Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Выделение и идентификация.doc
Скачиваний:
63
Добавлен:
29.03.2015
Размер:
179.2 Кб
Скачать

РН индикаторы для культуральных сред

Название

Диапазон рН и окраска

Используемая концентрация в среде

Кол-во 0,01 н. NaOH для

растворения 0,1 г

Тимоловый

голубой

8,0 (Ж) – 9,6 (С)

0,04 %

10,0

Феноловый

красный

6,9 (Ж)-8,4(К)

0,010-0,030 г/л

28,2

Бромтимоловый синий

6,0(Ж)-7,6(С)

0,010-0,032 г/л

16,0

Бромкрезоловый пурпурный

5,4(Ж)-7,0(С)

0,010-0,032 г/л

18,5

Метиловый

красный

4,4 (Ж) – 6,0 (К)

0,04 %

10

Бромкрезоловый зеленый

3,8(Ж)-5,4(С)

0,020 г/л

14,3

Бромфеноловый синий

3,0 (Ж) – 4,6 (С)

0,04 %

10

П р и м е ч а н и е: Ж – желтая, С – синяя, П – пурпурная, К – красная.

Приготовление буферных растворов

При выборе соответствующих буферных сред для культивирования бактерий исходят из: 1) подходящего значения рН буфера, 2) возможного ингибирующего или токсического действия буфера, 3) возможной утилизацией компонентов буфера бактериальной культурой, 4) возможного связывания буфером катионов двух- и трехвалентных металлов. Для бактериальных ростовых сред наиболее широко используются фосфатный, трис-солянокислый, цитратный и ацетатный буферы. Эти буферные смеси охватывают практически весь интервал значений рН, в котором могут расти бактерии.

Схема приготовления данных буферных растворов приведена в таблице 2.

ЛИТЕРАТУРА

Основная

Методы общей бактериологии: В 3 т. / Под ред. Герхардта Ф. и др. М.: Мир, 1984.

Определитель бактерий Берджи: В 2 т. / Под ред. Хоулта Дж. И др. М.: Мир, 1997.

Дополнительная

Руководство к практическим занятиям по микробиологии: Практ. Пособие / Под ред. Егорова Н.С. – Изд-во Московского ун-та, 1983. – 215 с.

Скворцова И.Н. Методы идентификации и выделения почвенных бактерий Рseudomonas. М.: Изд-во МГУ, 1981. – 78 с.

Стейниер Р., Эдельберг Э., Ингрэм Дж. Мир микробов: В 3 т. М.: Мир, 1979.

Мейнелл Дж., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология. М.: Мир, 1967. – 347 с.

Таблица 2

Приготовление буферов, часто используемых в бактериологических целях

рН

Величина х, используемая в прописях буферов

ацетатного1

цитрат-фосфатного2

Фосфатного3

трис-HCl4

4,0

4,2

4,4

4,6

4,8

5,0

5,2

5,4

5,6

5,8

6,0

6,2

6,4

6,6

6,8

7,0

7,2

7,4

7,6

7,8

8,0

8,2

8,4

8,6

8,8

9,0

41,0

36,8

30,5

25,5

20,0

14,8

10,5

8,8

4,8

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

30,7

29,4

27,8

26,7

25,2

24,3

23,3

22,2

21,0

19,7

17,9

16,9

15,4

13,6

9,1

6,5

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

46,0

43,85

40,75

36,75

31,25

25,5

19,5

14,0

9,5

6,5

4,25

2,65

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

44,2

41,4

38,4

32,5

26,8

21,9

16,5

12,2

8,1

5,1

Примечание: 1 – х мл 0,2 М уксусной кислоты + (50 – х) мл 0,2 М ацетата натрия, довести водой до 100 мл; 2 - х мл 0,1 М лимонной кислоты + (50 – х) мл 0,2 М Na2HPO4, довести водой до 100 мл; 3 - х мл0,2 М NaH2РO4 + (50 – х) мл 0,2 М Na2HPO4, довести водой до 100 мл; 4 – 50 мл 0,2 М триса + х мл 0,2 М HCl, довести водой до 100 мл.