Окраска бактерий в мазках

Введение

Методы обнаружения возбудителей в мазках

Окраска метиленовым синим Лефлера

Окраска основным фуксином по Пфейферу

Окраска генциановым или метиловым фиолетовым

Окраска карболовым тионином Николя

Окраска акридиновым оранжевым по Дарту-Тернеру

Окраска по Граму

Окраска по Романовскому-Гимзе

Окраска плазмодиев малярии в мазках по Романовскому-Гимза

Методика окраски «толстой капли»

Дифференцированная окраска кислотоустойчивых бактерий (микобактерии туберкулеза и лепры)

Окраска микобактерий туберкулеза карбол-фуксином по Цилю-Нильсену

Метод Френкеля

Флюоресцентное окрашивание мазков мокроты (метод Хагеманна)

Метод Киньуна (для срезов)

Метод Файта (для срезов)

Серебрение бактерий в мазках - метод Фонтана

Выявление жгутиков и ресничек

Метод Леффлера

Метод Лайфзона

Выявление капсул бактерий

Метод Клетта

Метод Джоне

Метод Фридлендера (для срезов)

Метод Бурри

Метод Гинса

Выявление спор бактерий

Метод Вайсера-Хьюппе

Метод Меллера

Окраска малахитовым зеленым Шеффера-Фултона

Метод Ожешки

Метод Битгера

Выявление возбудителей сыпного тифа и других риккетсий

Выявление риккетсий в мазках (метод Маккиавелло)

Выявление риккетсий в срезах (метод Ника)

Выявление коринебактерий дифтерии

Выявление стрептококков

Выявление стафилококков

Выявление пневмококков

Выявление менингококков

Выявление гонококков

Выявление возбудителей чумы

Выявление анаэробных спорообразующих бактерий группы клостридий

Выявление возбудителей сибирской язвы

Выявление возбудителей кишечной инфекции

Выявление спирохет и других спиралевидных бактерий

Выявление возбудителей возвратного тифа

Выявление лептоспир

 

 

В цитологической практике нередко возникает необходимость в окраске и исследовании бактерий. Это чаще всего касается различного рода экссудатов, мазков из различных органов и тканей. Мазки готовят различно. В тех случаях, когда материал жидкий, наносят каплю его на чистое предметное стекло и размазывают, пользуясь краем другого предметного стекла (лучше шлифованного); если материал очень густой (например, гной), то его либо разводят физиологическим раствором и тогда поступают, как в первом случае, либо размазывают тонким слоем по предметному стеклу при помощи петли или стеклянной палочки. Наконец, можно готовить мазки-отпечатки, для чего чистое предметное стекло прикладывают непосредственно к серозному покрову, слизистой оболочке или к свежей поверхности разреза какого-либо органа (ткани). При наличии жидкого содержимого (экссудат, моча и пр.) рекомендуется центрифугировать и из осадка готовить мазки.

Полученные по одному из вышеуказанных способов мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С) предметного стекла, которое для этого трижды проводят над пламенем спиртовки мазком вверх. Можно фиксировать мазки и в 96°спирте (10—15 минут).

Фиксированные мазки сохраняются в течение какого угодно времени.

Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам, в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный мазок кладут каплю бальзама и покрывают покровным стеклом.

В настоящее время классическую бактериоскопию с окрашиванием микробов различными красителями дополняют получившие широкое распространение иммуноцитохимические методы с применением меченых антител. Во многих случаях (особенно если применяют моноклональные антитела против поверхностных антигенов возбудителя) они позволяют провести высокоспецифичный экспресс-анализ.

Нередко наиболее доступными для исследования с целью идентификации возбудителя являются обработанные в центрифуге экссудаты, выделения, а также - кровь, пунктаты паренхиматозных органов, мазки и отпечатки тканей.