- •Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тюменская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской федерации
- •План ответа на вопросы по частной микробиологии
- •Методические указания Основные семейства рнк— и днк— содержащих вирусов, вызывающих острые респираторные вирусные инфекции (орви)
- •Ситуационная задача
- •1.Вакцина живая сухая гриппозная детская
- •1. Укажите таксономическое положение возбудителя
- •Ситуационные задачи
- •Теоретическая справка
- •1. Выявление внутриклеточных включений, вызванных репродукцией вируса.
- •Принципиальная схема лабораторной диагностики вирусных и риккетсиозных инфекции
- •I этап – забор исследуемого материала
- •Задача 1
- •Задача 2
- •1. Вакцина «Энджерикс»
- •Ig человека против гепатита в
- •Ситуационные задачи
- •Теоретическая спаравка лабораторная диагностика гепатита в
- •Лабораторная диагностика гепатита д
- •Лабораторная диагностика гепатита с
- •Лабораторная диагностика вич-инфекции
- •Антимикробные препараты
- •Ситуационная задача
- •1.Вакцина «Энцепур»
- •1.Иммуноглобулин против клещевого энцефалита
- •1.Инактивированная вакцина для профилактики бешенства
- •1.Вакцина антирабическая культуральная инактивированная
- •Ситуационные задачи
- •Теоретическая справка лабораторная диагностика клещевого энцефалита
- •Лабораторная диагностика бешенства
- •1.Диагностическая сыворотка полиомиелитная 1 типа
- •1.Echo диагностическая сыворотка Тип 4 поливалентная
- •1.Вакцина полиомиелитная пероральная 1, 2, 3 типов
- •1.Вакцина «ИмоваксПолио»
- •1.Вакцина «Аваксим»
- •Ситуационные задачи
- •Теоретическая справка Эпидемиология энтеровирусных инфекций
- •Особенности лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций Гепатит а
- •Гепатит е
- •Маркеры гепатитов а и е
- •Вирусы Коксаки, echo, полиомиелита
- •Ротавирусы
- •1. Кори;
Лабораторная диагностика бешенства
Лабораторная диагностика бешенства проводится на основании выявления телец Бабеша-Негри. Внутриклеточные включения при бешенстве (тельца Бабеша - Негри) обнаруживаются в нервных клетках Аммонова рога и в клетках Пуркинье мозжечки. Тельца расположены в цитоплазме рядом с ядром клетки. При окраске по Туревичу или Манну тельца Бабеша-Негри окрашиваются в красный цвет.
Для исследования берут кусочки мозговой ткани в стерильную посуду и хранят в период транспортировки в лабораторию в глицерине на льду.
Специфический антиген в мазках-отпечатках и гистологических срезах мозга и подчелюстных желёз погибших людей и животных определяют в прямой и непрямой РИФ с использованием коммерческого антирабического иммуноглобулина. Для постановки биологической пробы используют белых мышей, заражают их интрацеребрально, и у заражённых животных развиваются параличи с последующей гибелью животных. Животных вскрывают и исследуют мозг на наличие телец Бабеша-Негри и специфического антигена в РИФ.
Для идентификации возбудителя используют следующие особенности вируса. Возбудитель представлен одним антигенным вариантом. Выделяют "фиксированный" и "уличный" вирус бешенства. Оба вируса антигенно идентичны. Нейтрализующее действие на возбудителя оказывают антитела к поверхностным гликопротеиновым антигенам. Комплементсвязывающие антитела к антигенам нуклеокапсида не оказывают протективного действия. Вирус имеет следующие антигены: NP — нуклеопротеидный (антиген сердцевины), G — поверхностный гликопротеидный Ag, Ml и М2 — два негликозилированных белка, L и NS — протеины транскриптазы. Для идентификации вируса используют комплементсвязывающие антитела к NPAgвируса и вируснейтрализующие антитела к GAg вируса.
Серодиагностика проводится только для определения поствакцинального иммунитета. Антитела к вирусу бешенства выявляют в РН, РСК, РИФ, РИА и ИФА.
Занятие 2.1.4
Вирусные кишечные инфекции. Лабораторная диагностика гепатитов А, Е и полиомиелита
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
Изучить основные группы энтеровирусов.
Изучить биологические свойства возбудителей гепатитов А, Е, полиомиелита, вирусов Коксаки, ECHO, ротавирусов.
Изучить принципы вирусологической диагностики гепатитов А, Е, полиомиелита, инфекций, вызываемых вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами.
Научиться подбирать антимикробные препараты для идентификации,
лечения и профилактики заболеваний, вызванных энтеровирусами.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Характеристику биологических свойств возбудителей.
Клинику, патогенез, эпидемиологию, восприимчивость, иммунитет, механизм передачи возбудителей при энтеровирусных инфекциях.
Принципы лабораторной диагностики гепатитов А, Е, полиомиелита, инфекций, вызванных вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами.
