6 курс / Эндокринология / Клеточно_метаболические_механизмы_дизрегуляционных_нарушений_в_системе

лимфоцитов в периферической крови и концентрацией АТ-ТПО выявляется по-

ложительная взаимосвязь. И хотя снижение уровней относительного синтеза иммуноглобулинов и отрицательные взаимосвязи их с концентрацией тиреоид-

ных гормонов и АТ-ТПО в целом отражают сниженную активность В-

лимфоцитов, указанная взаимосвязь характеризует патогенетическое значение клеток данной популяции в иммунопатогенезе ДТЗ.

Исследование метаболизма лимфоцитов обнаружило перераспределение субстратных потоков. Возросшая активность Г6ФДГ и ГР отражает повышение уровня процессов перекисного окисления и активацию синтеза пентозофосфа-

тов (рибозофосфата и дезоксирибозофосфата) – субстратов для образования нуклеиновых кислот в лимфоцитах больных ДТЗ. Не изменяется значительно интенсивность протекания реакций гликолиза и последующего аэробного окис-

ления в митохондриях лимфоцитов женщин с ДТЗ. Снижение активности вспомогательного фермента ЦТК – НАДФИЦДГ, вероятно, является компенса-

торным, не оказывая значимого влияния на интенсивность этого процесса в це-

лом. При этом увеличение активности основного малат-аспартатного шунта и вспомогательного пути транспорта НАД+/НАДН (глицерофосфатный шунт) ха-

рактеризует повышение интенсивности энергетических процессов в лимфоцитах пациентов с ДТЗ, по-видимому, за счет Комплекса I дыхательной цепи (НАДН-

КоQ-редуктаза). Обнаруженное повышение уровней активности регуляторного фермента – глутаматдегидрогеназы – отражает активацию аминокислотного и,

следовательно, белкового обмена. Таким образом, преобразование метаболизма лимфоцитов женщин с ДТЗ определяется усилением макромолекулярного син-

теза, интенсификацией аминокислотного обмена при увеличении уровня аэроб-

ного окисления, показатель которого – усиление перекисных процессов. Корре-

ляционный анализ показал «потерю» корреляционных связей между концен-

трацией тиреоидных гормонов и ферментативными показателями лимфоцитов,

что подтверждает значительное нарушение эндокринной регуляции метаболиз-

ма иммуноцитов у пациентов с ДТЗ.

60

Нами изучено состояния иммунной системы в условиях достижения эутиреоза при протекании аутоиммунного процесса у женщин с ДТЗ. Состоя-

ние иммунного статуса у этих больных через 1 мес. лечения тиреостатиками характеризуется сохранением повышенного содержания общих лимфоцитов и

HLA-DR+-клеток, количество цитотоксических Т-лимфоцитов снижается до диапазона нормы, а уровень Т-хелперов увеличивается. Состояние гуморально-

го иммунитета на этот период характеризуется увеличенной концентрацией Ig G и ЦИК. Через 3 мес. лечения тиреостатиками у больных выявляется увеличе-

ние содержания Т-лимфоцитов в периферической крови (за счет фракции цито-

токсических Т-лимфоцитов), а также сохраняется увеличенный уровень В- и HLA-DR+-клеток. Изменения в гуморальном звене иммунитета определяются увеличением концентрации Ig G и снижением уровней относительного синтеза

Ig A и Ig M. При этом корреляционный анализ показал, что после начала тирео-

статической терапии больных ДТЗ «теряются» корреляционные связи между исследуемыми параметрами эндокринной и иммунной систем, а через 3 мес.

связь гораздо слабее, чем до начала лечения.

Изучение метаболизма лимфоцитов крови женщин с ДТЗ выявило, что изменения уровней активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в динамике лечения носят различный характер. Так уровни активности одних ферментов

(Г6ФДГ, НАДНМДГ, ГР, глутаматдегидрогеназа) последовательно однона-

правлено изменяются в динамике лечения. Изменения уровней активности дру-

гих ферментов (Г3ФДГ, НАДФИЦДГ) носят единичный характер, присущий определенному моменту обследования. Динамическое исследование метабо-

лизма лимфоцитов выявило рост изначально повышенной активности Г6ФДГ,

что показывает нарастающую активацию процессов макромолекулярного син-

теза. При этом повышение активности ГР на протяжении всего периода наблю-

дения отражает высокую антиоксидантную и пролиферативную способность клеток.

