- •Гоу впо Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации Кафедра биологической химии
- •Тема «Строение и функции белков» (занятия 1- 4)
- •Занятие 1 «Техника безопасности. Цветные реакции, обнаруживающие белки и аминокислоты»
- •Студент должен знать:
- •Аудиторная работа Лабораторная работа (цветные реакции, обнаруживающие белок)
- •Принято называть пептидной связью.
- •Ход работы. К 5 каплям раствора белка добавить 5 капель 0,1%-ного раствора нингидрина, кипятить 1-2 мин - появляется розово-фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание.
- •Соон cooh Цистеин Серин
- •Занятие 2 («Хроматографическое разделение аминокислот. Высаливание белков. Количественное определение белков»)
- •Аудиторная работа Лабораторная работа (Хроматографическое разделение аминокислот - демонстрация прибора и хроматограммы. Высаливание белков, их количественное определение)
- •Ход работы:
- •График зависимости оптической плотности растворов белка в пробах с сульфосалициловой кислотой от концентрации белка
- •Занятие 3 «Химия сложных белков. Определение компонентов фосфо- и нуклеопротеидов»
- •Аудиторная работа Лабораторная работа (Определение компонентов фосфо- и нуклеопротеидов)
- •2. Гидролиз нуклеопротеидов
- •Занятие 4 (итоговое)
- •Аудиторная работа. Лабораторные работы
- •Занятие 5 (Активация и торможение ферментативных реакций, номенклатура и классификация ферментных эффекторов)
- •Аудиторная работа. Лабораторная работа (активаторы и ингибиторы ферментативных реакций)
- •1. Выявление ускоряющего и замедляющего влияния на ферменты.
- •При определении активности фермента получены данные, представленные в таблице:
- •1. Отличать понятия катаболизмианаболизм от понятийсинтез идеструкция (расщепление).
- •Аудиторная работа. Лабораторная работа (Оксидоредуктазы)
- •Занятие 8 («Тканевое дыхание, локализация и участники процесса»)
- •Аудиторная работа. Лабораторная работа (сопоставление окислительно-восстановительного потенциала рибофлавина и метиленовой сини).
- •Дать (приводя ход решения) ответы на следующие задачи или выполнить указанные действия:
- •Занятие 9 (итоговое).
1. Отличать понятия катаболизмианаболизм от понятийсинтез идеструкция (расщепление).
2. Охарактеризовать основные этапы метаболизма
3. Составить схему круговорота энергии и веществ в живой природе с учетом аутотрофных и гетеротрофных организмов.
4. Изобразить структурные формулы важнейших макроэргических соединений живой природы.
5. Составить схему экспериментального выявления окислительно-восстановительных свойств у исследуемого вещества (на примере тирозина)
Студент должен получить представление:
1) об общих чертах метаболических процессов,
2) о важнейших источниках энергии в животном организме,
3) о значении свободнорадикального окисления как физиологического процесса,
4) о патологических состояниях, связанных с гипероксидацией,
5) о значении антиоксидантов в комплексе терапевтических мероприятий.
Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:
1) основные положения термодинамики,
2) понятия о фазовых реакциях,
3) сведения о катализе,
5) сведения о процессах фотосинтеза в клетке,
6) современная номенклатура химических соединений.
Аудиторная работа. Лабораторная работа (Оксидоредуктазы)
Обнаружение тирозиназы в картофеле. Фермент тирозиназа (или согласно классификации моноамин: О2-оксидоредуктаза дезаминирующая) содержится в тканях растений и животных, относится к числу медьсодержащих белков, катализирует, как следует из рационального названия, окислительное дезаминирование моноаминов согласно реакции:
О2+Моноамин + Н2О→Альдегид +Аммиак + Н2О2.
В организме тирозиназа катализирует превращение адреналина в адренохром - бурый пигмент.
Ход работы. Примерно 1 г картофеля измельчить скальпелем и растереть в ступке с 3 мл дистиллированной воды. Гомогенат фильтровать через двойной слой марли - в фильтрате содержится тирозиназа.
В две пробирки внести по 1 мл фильтрата. Содержимое одной пробирки нагреть до кипения и поддерживать кипение 2 мин (инактивация фермента). В обе пробирки внести по 5 капель 0,1%-ного раствора адреналина, смешать и инкубировать при 400С, периодически встряхивая и наблюдая за изменением окраски.
Жидкость в пробирке с активным (не подвергшимся нагреванию) фильтратом розовеет, затем принимает бурую и темную окраску. Это связано с окислительным дезаминированием, приводящим к образованию пигментов. В пробирке, где фермент инактивирован кипячением, изменение окраски не наблюдается, т. е. адреналин не подвергается превращениям.
Аргументировано и кратко ответить на следующее:
1. Может ли осуществиться окисление СНЗ - СН2 - СН2 - ОН в СН3 - СН2-СН=Ов бескислородной среде? Какие условия для этого необходимы? Написать схему реакции.
2. Может ли и при каком условии в бескислородной среде произойти окисление по типу СН3 - СН2 - СН=О → СН3 - СН2 - СООН? Укажите необходимые компоненты, составьте схему реакции.
3. Является ли кислород исключительным (единственным) конечным акцептором водорода в цепи тканевого дыхания и вообще в биологическом окислении? Почему эволюция «избрала» кислород в качестве конечного акцептора водорода?
4. Реакция СН3 - СН =О → СН3 - СООН осуществлена в бескислородной среде. Как объяснить появление двух атомов кислорода в продукте реакции, в то время как исходный продукт содержит только один атом кислорода?
5. Какие компоненты, необходимые для осуществления изображенной ниже реакции, отсутствуют в схеме?
СООН - СН2-- СН2 – СООН + 1/2О2 → СООН - СН = СН - СООН+Н2О.
Почему окисление в живой природе отождествляли с горением ?
Описать внешние признаки сходства между горением и процессом окисления в организме.
Где в организме осуществляется потребление кислорода ?
Назвать предпосылки, обусловившие появление теории активации водорода.
Сформулировать понятие «дегидрирование», определить роль кислорода и воды в биологическом окислении, протекающем как процесс дегидрирования.
Функция кислорода в дегидрировании (определить с помощью трёх слов).
Сформулировать современное положение о биологическом окислении, назвать его виды.
Свободнорадикальное окисление в клетке, активные формы кислорода, как ограничивается интенсивность процесса.