Основы профилактики гепатитов А, Е, полиомиелита,
инфекций вызванных вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами.
Препараты для диагностики, лечения и профилактики энтеровирусных
инфекций.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
составлять алгоритм вирусологического обследования пациента с энтеровирусной инфекцией;
интерпретировать результаты вирусологических исследований с целью диагностики энтеровирусных инфекций;
классифицировать препараты в соответствии с их назначением
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:
о правилах забора материала для исследования;
о современных вакцинах для профилактики и лечебных препаратах
Работа № 1. Принципиальная лабораторная диагностика энтеровирусных инфекции
Самостоятельная работа: составьте алгоритм лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций (см. теоретическую справку).
Исследуемый материал:
____________________
____________________
____________________
Работа №2. Вирусологическая диагностика энтеровирусов
Методические указания
Идентификацию вирусов проводят в различных серологических реакциях, используя известные специфические антитела. Например, вирусы полиомиелита можно дифференцировать от вирусов Коксаки А и В, ECHO в РСК, используя антитела к общему антигену (VP-4) для всех типов вирусов полиомиелита.
В реакции использована диагностическая сыворотка, содержащая антитела к общему (внутреннему) антигену вируса полиомиелита VP-4 и исследуемый вируссодержащий материал.
Тип вируса полиомиелита определяют в реакции нейтрализации по цветной пробе, используя антитела к поверхностным антигенам вирусов полиомиелита 3-х типов (VP-1, VP-2 и VP-3).
Цель: изучить методы вирусологической диагностики энтеровирусных инфекций.
А) Самостоятельная работа: учесть результат РСК, поставленной с целью идентификации вируса полиомиелита, выделенного от больного с подозрением на полиомиелит.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Постановка:
Опыт КС КВ контроль эрит. барана КГС
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) Самостоятельная работа: определить тип вируса полиомиелита в реакции нейтрализации по результату постановки цветной пробы, используя антитела к поверхностным антигенам вирусов полиомиелита 3-х типов (VP-1, УР-2и VP-3). Учесть результат реакции. Сделать вывод.
Методические указания
Цветная проба для обнаружения вируса полиомиелита в культуре тканиприменяется наряду с изучением цитопатического эффекта, вызываемого вирусом в культуре тканей. В пробирки с культурами тканей и питательной средой вносят исследуемый материал и индикатор феноловый красный, пробирки ставят в термостат. В этом случае, если вирус не размножается в культуре ткани, кислые продукты метаболизма клеток поступают в среду, которая приобретает желтую окраску. Если же полиовирусы размножаются в клетках тканей и пораженные клетки гибнут, то среда сохраняет первоначальный красный цвет, так как в неё не поступают кислые продукты метаболизма клеток и не изменяют её окраску. При рН 7,4-7,8 цвет среды красный, при рН 7,2 — оранжевый, при рН 7,0 и ниже — жёлтый. Таким образом, по изменению цвета среды с культурой тканей, куда внесён исследуемый материал и индикатор, можно судить о поражении клеток вирусами.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
|
Диагностические сыворотки, содержащие антитела к поверхностным антигенам вируса полиомиелита |
Контроль специфической сы- воротки |
Контроль культуры клеток |
Контроль вируса | |||||
|
VP-1(тип1) |
VP-2 (тип2) |
VP-3 (типЗ) |
|
|
| |||
Результат реакции
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа №3. Серологическая диагностика энтеровирусов.
Цель: изучить методы серологической диагностики энтеровирусных инфекций.
А) Самостоятельная работа: учесть готовый результат РСК с парными сыворотками больного с целью выявления нарастания титра специфических антител против вируса Коксаки тип А.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Постановка:
титры 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 КА КС КГС
1-ая неделя
2-ая неделя
Результат:______________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) Самостоятельная работа: учесть готовый результат реакции РТГА с парными сыворотками реконвалесцента с целью выявления нарастания титра антигемагглютинирующих антител к вирусу ECHO-11.
Направление:__________________________________________________________________
Ингредиенты:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Постановка:
Титры 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 КЭ К спец.сыв. КД
1-ая неделя
2-ая неделя
Результат:______________________________________________________________________
Вывод:________________________________________________________________________
Работа № 4. Ситуационная задача
Женщина, 25 лет на 3 неделе беременности поступила в клинику с жалобами на общую слабость, тошноту, отсутствие аппетит, ноющие боли в правом подреберье. Из анамнеза, больная приехала из Туркменистана.
Самостоятельная работа: ответьте на вопросы -
Какой вирус гепатита мог вызвать инфекционный процесс у больной?
________________________________________________________________________
Перечислить признаки, характерные для данной инфекции.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Составить план лабораторного обследования на гепатит, указать, какие реакции и с какой целью используются для диагностики заболевания.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 5. Антимикробные препараты
Цель: изучить препараты для лечения, профилактики и диагностики энтеровирусных инфекций.
Самостоятельная работа: классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).