Энергетические реакции лимфоцитов определяются интенсивностью как анаэробных, так и аэробных процессов [Буланова Е.Г., 1994; Робинсон М.В.,

61

1986; Bortell R., 2001; Kain K.H., 2000; Qiu Y., 2000]. Подавление терминальных реакций гликолиза (анаэробного процесса) лимфоцитов у женщин с ДТЗ через 3

мес. после начала лечения характеризуется повышением активности аэробной ЛДГ. В то же время у этих пациенток относительно группы с ДТЗ до лечения – в

лимфоцитах снижена активность анаэробной реакции ЛДГ при повышении аэробной, что, однако, никак не отражается на активности ключевых и вспомога-

тельного ферментов цикла Кребса в лимфоцитах крови больных ДТЗ в динамике лечения. На протяжении периода всего исследования остается активированным малат-аспартатный шунт (основной механизм, связующий анаэробное и аэроб-

ное окисление), что, по-видимому, характеризует интенсификацию окислитель-

но-восстановительных процессов в цитоплазме. В лимфоцитах женщин с ДТЗ активация глутаматдегидрогеназы, соединяющей реакции аминокислотного об-

мена и цикла Кребса, остается повышенной в течение 3-х мес. и только при по-

следнем исследовании выявлено незначительное превалирование оттока -

кетоглутората из цикла трикарбоновых кислот на реакции синтеза аминокислот и белков. Нормализация гормонального фона при терапии больных ДТЗ не при-

водит к восстановлению гормональной регуляции метаболизма лимфоцитов,

что указывает на продолжающееся нарушение иммунноэндокринных взаимо-

связей при аутоиммунном процессе.

Таким образом, у женщин больных ДТЗ с подтвержденным синдромом тиреотоксикоза со стороны показателей иммунного статуса обнаружено повы-

шение содержания В-лимфоцитов и цитотоксических Т-лимфоцитов. Однако сниженные расчетные показатели уровней относительного синтеза иммуногло-

булинов указывают на сниженную функциональную активность В-лимфоцитов периферической крови. После начала тиреостатической терапии в течение 3

мес. наблюдается изменение величин показателей иммунного статуса, характе-

ризующих как клеточное, так и гуморальное звенья иммунитета. Тем не менее,

по достижению эутиреоидного состояния у больных ДТЗ не происходит вос-

становления показателей иммунограммы до величин диапазона контрольной группы здоровых женщин. В динамике лечения женщин с ДТЗ метаболизм

62

лимфоцитов претерпевает значительные изменения, отражающие как нормали-

зацию тиреоидного гормонального фона, так и продолжающееся аутоиммунное воспаление в щитовидной железе. Исходя из этой предпосылки, можно предпо-

лагать, что динамические изменения показателей активности ферментов лимфо-

цитов, стремящиеся к нормальным величинам, отражают достижение эутиреоза в результате терапии. Те же оксидоредуктазы, уровни активности которых изме-

няются независимо от динамики гормональных показателей, по-видимому, от-

ражают протекающий аутоиммунный процесс, так как в ходе нашего исследова-

ния мы не получили достоверных данных о его затухании. На протяжении всего периода остается повышенным уровень макромолекулярного синтеза и антиок-

сидантной способности клеток, поддерживается высокая эффективность малат-

аспартатной челночной системы, а также повышенный уровень аминокислотного обмена. В динамике обследования выявлена активация энергетических процес-

сов. Однако, если уровень активности аэробной реакции ЛДГ увеличивается по-

сле начала лечения, то активность анаэробной реакции, наоборот, снижается, от-

носительно первоначальных показателей. Следовательно, в лимфоцитах крови больных ДТЗ достаточно активны как синтетические реакции (анаболические процессы), так и окислительные (катаболические), что закономерно в условиях повышенной тиреоидной регуляции. Тем не менее, нельзя не отметить наруше-

ния гормональной регуляции метаболических процессов, повышения автоном-

ности системы обмена веществ. Активация метаболизма лимфоцитов крови в условиях нарушенной иммунно-эндокринной регуляции и повышенной авто-

номности, очевидно, ведет к истощению адаптационных резервов клеток. Учи-

тывая, что «лимфоцит – ферментативное зеркало организма» [Нарциссов Р.П., 1969], можно предположить, что и клетки других систем и органов испытывают напряжение функционирования и истощение резервных возможностей, что и повышает вероятность развития патологических изменений различных органов и тканей.

63

Горбань А.Н., Дунин-Барковский В.Л., Кирдин А.Н. и др. Нейроинформати-

ка.–Новосибирск: Наука, 1998.–296 с.

Горбань А.Н., Россиев Д.А., Коченов Д.А. Применение самообучающихся нейросетевых программ. Раздел 1. Введение в нейропрограммы.–Красноярск:

СТИ, 1994.–24 с.

Грязева Н.И., Робинсон М.В., Барыкина Н.Н. и др. Различия в составе клеточных элементов крови и активности лимфоцитарных дегидрогеназ у крыс с генетическими различиями нейроэндокринного статуса//Бюлл. эксперим. биол. и медицины.–1998.–Т.125, № 5.–С.555–557.

Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Фадеев В.В. Эндокринология: Учебник.–М.:

Медицина, 2000.–С.172–189.

