали основы современного учения о тканях. Р. Вирхов положил начало развитию клеточной и тканевой патологии. Открытия в цитологии и создание клеточной теории стимулировали развитие гистологии. Большое влияние на развитие науки оказали труды И. И. Мечникова и Л. Пастера, сформулировавших основные представления об иммунной системе.

Нобелевскую премию 1906 года в физиологии или медицине присудили двум гистологам, Камилло Гольджи и Сантьяго Рамон-и-Кахалю. Они имели взаимно-противоположные воззрения на нервную структуру головного мозга в различных рассмотрениях одинаковых снимков.

В XX веке продолжалось совершенствование методологии, что привело к формированию гистологии в её нынешнем виде. Современная гистология тесно связана с цитологией, эмбриологией, медициной и другими науками. Гистология разрабатывает такие вопросы, как закономерности развития и дифференцировки клеток и тканей, адаптации на клеточном и тканевом уровнях, проблемы регенерации тканей и органов и др. Достижения патологической гистологии широко используются в медицине, позволяя понять механизм развития болезней и предложить способы их лечения.

Теории гистологических окрасок

В гистологическом и цитологическом исследовании метод окраски занимает очень важное место и, несмотря на значительный прогресс витальной микроскопии, ультрамикроскопии, микрохирургии и т. д., остается основой громадного большинства микроскопических исследований и пока еще не может быть заменен другими средствами исследования.

Хроматическая теория

Преимущество наблюдения живого материала неоспоримо, потому что при этом можно избегнуть многих ошибок и артефактов, но далеко не во всех случаях прижизненная микроскопия применима. Окрашивание показывает структуру клеток и тканей с ясностью, которой не достигает никакой другой метод. Методы гистологического окрашивания позволяют различать разнообразные структуры клеток и тканей. Они также выявляют образования, которые иначе невозможно увидеть. Употребление окрасок позволяет приступить к настоящему хроматическому анализу элементов органических структур. Этот хроматический анализ употребляется не только при морфологическом, чисто статическом изучении ткани, но и является, при соблюдении определенных условий, методом патофизиологического исследования, позволяя судить о функциональных изменениях клеток и тканей.

Однако необходимо проанализировать значение этого хроматического метода. Мы видим, что элементы ткани окрашиваются различно, и из этого заключаем, что они сами различны. Что же представляют собою эти различия? Разрешение этого вопроса было бы для цитологии и гистологии существенным прогрессом. Тогда действительно мы могли бы изучать клетки и ткани, исходя не только из картин морфологических структур. Мы могли бы по красочным эффектам сделать заключение об их либо физиологических, либо физико-химических и коллоидно-химических свойствах. Изучение механизма гистологических окрасок, позволяющее приступить к разрешению этих проблем, является очень важным для гистолога, который не удовлетворяется описанием структур, полученных окраской, а старается дать себе отчет в научных основаниях техники, которой он воспользовался. Значение окрасок не уменьшается и в настоящее время, хотя рядом с чисто описательной гистологией и гистофизиологией создалась новая наука — гистохимия. Гистохимия стремится обособить и определить химически структурные элементы живого вещества

Теория Витта

Важнейшим свойством, позволяющим нам в данное время дифференцировать тканевые белки, является их различное сродство к красящим веществам. Крупнейшие задачи описательной цитологии, нормальной и патологической гистологии и гематологии были решены с помощью различных методов окрашивания. Прогресс микротехники теснейшим образом связан с развитием химии красителей и технологии окрашивания волокнистых веществ. Началом эры синтетических красителей следует считать открытие фуксина русским химиком Натансоном. Позднее Перкен приготовил мовеип. Эти открытия положили начало приготовлению необозримого ряда разнообразных красителей. Красители относятся к цветным веществам. Цветные вещества способны пропускать или отражать видимые лучи падающего света в тех соотношениях частей спектра, в которых они его получают. В силу этого каждое цветное вещество имеет свой «спектр поглощения», обусловливающий характерную видимую окраску и цвет, дополнительный к поглощаемому. Важным свойством красящих веществ является их способность при восстановлении переходить в бесцветные основания, лейкооснования (лейкобазы). Эти лейкооснования кислородом воздуха могут обратно переводиться в окрашенные вещества. Анализ показывает, что при восстановлении этих веществ к ним присоединяются два или более атомов водорода (всегда четное число), которые удаляются при окислении, когда цветность возвращается. Отсюда заключают, что в некоторых местах молекулы органического красителя имеют место группы атомов, связанных двойными связями. По предложению русского химика О. Н. Витта эти группы, способные к восстановлению, называют хромофор аминами, или цветоносными группами. При соединении углеродистых ядер с хромофорными группами или при включении последних в кольцевые системы углеводородов мы получаем окрашенные тела. Введение хромофорной группы в углеводородные ядра - существенный момент при переходе бесцветных соединений в окрашенные. В тех случаях, когда получившиеся окрашенные тела могут дать начало красящим веществам, они называются хромогены. Кроме хромофоров, в состав красителей входит ряд вспомогательных групп и атомов: алкильные (СН3), амидные (NH2), гидроксильные (ОН), карбоксильные (СООН), сульфогруппы (НSОз), галогены и т. д. Эти вспомогательные группы изменяют свойства цветного вещества. Так, например, амидные группы сообщают ему основной характер, гидроксил, карбоксил, сульфоксил — кислый характер. Все эти вспомогательные группы носят название ауксохромов, так как они превращают собственно цветное вещество в краситель. В основном роль ауксохромных групп троякая: 1) они сильно сдвигают в веществе полосы поглощения света от фиолетового к красному концу спектра; 2) они усиливают химическую индивидуальность тела; 3) вещество приобретает красящие свойства, которых хромогены не имеют. Окрашенное вещество еще не есть краситель: если имеются хромофоры, но нет ауксохромов, то отсутствует и окрашивающая способность. Итак, перемена цвета при восстановлении, наличие хромогенов, хромофоров и ауксохромов является наиболее общей химической характеристикой красителя. От каждого хромогена могут брать начало два ряда красителей: кислые — при введении группы ОН и основные — под влиянием амидной группы. При введении в хромоген нескольких однородных ауксохромовых групп вместе с числом введенных групп увеличивается до определенного предела интенсивность тона краски. Например, амидоазобензол — желтый, диамидоазобензол — оранжевый, триамидоазобензол — коричневый.

Современные успехи химии красителей внесли очень мало изменений в теорию Витта. Если разница между хромофором и ауксохромом несколько потеряла свою ясность, то идея Витта о необходимости диссоциации красителей осталась нетронутой. Классификация красителей, обычно применяемая в технологии крашения, мало применима в гистологии.