Методы контроля стерилизации высокой температуры

контроль эффективности работы стерилизационного оборудования осуществляеться физическими,химическими и бактериологическим методам.Надежность этих методов неодинакова. Физические и химические методы предназначены для оперативного контроля и позволяет контролировать соблюдение параметров режимов паровой,газовой, воздушно стерилизации температуру, давление экспозицию. Недостаток этих методов заключаеться в том, что они не могут служить доказательством эффективной стерилизации. Достоверным для определения эффективности являеться только бактериологический.Физические методы контроля осуществляеться с помощью средств измерения температуры (термометры,термопары), давления (манометры) и времени (таймеры) они фиксируют отдельные параметры каждого цикла стерилизации.Химические методы применяються химические вещества, изменяющие свое агрегатное состояние или цвет при температуре, близкой к температуре стерилизации (бензойная кислота для контроля паровой стерилизации, гидрохинон для контроля воздушной стерилизации) при изменении цвета и расплавления указанных веществ результат стерилизации признавался удолетворительным. Бактериологический метод контроля стерилизации предназначаеться для контроля эффективности стерилизационного оборудования. используються различные биотесты имеющие дозированное количество спор тест - культуры.контроль эффективности стерилизации проводят на инструментарий для выполнения сложных оперативных вмешательств требующих высоконадежных стерильных материалов.

Методы культивирования анаэробов

культвирование анаэробных бактерий производиться в анаэробных условиях. создают при культивировании в анаэростате.при посеве методом фортнера чашку петри с толстым слоем питательного агара сеют культуру аэроба, на другую - анаэроба.чашку заливают парафином и помещают в термостат. сначала протекает рост аэробных бактерий когда они исчерпают весь кислород начинаеться рост анаэробов.При посеве по методу Малкиной используют две пробирки со скошенным МПА, соединеных трубкой. в 1ю сеют культуру аэроба 2ю - анаэроба. при исчерпании килорода начинаеться рост. Посевы на среду Китта-Тароции состоящей из МПБ,глюкозы и кусочков печени или мясного фарша. перед посевом прогревают в водяной бане для удаления воздуха и остужают. после посева среду заливают вазелиновым маслом или парафином с целью изоляции от атмосферного воздуха.

Методы культивирования бактерий

Метод Дригальского поверхностыный последовательный рассев исследуемого материала петлей или шпателем на три чашки (три сектора) с МПА.метод Шукевича исследуемы материал засевают в кондесационную dje скошенного МПА.бактерии обладающие ползучим ростом из конденсационной воды вползают на поверхность агара.Биологический метод - заражение наиболее восприимчивых к даному виду возбудителя животных.после гибели или появления признаков заболевания животных убивают и производят посев крови и органов на питательные среды и микроскопическое исследование мазков - отпечатков из органов.

механизмы избирательного действия на микробы различных дезинфицирующих веществ

Спирты осаждают белки и вымывают из клеточной стенки липиды.Галогены взаимодействуют с гидроксильным группами белков,нарушая их структуру.Альдегиды алкилируют сульфгидрильные,карбоксильные, и аминогруппы белков и других органических соединений,вызывая гибель микроорганизмов.кислоты и щелочи оказывают в зависимости от концентрации отвлекающее,раздражающие и кератолическое действие.Металлы эффект основан на способности осаждать белки и другие органические соединения.Фенолы денатурируют белки и нарушают структуру клеточной стенки.Катионные детергенты оказывают бактерицидное действие связанное с изменением проницаемости цитоплазматической мембраны,уменьшают анионные поверхностно-активные вещества,некоторых органических соединений и металлов. окислители окисление метаболитов и ферментов микроорганизмов,либо денатурацией микробных белков.

механическая стерилизация (фильтрация)

метод фильтрирование аппарат асбестовые фильтры Зейтца,мембранные фильтры,свечи мамберлена (из коалина) материал сыворотка крови,антибиотики для получения бактериологических токсинов,фагов.

микробные токсины их характеристика

токсины - важнейшие факторы патогенности, вырабатываемые микроорганизмами и реализующие основные механизмы инфекционного процесса. токсины облегчают первичную колонизацию и вызывают системные поражения, характеризующие специфические проявления той или иной инфекционной болезни.спектр активности токсинов широкий облегчает распространение по тканям до метаболитов селективно повреждающих активность определеных клеток.различаю экзотоксины секреторные белковые вещества, обычно проявляющие ферментативную активность.служат единственным фактором вирулентности микроорганизма, действуют дистанционно и отвественны за клинические проявления инфекции.эндотоксины интегральные компоненты клеточной стенки грамотрицательных бактерий большая их чать высвобождаеться только после гибели бактериальной клетки.

