БИОИНЖЕНЕРИЯ
.pdfМегануклеазы интронов I группы
Мегануклеазы интеинов
Мегануклеазы интронов II группы
Кристаллическая структура 5 семейств мегануклеаз
A – LAGLIDADG
B – PD-D/E-XK
C – His-Cys Box
D – GIY-YIG
E - HNH
Механизмы репарации двухцепочечных разрывов
Механизм редактирования генома с помощью мегануклеаз
Селекция мегануклеазы I-CreI, направленная
на узнавание нового сайта в ДНК
ФЕРМЕНТЫ ДЛЯ ГЕННОЙ
ИНЖЕНЕРИИ
ДНК-полимеразы
ДНК-полимераза I (Escherichia coli DNA
Polymerase I)
Одна единица ДНК-полимеразы I полимеризует 10 наномоль свободных нуклеотидов за 30 минут при 37 градусах Цельсия
Обладает 5' - 3' и 3' - 5‘ экзонуклеазной активностью
Используется для ник-трансляции (nick-translation): ДНКаза+ДНК полимераза 1+меченые нуклеотиды
Синтез второй цепи в комплементарной ДНК (кДНК)
ДНК-полимеразы
Фермент Клёнова (Escherichia coli DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment)
Одна единица ДНК-полимеразы I полимеризует 10 наномоль свободных нуклеотидов за 30 минут при 37 градусах Цельсия
Обладает полимеразной и 3' - 5‘ экзонуклеазной активностью
Секвенирование ДНК методом Сенгера
Синтез второй цепи в комплементарной ДНК (кДНК)
Заполнение 5'-выступающих концов ДНК с образованием "тупых" концов
Удаление 3'-выступающих концов с образованием "тупых" концов