5.2.3Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами

В три сухие пробирки наливают по 1-2 см³ концентрированной азотной, серной и соляной кислот. Затем, наклонив каждую пробирку, осторожно, по стенке приливают в нее из пипетки по 0,5 см³ исследуемого раствора белка так, чтобы он не смешивался с кислотой. В месте соприкосновения двух жидкостей появляется белый аморфный осадок белка. При встряхивании осадок, выпавший при действии азотной кислоты, увеличивается, а осадки, выпавшие при действии соляной и серной кислот, растворяются в них избытке.

Концентрированные минеральные кислоты вызывают необратимое осаждение белков. Это связано как с денатурацией белковых молекул, так и с денатурацией белка.

5.2.4 Осаждение белков органическими кислотами

В две пробирки наливают по 2-3 см³ раствора белка и добавляют в одну из них несколько капель раствора трихлор- уксусной кислоты, в другую - несколько капель раствора сульфосалициловой кислоты. В обоих случаях наблюдается выпадение осадка белка.

Сульфосалициловая и трихлоруксусная кислоты являются очень чувствительными и специфическими реактивами на белок. Трихлоруксусная кислота осаждает только белки и не осаждает продукты распада белка и аминокислоты, поэтому ею пользуются часто для полного удаления белков из биологических жидкостей (например, сыворотки крови). В этих условиях продукты распада белков остаются в растворе.

5.2.5 Осаждение белков солями тяжелых металлов

В две пробирки наливают 1-1,5 см³ исследуемого раствора белка и медленно, по каплям при встряхивании прибавляют в одну из них раствор сернокислой меди, а в другую - раствор уксуснокислого свинца. Образуется хлопьевидный оса док вследствие образования малорастворимого солеобразного соединения (с солью меди голубого цвета или с солью свинца белого цвета). При избытке реактива осадок снова растворяется.

Соли тяжелых металлов (Нg; Аg; Сu; Рb и др.) вызывают необратимое осаждение белков, образуя с ними нерастворимые в воде солеобразные соединения. Вследствие этого белки применяют в качестве противоядия при отравлении, например, ртутными солями (сулема). Но некоторые из таких осадков (например, с солями меди, свинца, цинка) растворяются в избытке осадителя в результате пептизации осадка адсорбирующимися на его частицах ионами.

5.2.6 Осаждение белков алкалоидными реактивами

В три пробирки наливают по 1-1,5 см³ раствора белка. Подкисляют раствор белка 1-2 каплями уксусной кислоты. Добавляют в первую пробирку раствор пикриновой кислоты, выделяется желтоватый осадок.

Во вторую пробирку добавляют несколько капель танина, образуется объемный хлопьевидный осадок, растворимый в избытке реактива. В третью пробирку добавляют несколько капель соляной кислоты и приливают по каплям раствор железосинеродистого калия, взбалтывая после добавления каждой капли. Выпадает осадок.

В четвертую пробирку наливают 1,5-2 см³ белка, слегка подкисляя соляной кислотой и добавляют несколько капель раствора иодной ртути в иодистом калии. Выпадает осадок белка. Алкалоиды являются азотистыми основаниями, содержащими в молекуле различные гетероциклы с атомами азота. В белковых молекулах имеются некоторые гетероциклы – имидазольное, пирролидиновое и другие кольца, входящие в состав ряда кислот. Поэтому белкам характерны некоторые реакции, типичные для алкалоидов.