микрофлора верхних дыхательных путей

верхние дыхательные пути несут высокую микробную нагрузку - они уже анатомически приспособлены к осаждению бактерий из вдыхаемого воздуха.имеются негомлитические и зеленщиеся стрептококки, непатогенные нейссерии, стафилококки и энтеробактерии в носоглотке можно обнаружить менингококки, пиогенные стрептококки, пневмококки и возбудителя коклюша.у новорожденных верхние дыхательные пути стерильны.

микрофлора жкт

в желудке здорового человека микробов практически нет, что связанно с действием желудочного сока. а helicobacter pylori адаптировались к обитанию на слизистой оболочке желудка.верхние отделы тонкого кишечника также относительно свободны что связанно с неблагоприятным действием щелочной среды и пищеварительных ферментов.в других отделах можно обнаружить кандиды,стрептококки и лактобациллы.у новорожденых доминирует lactobacillus bifidus из за естественного вскармливания прочие представленны кишечными палочками,энтерококами, стафилококками. а у детей находящихся на исскуственном вскармливании доминирут lactobacillus acidophilus/

микрофлора кожи

на кожных покровах микроорганизмы подвержены действию бактерицидных факторов сального секрета, повышающих кислотность.в подобных условиях живут staphylococcus epidermicus,микрококки, сарцины, s.aureus. Основные зоны локализации эпидермис в особенности роговой слой, железы (сальные и потовые).микрофлора волосяного покрова идентична микрофлоре кожи.

микрофлора мочеполовой системы

верхние отделы мочевыделительной системы обычно стерильны в нижних отделах доминируют staphylococcus epidermicus негемолитические стрептококки,дифтериды часто выделют грибы рода кандида и Geotrichum. в наружных отделах доминирует Mycobacterium smegmatis. у беременных из влагалища выделяют streptococcus agalactiae представляющий серьезную опасность для новорожденных в плане развития пневмоний и гнойно-септических поражений

микрофлора ротовой полости

микрофлора ротовой полости на микроорганизмы действует слюна, механически смывающая бактерии и содержащая антимикробные вещества лизоцим.в состав полости рта входят различные микроорганизмы образуют аутохтонную микрофлору. и может образовывать аллохтонную. среди бактерий доминируют стрептококки streptoccocus mitior тропен к эпителию щек, streptococcus salivarius к сосочкам языка, streptococcus mutans к поверхности зубов.также обитаю спирохеты, рода treponema, borrelia, микоплазмы. грибы рода кандида и разнообразные простейшие.первичное проникновение бактерий в полости рта происходит при прохождении через естественные родовые пути.

пастеризация и тиндализация

метод пастеризация аппарат водянная баня параметры стерилизации 65градусов 30мин., 70-80градусов 5-10 мин.с полследующим охалождением материал молоко,вино,пиво,соки. методтиндализация аппарат водяная баня 55-58 градусов в течении 1 часа (в 1день 2 часа)5-6дней подряд. материал сыворотка крови, витамины.

патогеность и вирулентность бактерий определение

патогенность определяет специфичность патологических процессов, вызываемых конкретным возбудителем, что проявляеться развитием соответствующего типа инфекционного заболевания.вирулентность отражает степень патогенности различных изолятов или штаммов конкретного патогенного вида.

питательные среды их класификация

питательные среды различают по консистенции, происхождению и назначению. бывают жидкие, полужидкие и твердые.жидкие среды готовят на основе водных растворов каких-либо веществ мясной воды.для плотных сред к жидким добавляют уплотнители чаще агар.они представляют собой полисахарид сложного состава,имеющий волокнистую структуру,получаемых из морских водорослей.полужидкие имеют вязкую консистенцию благодаря добавлению к ним небольшого количества агара.по назначению деляться на следующие основные категории

1.основные (универсальные) - среды,на которых хорошо растут многие виды бактерий.

2.специальные среды используют для получения роста прихотливых бактерий не растущих или очень плохо растущих на основных питательных средах.

3.специальные тканевые среды относят Китта-Тароции и среду Аристовского-Гельтцера.первая содержит мясо-пептонный бульон, глюкозу и кусочки печени или мясного фарша.

4. элективные среды предназначены для избирательного выделения и накопления микробов определенного вида из материалов, содержащих разнообразную микрофлору.

5.Дифференциально-диагностичские среды, позволяющие отличать одни виды бактерий от других по их ферментативной активности или культуральным проявлениям.

Положительная и отрицательная роль нормальной микрофлоры организма человека

нормальная микрофлора играет важную роль в защите организма от патогенных микробов например стимулируя иммунную систему, принимая участие в реакциях метаболизма.в то же время эта флора способна привести к развитию инфекционных заболеваний.механизм - избирательного связывания нормальной микрофлоры поверхностных рецепторов клеток,особенно эпителиальных.большинство представителей резидентной микрофлоры проявляет выраженный антогонизм в отношение патогенных видов.