Захарова Л.Б., Манчук В.Т., Нагирная Л.А. Метаболизм иммунокомпетентных клеток жителей Севера в онтогенезе.–Новосибирск, 1999.–144с.

Земсков А.М., Земсков В.М. Дополнительные методы оценки иммунного статуса//Клин. лаб. диагн.–1994.–№ 3.–С.34–35.

Иванищев В.В., Курганов Б.И. Ферменты метаболизма малата: характеристика, регуляция активности и биологическая роль//Биохимия.–1992.–Т.57, Вып.5.– С.653–662.

Игнатьева Г.А. Иммунная система и патология (лекция)//Патол. физиол. и экспер. терапия.–1997.–№4.–С.26–37;–1998.–№1.–С.35–42.

Кадричева С.Г., Савченко А.А., Догадин С.А. Активность неспецифической эстеразы и -глицерофосфатдегидрогеназы в лимфоцитах крови у больных аутоиммунным тиреоидитом// Пробл. эндокринол.–2003.–Т.49, №3.–С.14–18.

Кандрор В.И. Механизмы развития болезни Грейвса и действия тиреоидных гормонов// Клин. и экспер. тиреоидол.–2008.–Т.4, №1.–С.26–34.

Кандрор В.И. Молекулярно-генетические аспекты тиреоидной патологии//Пробл. эндокринол.–2001.–Т.47, №5.–С.3–10.

65

Кандрор В.И. Современные проблемы тиреодологии//Пробл. эндокринол.–

1999.–№2.–С.3–7.

Кандрор В.И. Эутиреоидный зоб: аутоиммунный компонент патогенеза//Пробл. эндокринол.–1988.–№1.–С.34–40.

Кандрор В.И., Крюкова И.В., Крайнова С.И. и др. Антитиреоидные антитела и аутоиммунные заболевания щитовидной железы//Пробл. эндокринол.–1997.–

Т.43, №3.–С.25–30.

Кеттайл В.М., Арки Р.А. Патофизиология эндокринной системы.–2007.–336с.

Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия.–М.:Высшая школа, 1998.–

479с.

Коган Э.М., Жукоцкий А.В., Говорун В.М. и др. Использование компьютерной морфоденситометрии в современной молекулярно-диагностической практике//Вопр. мед. химии.–1988.–Т.44, №6.–С.527–536.

Колода Д.Е., Фадеев В.В. Антитела к рецептору тиреотропного гормона в диагностике и лечении болезни Грейвса-Базедова//Пробл. эндокринол.–2005.–№2.– С.8–14.

Кузнецов С.Л., Смирнов И.Е., Чиликин А.Г. и др. Телемедицинский комплекс «Диаморф-Cito» в консультативно-диагностической сети Федеральной программы «Дети Севера»//Клин. лаб. диагн.–2000.–№3.–С.43–46.

Кузьменок О.И., Романовский А.А., Данилова Л.И. и др. Нарушения Т-

клеточного звена иммунитета у больных аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы//Иммунология.–2000.–№2.–С.44–48.

Нарциссов Р.П. Анализ изображения клетки – следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии//Педиатрия.–1998.–№4.–С.101–105

Нарциссов Р.П. Применение n-тетразолия фиолетового для количественной цитохимии дегидрогеназ лимфоцитов человека//Арх.анатомии, гистол. и эм- бриол.–1969.–№5.–С.82–91.

66

Петров Р.В., Михайлова А.А., Захарова Л.А. Иммунная система: гормоны и медиаторы//Пробл. эндокринол.–1985.–№5.–С.13–20.

Петунина Н.А., Герасимов Г.А. Аутоиммунный тиреоидит: современные представления об этиологии, патогенезе и лечении (лекция)//Пробл. эндокри- нол.–1997.–№4.–С.30–35.

Робинсон М.В., Торопова Л.Б., Труфакин В.А. Морфология и метаболизм лимфоцитов.-Новосибирск: Наука, 1986.–125с.

Робинсон М.В., Труфакин В.А. Апоптоз и цитокины// Усп. совр. биол.–1999.–

№4.–C.90–95.

Робинсон М.В., Труфакин В.А. Морфолог в иммунологическом мире// Бюлл. СО РАМН.–Новосибирск, 1998.–№2.–С.20–24.

Савченко А.А. Нарушение метаболического статуса лимфоцитов и иммуноэндокринного взаимодействия в патогенезе вторичных иммунодефицитов и гиперактивного состояния иммунной системы: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук.– Томск, 1996.-–34с.

Савченко А.А., Кадричева С.Г., Догадин С.А. и др. Информативность показателей активности ферментов лимфоцитов у больных аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы// Пробл. эндокринол.–2003.–Т.49, №3.–С.18–22.

Савченко А.А., Кадричева С.Г., Догадин С.А. и др. Особенности фенотипического состава и метаболизма лимфоцитов крови у женщин с аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы//