- •Министерство образования и науки рф
- •Глава 2.Экспериментальная часть………………………...........19
- •2.1.2. Метод «зеленого» синтеза бионаночастиц серебра с использованием вытяжек из Chelidonium majus…………………………………….……………….19
- •Список сокращений
- •Введение
- •Глава 1. Обзор литературы
- •1.2 Основные методы получения бионаночастиц серебра
- •1.2.1. Получение бионаночастиц серебра методом химического восстановления в растворах
- •1.2. 2. «Зеленый» синтез: получение бионаночастиц с использованием экстрактов лекарственных растений
- •1.3. Физико-химические свойства бионаночастиц сереба
- •1.4.1. Зависимость форм и размеров бионаночастиц серебра
- •1.4.2. Методы измерения размеров наночастиц
- •Глава 2. Экспериментальная часть
- •2.1. Материалы и методы
- •2.1.1. Растительный материал и приготовление вытяжек из лекарственного сырья
- •Образцы бионаночастиц серебра были синтезированы с помощью чистотела большого следующим образом:
- •2.1.3. Оценка фунгицидных свойств бионаносеребра
- •2.1.4. Статистическая обработка результатов
- •2. 2. Результаты исследований и их обсуждение
- •2.2. Влияние обработки семян пшеницы бионаночастицами серебра на ростовые процессы проростков на фоне их инфицирования патогенным грибом Fusarium оxysporum
- •Список использованных источников
- •Aniszewski, t. Alkaloids — secrets of life [Text] / t. Aniszewski; Elsevier Science, 2007. – 334с.- isbn: 0444527362.
Глава 2. Экспериментальная часть
2.1. Материалы и методы
2.1.1. Растительный материал и приготовление вытяжек из лекарственного сырья
В качестве объекта исследований использовали проростки озимой пшеницы (Triticum aestivum L.) с. Казанская 560, которые выращивали в течение 7 суток при комнатной температуре.
В работе был использован сок чистотела большого (Chelidonium majus L.), который был собран в экологически чистых районах Республики Татарстан. Трава содержит более 20 алкалоидов, эфирные масла, витамин С (аскорбиновая кислота) (от 170 до 1000 мг %), витамин А (каротин) (до 14,9 мг %), флавоноиды, сапонины и органические кислоты (лимонную, яблочную, янтарную и хелидоновую).
Образцы растительных соков из чистотела большого были получены следующим способом: свежие листья (5 г) промывали проточной водопроводной водой и измельчали. Полученную массу заворачивали в 4–6 слоев марли, отжимали между двумя стерильными металлическими пластинами, помещенными в тиски. Полученный сок центрифугировали 10 мин. при 4000 об/мин., далее супернатант пропускали через мембранный фильтр Synpor с диаметром пор 0,2 мкм. Стерильный растительный сок разливали в пробирки Эппендорф и хранили при температуре –20 °C. Перед исследованием соки растений разводили стерильной дистиллированной водой до концентрации 1:10 и 1:100.
2.1.2. Метод «зеленого» синтеза бионаночастиц серебра с использованием вытяжек из Chelidonium majus
Образцы бионаночастиц серебра были синтезированы с помощью чистотела большого следующим образом:
Приготовленный сок чистотела большого (7 мл) смешивали с дистиллированной водой (29 мл) и добавили сульфат серебра AgSO4 (0,06 г). Полученный раствор перемешали 2 минуты при температуре 65С в магнитной мешалке, обладающей функцией электроплитки -Hei-Standart. Наблюдали изменение цвета от светло-желтого до коричневого, что свидетельствует образование бионаночастиц серебра. Перед исследованием раствор с бионаночастицами серебра разводили дистиллированной водой до концентрации 1:10; 1:100 и 1:1000. БНЧ серебра добавили к тест-системам (контрольным и зараженным проросткам пшеницы), отсюда получили биологический эффект.
Рисунок 2. Схема «зеленого» синтеза бионаночастиц и их тестирования.
2.1.3. Оценка фунгицидных свойств бионаносеребра
Для изучения влияния раствора бионаносеребра на всхожесть семян и рост инфицированных проростков озимой пшеницы (Triticum aestivum L.) с. Казанская 560, семена замачивали на сутки в водопроводной воде со спорами (Кое 500 тыс.спор/мл) фитопатогенного гриба Fusarium оxysporum [Smirnov, 2011]. Затем инфицированные и неинфицированные семена проращивали в темноте, в чашках Петри, на воде (Контроль) и на растворах, разведенных 1:10 и 1:100. Длину побегов и корней проростков пшеницы измеряли на 3 и 7 сутки, выращивания.
2.1.4. Статистическая обработка результатов
Статистическую обработку результатов проводили с использованием стандартных математических методов в программе Microsoft Excel. Группу данных считали однородной, если среднеквадратическое отклонение в группе не превышало 15%. Различие между группами считали достоверным при Р ≤ 0.05.