распространение бактерий и вирусов бактериемия

бактеремия - нахождение микроорганизмов или токсинов в крови и лимфе.вирусемия - наличие в крови вирусов.токсикосемия - нахождение в циркуляционом русле экзо и эндотоксинов.септицемия - состояние при котором микроорганизм размножаеться только в крови.

роль микроорганизмов окружающей среды

человек контактирует с множеством микроорганизмов, о лишь немногие из них способны вызывать болезни.патогенность или отсутствие таковой - видовой генетически детерминированный признак микроорганизма.патогеный потенциал многих возбудителей зависит как от свойств,присущих конкретному микроорганизму, так и от состояния факторов защиты организма-хозяина.взависимости от характера данных взаимоотношений все микробы подразделяют на патогенные, условно-патогенные, и непатогенные.

специальны,синтетические питательные среды

к специальным средам относят среды Китта-Тароцци и среду Аристовского-Гельтцера.Первая - содержит мясо - пептонный бульон 0.5% глюкозы и кусочки печени или мяного фарша.Вторая - кроличью сыворотку и кусочки мозга кролика.Эти среды применяются для культивирования анажробных бактерий.Перед посевом среды прогревают в водянной бане в течение 10-15 минут для удаления воздуха.После посева среды заливают слоем вазелинового масла или парафином с целью изоляции от атмосферного воздуха.

Синтетические - среды строго определенного состава, представляющие собой растворы неорганических и органических соединений,обеспечивающих азотистое,углеродное и минеральное питание микроорганизмов. например среда Сотона для культивирования туберкулезных микобактерий.

стерилизация ионизирующим излучением

метод облучение УФ лучами аппарат бактерицидные лампы БУВ - 15,30 материал воздух лечебных учереждений,витамины,некоторые белки,металлические инструменты в стоматологии и хирургии. метод облучение гамма лучами аппарат источник гамма излучения Co аппарат антибиотики,гормоны,кетгут,изделия из пластмасс одноразового использования.Стерилизация сухим жаром

Стерилизация сухим жаром

метод сухим жаром аппарат печь Пастера параметры стерилизации 150 градусов - 2 часа, 160 градусов - 1час, 180 градусов - 30минут, материал стеклянная посуда (пробирки, чашки Петри) после кипячения стоматологический и гинекологический инструментарий.

стерилизация текучим паром

метод текучим паром аппарат Коха с названной крышкой и открытым выпускным краном параметры стерилзации 100градусов 3 дня подряд по 30 мин. материал питательные среды с углеводами,витаминами, молоком, нативным белком, мясо-пептонная желатина.

стерилизация УФ лучами

метод облучение УФ лучами аппарат бактерицидные лампы БУВ - 15,30 материал воздух лечебных учереждений,витамины,некоторые белки,металлические инструменты в стоматологии и хирургии.

стерилизация.Методы стерилизации, приминяемые в медицинской практике

Стерилизация - температурные воздействия применяют для стерилизации - полного удаления микроорганизмов из различных сред и обеззараживания предмметов.наиболее простые и доступные методы - прокаливание и кипячение. и другие как пастеризация,стерилизация сухим жаром,автоклавирование,тиндализация,излучение:УФ-лучами, рентгеновское и гамма излучение,микроволновое излучение,осмотическое давление:фильтрование.

тканевые питательные среды

Питательная среда для культивирования клеток должна иметь солевой состав, близкий к таковому животного организма, определенную концентрацию водородных ионов (рН), быть изотоничной и содержать необходимые для жизнедеятельности клеток питательные вещества: аминокислоты, углеводы, витамины и факторы роста. Нормальный рост и размножение клеток вне организма могут происходить как в естественных, так и в искусственных, синтетических питательных средах, обогащенных стимулирующими биологическими жидкостями, такими, как сыворотка крови, эмбриональный экстракт и др. Среды, обеспечивающие активное размножение клеток, называют ростовыми средами, а синтетические среды, не содержащие естественных стимулирующих продуктов или содержащие их в минимальном количестве, способные в основном только поддерживать жизнеспособность, переживание клеток, называют поддерживающими средами.

факторы инвазивности бактерий

основные факторы, обеспечивающие инвазивность бактерий это подвижность обеспечивает проникновение как в клетки, так и межклеточные пространства и особые клеточные факторы - инвазины способствующие проникновению в эпителиоциты посредством эдоцитоза.

