- •Карагандинский государственный медицинский университет Кафедра Молекулярной биологии и медицинской генетики
- •Методические рекомендации для семинарских занятий
- •Тема 1: Введение в молекулярную биологию и медицинскую генетику. Техника микроскопирования.
- •Тема 2: Молекулярное строение клеточных мембран.
- •Тема 3. Молекулярные механизмы внутриклеточного транспорта
- •Тема 4. Структура внутриклеточных органелл
- •Тема 5. Функция внутриклеточных органелл.
- •Тема 6. Цитоскелет. Межклеточные контакты, межклеточная адгезия, внеклеточный матрикс.
- •Тема 7. Молекулярные механизмы передачи сигнала в клетку. Основные механизмы внутриклеточной сигнализации.
- •Тема 8. Строение и функции белков. Фолдинг белков.
- •Тема 9. Строение и функции днк
- •Тема 10. Репликация днк
- •Тема 11. Генетический код.
- •Тема 12. Виды рнк. Строение и функции. Транскрипция. Посттранскрипционная модификация рнк
- •Тема 13. Биосинтез белка.
- •Тема 14. Рубежный контроль – коллоквиум
Тема 3. Молекулярные механизмы внутриклеточного транспорта
Цель: Изучение основных видов транспорта через мембрану
Задачи обучения:
Изучить виды трансмембранного переноса , экзоцитоза, эндоцитоза,
везикулярного транспорта.
Основные вопросы темы:
1. Компоненты мембраны, осуществляющие транспорт
2. Активный и пассивный транспорт.
3. Механизм работы белков – переносчиков
4. Белки-насосы
5. Везикулярный транспорт.
6. Эндоцитоз и его виды.
7. Экзоцитоз и его значение.
Информационный блок
Простейшей формой транспорта через биомембраны является свободная диффузия (облегченная диффузия). Она часто облегчается определенными мембранными белками, которые можно разделить на две группы:
1. Канальные белки образуют в биомембранах заполненные водой поры, проницаемые для определенных ионов. Например, имеются специфические ионные каналы для ионов Na+, К+, Са2+ и Cl- (см. с. 340).
2. В отличие от ионных каналов транспортные белки избирательно связывают молекулы субстрата и за счет конформационных изменений переносят их через мембрану. В этом отношении транспортные белки (белки-переносчики, пермеазы) похожи на ферменты.
Свободная диффузия и транспортные процессы, обеспечиваемые ионными каналами и переносчиками, осуществляются по градиенту концентрации или градиенту электрическою заряда (называемым вместе электрохимическим градиентом). Такие механизмы транспорта классифицируются как «пассивный транспорт». Например, по такому механизму в клетки поступает глюкоза из крови, где ее концентрация гораздо выше.
В противоположность этому механизму активный транспорт идет против градиента концентрации или заряда, поэтому активный транспорт требует притока дополнительной энергии, которая обычно обеспечивается за счет гидролиза АТФ.
С помощью транспортных систем осуществляется регуляция объема клеток, величины рН и ионного состава цитоплазмы. Благодаря транспортным системам клетки накапливают метаболиты, важные для обеспечения энергетического цикла и метаболических процессов, а также выводят в окружающую среду токсические вещества.
Эндоцитоз
Различают 2 основных типа:
1.Фагоцитоз – поглощение крупных частиц – вирусов, бактерий, клеток, обломков. Фагоцитоз осуществляется с помощью макрофагов и гранулоцитов.
2.Пиноцитоз – присущ всем клеткам – поглощение жидкости и мелких гранул.
Механизм эндоцитоза:
1.Этап впячивание или инвагинация плазматической мембраны. Образование эндоцитозной везикулы, похожей на колбу.
2.Шейка везикулы сливается, отшнуровывается от мембраны и везикула – внутри клетки.
Судьба везикул различна:
1.Они могут направляться к комплексу Гольджи.
2.Сливаться с лизосомами, образуя вторичные лизосомы или фаголизосомы.
Экзоцитоз – имеет большое значение. Клетка обновляет мембраны, осуществляет секреторную деятельность.
Механизм экзоцитоза. 1) вещества в везикулах отпочковываются от комплекса Гольджи или ЭПС; 2) транспортируются к мембране; 3) сливается с ней. Везикула выполнила свое предназначение.
Экзоцитоз может быть: 1) непрерывным (конститутивный); 2) регулируемый.
Вещества, высвобождаемые в процессе экзоцитоза деля на 3 группы:
1.Антигены (остаются связанными с клеточной поверхностью).
2.Вещества внеклеточного матрикса
3.Сигнальные молекулы (гормоны, медиаторы).
Мембраны, как структуры клеток, могут играть роль в развитии патогенеза генных болезней.
1.Отсутствие некоторых белковых рецепторов на клеточной поверхности приводят к семейной гиперхолестеринемии.
2. Клиника витамин Д-резистентного рахита обусловлена дефектом рецептора 1,25 – дигидроксихолекальций ферола
При муковисцидозе нарушается регуляция транспорта хлоридов через мембрану эпителиальных клеток, которая в норме регулируется кистофиброзным транспортным регулятором. Синдром полной нечувствительности к андрогенам (тестикулярная феминизация). Отсутствие чувствительности клеток приводит к развитию женского фенотипа при хромосомном наборе ХУ.
Причина: мутация в Х-сцепленном гене, кодирующем синтез рецептора андрогенов.
Самостоятельная работа студентов:
Раб.1. Заполнить в альбоме таблицу «Типы транспорта».
Указать, с помощью какого типа транспорта (диффузия, осмос, облегченная диффузия, активный транспорт, эндоцитоз) в клетку проникают перечисленные вещества.
Вещество |
Вид транспорта? |
Активный / Пассивный ? |
Кислород |
|
|
Углекислый газ |
|
|
Вода |
|
|
Мочевина |
|
|
Глюкоза |
|
|
Глицерол |
|
|
Ионы натрия |
|
|
Ионы калия |
|
|
Аминокислоты |
|
|
Биополимеры |
|
|
Обломки клеток |
|
|
Раб.2.(работа с микроскопом)(х40) Осмотические явления в клетках. Плазмолиз и деплазмолиз.
Временный препарат из листа элодеи положить на предметное стекло в каплю гипертонического раствора NaCl. Наблюдать под большим увеличением сжатие цитоплазмы и отделение ее от клеточной оболочки. Дать объяснение полученным результатам. Заменить гипертонический раствор NaCl водой и проследить явление деплазмолиза. Объяснить полученные результаты. Зарисовать клетки на стадии плазмолиза и деплазмолиза.
Виды контроля:
1. Контроль исходного уровня знаний
2. Разбор результатов самостоятельной работы студентов
3. Контроль итогового уровня знаний
Методы обучения и преподавания: проведение практических занятий, работа с компьютерными моделями и микропрепаратами.