1,4. Методические указания к выполнению работы

Исследование микроорганизмов в живом состоянии проводят в «раздавленной» и « висячей» капле.

Приготовление препаратов микроорганизмов .При приготовлении раздавленной капли материал (воду и культуру) наносят на предметное стекло и сверху накладывают покровное. Накрывают каплю покровным стеклом так, чтобы под ним не образовались пузырьки воздуха. Стеклянной палочкой прижимают покровное стекло к предметному. Капли материала надо брать такой величины, чтобы они заполняли все пространство между покровным и предметным стеклом и не выступали за края покровного. Излишек выступившей жидкости удаляют фильтровальной бумагой, поднося ее к краям покровного стекла.

Препарат можно рассматривать как с сухими системами, так и с иммерсионной. Пре­параты быстро высыхают, поэтому если их приходится рассматри­вать не тотчас, а спустя некоторое время, их помещают во влажную камеру (чашку Петри), на дно которой положено 2—3 влажных кружка фильтровальной бумаги, покрытых двумя сухими.

Препараты микроскопируют, слегка затемняя поле зрения: конденсор немного опускают, поток света регулируют вогнутым зеркалом. Вначале пользуются объективом х8. Обнаружив край капли, устанавливают объектив х40 (поворотом револьвера) или иммерсионный объектив.

Для висячей капли необходимо иметь предметное стекло с луночкой. С жидкой питательной среды маленькую каплю культуры наносят на тщательно промытое покровное стекло; если же имеется куль­тура на плотной среде, то на покровное стекло предварительно наносят маленькую каплю водопроводной воды или изотонического раствора хлорида натрия, затем петлей прикасаются к культуре и приставшие к ней бактерии размешивают в приготовленной капле. Можно также заранее приготовить взвесь микроорганизмов в изо­тоническом растворе хлорида натрия и взять каплю из нее. В том и в другом случае на покровное стекло накладывают предметное стекло с луночкой посередине, края которой предварительно обмазаны вазелином. Предметное стекло слегка прижимают к по­кровному, в результате чего оба стекла склеиваются. После этого препарат перевертывают покровным стеклом кверху. Получается герметически закрытая камера, в которой капля долго не высыхает. Под микроскопом край капли сначала отыскивают со слабым уве­личением и при суженной диафрагме, а потом исследуют препарат при помощи более сильной сухой системы.

1.5.Оформление работы

Все просмотренные под микроскопом препараты зарисовывают, указав под каждым рисунком название объекта и увеличение микроскопа.

1.6.Контрольные вопросы

1.Что такое разрешающая способность и полезное увеличение микроскопа ?

2. Из каких элементов состоит механическая часть микроскопа?

3. Что составляет оптическую систему микроскопа? Какие объективы и окуляры входят в комплект микроскопа?

4. Что входит в состав осветительной системы микроскопа? Правила пользования зеркалом, конденсором и ирисовой диафрагмой.

5. Как правильно установить максимальную освещенность поля зрения?

6.Какие правила применяют при работе со световым микроскопом?

7. В чем особенности устройства и принцип работы темно-польного, фазово-контрастного, люминесцентного, электронного микроскопов ?.

8. От чего зависит четкость изображения, получаемого посредством микроскопа ?

9. Как приготовить препараты живых клеток микроорганизмов?

49