10. Тестирование биологической активности ксенобиотиков

Мониторинг - процесс наблюдения и регистрации данных о каком-либо объекте на неразрывно примыкающих друг к другу интервалах времени, в течение которых значения данных существенно не изменяются.

Под биотестированием обычно понимают процедуру установления токсичности среды с помощью тест-объектов, сигнализирующих об опасности независимо от того, какие вещества и в каком сочетании вызывают изменения жизненно важных функций у тест-объектов. Благодаря простоте, оперативности и доступности биотестирование получило широкую признание во всем мире и его все чаще используют наряду с методами аналитической химии.

Тест-объект - организм, используемый при оценке токсичности химических веществ, природных и сточных вод, почв, донных отложений, кормов и др. Это - "датчики" сигнальной информации о токсичности среды и заменители сложных химических анализов, позволяющие оперативно констатировать факт токсичности (ядовитости, вредности) водной среды ("да" или "нет"), независимо от того, обусловлена ли она наличием одного точно определяемого аналитически вещества или целого комплекса аналитически не определяемых веществ, какой обычно представляют собой сточные воды. Тест-объекты с известной степенью приближения дают количественную оценку уровня токсичности загрязнения водной среды - сточных, сбросных, циркуляционных и природных вод

Для биотестирования используются различные гидробионты - водоросли, микроорганизмы, беспозвоночные, рыбы. В перечень пресноводных организмов, используемых для определения токсичности воды или донных отложений, входят различные водоросли, дафнии, личинки хирономид, амфиподы и рыбы (например, радужная форель). При определении токсичности морских вод обычно используют амфипод, мизид, а также личинок двустворчатых моллюсков и иглокожих. Для исследования проб почвы, воды и донных отложений часто применяют также люминесцирующие бактерии.

При выборе того и или иного тест-объекта важно понимать, что он не обязательно должен обитать в том биотопе или экосистеме, которые подвергаются изучению. Важное условие правильного проведения биотестирования - использование генетически однородных лабораторных культур, так как они проходят поверки чувствительности, содержатся в специальных, оговоренных стандартами лабораторных условиях, обеспечивающих необходимую сходимость и воспроизводимость результатов исследований, а также максимальную чувствительность в токсическим веществам.

Биологическая активность	Тест-объект	Функциональное назначение (тест-реакция)
Генерал из ирован-ная реакция кле­ток	Водоросли, бактерии, дрожжи	Определение концентрации, при которой наблюдаются измене­ния формы, размеров клеток, отделы структур и т. д.
Проницаемость	Кожа лягушки, стенка желудка и стенка тонко­го кишечника крысы, водоросли, эритроциты	Определение скорости про­никновения ксенобиотика, оценка изменений
Острая токсичность	Бактерии, дрожжи, во­доросли, эритроциты, лимфоциты	Установление зависимости эффект-концентрация (доза) -время (LD50, LC50 )
Токсичность для элементов генети­ческой системы	Бактерии, дрожжи, водо­росли, клетки высших растений, дрозофила	Определение тропности к ДНК, способность вызывать мутации
Токсичность для иммунной систе­мы и клеток крови	Эритроциты, лимфоци­ты, альбумиты, сыворот­ка крови	Установление концентрацион-но-временных эффектов, реак­ция антиген-антитело, бласт-трансформация лимфоцитов
Токсичность для половых клеток	Сперматозоиды, яйце­клетки	Влияние на подвижность, деление
Нейротоксичность	Моллюски, синаптосомы мозга крысы, нервное волокно	Выявление изменения элек­трофизиологических показа­телей (мембранный потенци­ал проводимости, потенциал действия)
Тканевая троп-ность	Дольки печени, полоски сердечной мышцы, эпителиальная ткань	Установление сравнительной чувствительности различных тканей к повреждающему действию ксенобиотика
Сенсибилизи­рующая способ­ность	Тетрахимена, бактерии, эритроциты	Определение изменения чув­ствительности тест-объектов к нагреванию, световому излу­чению и т. д.