Дата____________
Тема №2 Физиология микроорганизмов
ЗАНЯТИЕ№4
ФИЗИОЛОГИЯ МИКРОБОВ, ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР АЭРОБОВ И ИХ ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Цель занятий: изучить культуральные и биохимические свойства бактерий; изучить основные биологические свойства аэробов, методы выявления чистых культур аэробов, с целью их идентификации.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Особенности метаболизма бактерий.
Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.
Питание бактерий.
Основные принципы культивирования.
Ферменты бактерий. Идентификация бактерий по ферментативной активности.
Внутривидовая идентификация бактерий (эпидемическое маркирование).
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
Описать культуральные свойства
Идентифицировать микроорганизмы
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
об алгоритмах и правилах их использования для идентификации микроорганизмов
Работа№1. Методы выделения и идентификации аэробных инфекций
Цель: изучить основные методы выделения и идентификации аэробов (см. теоретическую справку)
I
II
III
А ) *
IV
Ж)
Б
)
V V
Е)
В) Д)
Реакция агглютинации
Г)
I Сбор исследуемого материала
II Посев исследуемых микроорганизмов на простые, ДДС и элективные питательные среды
III С целью получения изолированных колоний
IV Накопление чистой культуры на скошенной питательной среде
V Идентификация выделенной чистой культуры
А) изучение морфологических и тинкториальных свойств
Б) изучение культуральных свойств
В) изучение антигенной структуры возбудителя с помощью постановки реакции агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными сыворотками
Г) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на среды Гисса
Д) определение чувствительности микробов к антибиотикам, с помощью метода бумажных дисков
Е) проба с бактериофагами (реакция фаголизабельности) – метод стекающей капли по Отто для выявления вида возбудителя
Ж) биопроба на лабораторных животных – изучают клинику и патогенез заболевания
* проведение внутривидовой идентификации для выявления источников инфекции (фаготипирования)
Работа№2. Питательные среды
Цель: создать представление о питательных средах; классифицировать предложенные питательные среды; результаты оформить в виде таблицы (см. теоретическую справку)
среда |
происхождение |
консистенция |
назначение |
||||||
|
естест-венного |
искусст-венного |
жидкие |
полужидкие |
плотные |
общего |
ДДС |
Элективные |
|
Мясопептон ный агар (МПА) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Мясопептонный Бульон (МПБ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Среда Эндо |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Кровяной агар |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Пептонная вода |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Среда Гисса |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Среда 199 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Свернутая сыворотка |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Желточно солевой агар (ЖСА) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
В
ывод:
Работа № 3 Характер роста бактерий на основных питательных средах
(дифференциально-диагностические признаки)
Цель: изучить характер роста бактерий на основных и дифференциально-диагностических питательных средах; изучить культуральные свойства микроорганизмов на плотных средах.
критерии |
описание |
колонии |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа№4. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах (дифференциально – диагностические признаки)
Цель: изучить характер роста бактерий на жидких питательных средах; изучить особенности роста микроорганизмов
- характер роста: 1) диффузный; 2) придонный; 3) поверхностный.
- прозрачность: 1) прозрачное; 2) мутное.
Опыт №1 Опыт №2 Опыт №3
МПБ МПБ 1% пептонная вода
(кишечная палочка) (возбудитель сибирской язвы) (возбудитель холеры)
Вывод:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа№5. Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
Цель: ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку)
название |
рисунок |
значение |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа№6 Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)
Цель: изучить ферментативную активность микроорганизмов (см. теоретическую справку)
вид м/о
|
сахаролитическая
|
протеолитическая |
||||||
лактоза |
глюкоза |
мальтоза |
маннит |
сахароза |
индол |
Н2S |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) Каталазная активность аэробов
Цель: изучить каталазную активность микроорганизмов; определить тип дыхания исследуемой культуры (см. теоретическую справку)
Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа №1
Основные принципы выделения и идентификации чистых культур бактерий
Чистую культуру бактерий получают для проведения дифференциально-диагностических исследований - идентификации, которая достигается путем определения морфологических, культуральных, биохимических и других признаков микроорганизмов.
Морфологические и тинкториальные признаки бактерий изучают при микроскопическом исследовании мазков, окрашенных разными методами и нативных препаратов.
Культуральные свойства характеризуются питательными потребностями, условиями и типом роста бактерий на плотных и жидких питательных средах. Они устанавливаются по характеру роста на питательной среде.
При идентификации бактерий до рода и вида обращают внимание на пигменты, окрашивающие колонии и питательную среду в разнообразные цвета. Например, красный пигмент образуют Serratia marcescens, золотистый пигмент -Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк), сине-зеленый пигмент - Pseudomas aeruginosa (синегнойная палочка).
Работа №2