факультативные и облигатные внеклеточные паразиты

факультативные паразиты часть своего цикла жизненого проводят как свободноживущие особи.но паразитирующая фаза имеет ведущее значение.к ним относятся в основном кишечные бактерии. Облигатные паразиты жизненый цикл микроорганизмов связаны с организмом хозяина.вне организма человека они быстро погибают лтбо не размножаються. например - хламидии,риккетсии и вирусы. Риккетсии и хламидии облигатные внутриклеточные паразиты, отсутвует для самостоятельного синтеза АТФ и размножения. В инфицированой клетке они проходят жизненый цикл.

Физико-химические методы стерилизации

Физико-химические методы стерилизации: - прокалывание над огнем - кипячение - сухим жаром - текучим паром - тиндализация - паром под действием давления - пастеризация - облучение УФ лучами - облучение гамма лучами - фильтрование

формы инфекционного процесса реинфекция

суперинфекции от смешанных инфекций следует отличать вторичные инфекции возникающие на фоне уже имеющегося заболевания.

реинфекция - случай повторного заражения одним и тем же возбудителем. рецидив формируеться под действием популяции инфекционного агента, уже циркулирующего в организме, а не рузультат нового заражения.

характерные особености инфекционного заболевания

особености инфекционного заболевания

специфичность - каждую инфекционную болезнь вызывает конкретный возбудитель.

контагиозность - определяет способность возбудителя передаваться от одного лица к другому и скорость его распространения в восприимчивой популяции.

цикличность - развитие конкретного инфекционного заболевания ограничено во времени, сопровождаеться цикличностью процесса и сменой клинических периодов.

Что такое антисептики.Антисептические вещества

Антисептика - комплекс мероприятий, направленных на подавление роста и размножения микроорганизмов, попавших в организм человека. Антисептические средства - соединения, обладающие противомикробным действием, используемые для уничтожения микроорганизмов в ране, патологическом образовании или организме в целом. Биологические антисептики - большая и весьма разнообразная по механизму действия группа препаратов, воздействующих как непосредственно на микробную клетку или ее токсины, так и на группу веществ, действующих опосредованно через макроорганизм.Химические антисептики - относятся к различным классам соединений и могут быть разделены на следующие группы:

- галогены и их соединения (йод,йодоформ,йодинол,гидропирит)

- окислители (перекись водорода,перманганат калия,гидропирит)

- кислоты и их соли (бензойная,борная,салициловая)

- щелочи (аммиак,бикарминт,бура,окись кальция,сода)

- соединения тяжелых металлов (жидкость Бурова,ацетат алюминия),висмута(дерматол,,ксероформ) меди (CuSO4)ртути (каломелы,меркурохром,мертиолят)серебра(азото-кислое серебро,протаргол)

- спирты (этанол, пропанол)

- альдегиды (формальдегид,уротропин,уросал,кальцекс)

- фенол и его производные (резорцин,хлорофен,салол)

- продукты сухой перегонки органических металлов (ихтиол)

- производные оксихинолона (хинозол,нитроксолин)

- производные нитрофуранов (фурацилин,фурагин,фуразолидон)

- красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий,геницианвиолет,риванол)

элективные среды их назначение

Элективные среды предназначены для избирательного выделения и накопления микробов определенного вида из материалов,содержащих разнообразную микрофлору.Приципы действия элективных сред основываются на:

1.опережении роста определенного вида микроба по сравнению с сопутствующей флорой. например на среде Леффлера (1 часть лошадиной сыворотки и 3 части сахарного бульона) возбудитель дифтерии образует видимый рост через 4-6 часов, остальные через 18-24часа.

2.Добавление веществ,ингибирующих рост сопуствующей микрофлоры.

эндотоксины бактерий

эндотоксины интегральные компоненты клеточной стенки грамотрицательных бактерий большая их чать высвобождаеться только после гибели бактериальной клетки.представлены комплексом протеинов,липидных и полисахаридных остатков.бактериальные эндотоксины проявляют сравнительно слабое иммуногенное действие, иммунные сыворотки не способны полностью блокировать их токсические эффекты.

этапы выделения чистых культур анаэробов

выделение чистых культур анаэробов производиться по методу Цейсслера

1 этап готовят мазок из исследуемого материала окрашивают по граму и микроскопируют или ругим методом.при обнаружении подозрительных на анаэробы микробов исследуемый маатериал засевают на среду Китта-Тароцци.пробирки заливают вазелиновым маслом или парафином, подписывают и ставят в термостат на сутки.

2 этап просматривают и описывают характер роста.микроскопируют описывая морфологические и тинкториальные свойства бактерий.производят пересев в чашки петрии на сахарно-кровяной агар для получения изолированных колоний.помещают в термостат на сутки.

3 этап просматривают посевы изучают изолированные колониии и описывают характер.далее опять производят пересев подозрительных колоний в пробирку со средой Китта-Тароции. и снова ставят в термостат.

4 этап отмечают визуальный характер роста чистой культуры. производят проверку.

также существует еще один метод называеться метод Вейнберга