Прижизненная диагностика бешенства у человека:

1). Выявление АГ:

Высокочувствительно в первые дни заболе­вания. АГ обнаруживают с помощью РИФ в отпечатках роговицы или биоптатах кожи больных.

2) Выделение вируса бешенства в культуре клеток из слюны и ликвора.

3. Обнаружение вирусной РНК в слюне – ПЦР.

4. Определение вируснейтрализующих антител возможно после 7-10 дня болезни:

Нейтрализация вируса сывороткой с учетом по нейтрализации инфекционной активности на мышах;

Также может применяться ИФА. Последний метод, кроме ВНАТ, определяет AT других типов.

Постмортальная диагностика бешенства:

1. Выявление АГ:

Быстрым и чувствительным является РИФ. В основе лежат исследования отпечатков мазков и замороженных срезов тканей, обработанных ме­ченными ФИТЦ антителами антирабической сыворотки. Исследуется ма­териал из гиппокампа (аммонов рог) и ствола мозга;

Разработан ИФА. В его основе – выявление АГ нуклеокапсида вируса бешенства в ткани головного мозга.

1. Обнаружение вирусной РНК – ПЦР.

2. Выделение вируса:

Применяется внутримозговое заражение мышей-сосунков. Через 4 и более дней можно определять АГ вируса в головном мозге с помощью РИФ;

Вирус можно выделить на клетках мышиной нейробластомы (Nа-С-1300). Время для постановки диагноза – 2 дня.

ПОЛИОМИЕЛИТ

1. Краткая характеристика инфекции. История вопроса.

Полиомиелит (polios– серый,myelos– спинной мозг; синонимы: детский спинномозговой паралич, спинальный детский паралич, болезнь Гейна-Медина) – острое вирусное заболевание, характеризующееся поражением нервной системы (преимущественно серого вещества спинного мозга), а также воспалительными изменениями слизистой оболочки кишечника и носоглотки.

Болезнь известна давно, но систематическое описание ее приведено Гейном в 1840 году. Вирус был выделен в 1909 году К. Ландштейнером и Е. Поппером при заражении обезьян материалом из спинного мозга умершего от полиомиелита ребенка.

2. Характеристика вируса полиомиелита.

2.1. Классификация.

Возбудитель (poliovirus hominis) относится к семейству пикорнавирусов роду энтеровирусов, куда входят также Коксаки и ЕСНО-вирусы. Различают три серотипа вируса:I– штамм Брунгильда,II– Лансинга иIII– штамм Леон. Наиболее часто встречаетсяIтип.

2.2. Морфология и химический состав.

Размеры вируса – 8-12 нм, содержит однонитевую «плюс» РНК. Внешняя оболочка отсутствует. Тип симметрии нуклеокапсида кубический. Капсида – икосаэдрический.

2.3. Антигенные свойства.

Все три серотипа имеют общий комплементсвязывающий антиген.

2.4. Культивирование.

Культивируется на клеточ­ных культурах (HeLa, фибробласты человека), обладает цитопатогенным действием.

2.5. Резистентность.

Устойчив во внешней среде (в воде сохраняется до 100 сут, в испражнениях – до 6 мес), хорошо переносит замораживание, высушивание. Не разрушается пищеварительными соками и антибиотиками. Погибает при кипячении, под воздействием ультрафиолетового облучения и дезинфицирующих средств.

3. Эпидемиология.

Единственным источником инфекции являются люди, особенно больные легкими и стертыми формами заболевания. Заболевают преимущественно дети до 10 лет (60-80% заболеваний приходится на детей в возрасте до 4 лет). Заболевание чаще наблюдается в летне-осенние месяцы (максимум в августе-октябре). Характерен фекально-оральный механизм передачи, возможна также передача инфекции воздушно-капельным путем.

4. Патогенез.

Входными воротами инфекции является слизистая оболоч­ка носоглотки или кишечника. Во время инкубационного периода вирус размножается в лимфоидных образованиях глотки и кишечника, затем проникает в кровь и достигает нервных клеток. Наиболее выраженные морфологические изменения обнаруживаются в нервных клетках передних рогов спинного мозга. Нервные клетки подвергаются дистрофически-некротическим изменениям, распадаются и гибнут. С меньшим постоянством подобным же, но менее выраженным изменениям подвергаются клетки мозгового ствола, подкорковых ядер мозжечка и еще в меньшей степени – клетки двигательных областей коры головного мозга и задних рогов спинного мозга. Часто отмечается гиперемия и клеточная инфильтрация мягкой мозговой оболочки. Гибель 1/4-1/3 нервных клеток в утолщениях спинного мозга ведет к развитию пареза. Полные параличи возникают при гибели не менее 1/4 клеточного состава.

После окончания острых явлений погибшие клетки замещаются глиозной тканью с исходом в рубцевание. Размеры спинного мозга (особенно передних рогов) уменьшаются: при одностороннем поражении отмечается асимметрия. В мышцах, иннервация которых пострадала, развивается атрофия. Изменения внутренних органов незначительные – в первую неделю отмечается картина интерстициального миокардита

5. Клиника.

Инкубационный период продолжается в среднем 5-12 дней (возможны колебания от 2 до 35 дней). Различают непаралитическую и паралитическую формы полиомиелита.

Непаралитическая форма протекает чаще в виде так называемой «малой болезни» (абортивная или висцеральная форма), которая проявляется кратковременной лихорадкой, катаральными (кашель, насморк, боли в горле) и диспепсическими явлениями (тошнота, рвота, жидкий стул). Все клинические проявления исчезают обычно в течение нескольких дней. Другим вариантом непаралитической формы является легко протекающий серозный менингит.

В зависимости от преимущественной локализации поражений нервной системы паралитический полиомиелит делят на несколько форм.

Наиболее тяжелыми поражениями являются паралич дыхательных мышц и диафрагмы, повреждение продолговатого мозга, которые приво­дят к тяжелым расстройствам дыхания и кровообращения. Чаще больные погибают от нарушения дыхания. У оставшихся в живых паралитическая стадия продолжается от нескольких дней до 1-2 нед.

6. Иммунитет.

До 5-9 мес дети устойчивы к вирусу – у них циркулируют полученные трансплацентарно от матери антитела, а также они получают SIgA против вируса от матери с молоком. С возрастом нарастает естественная резистентность к полиомиелиту, что приводит к редкой заболеваемости у взрослых людей. К 10 годам происходит «проэпидемичивание» детей. Иммунитет пожизненный.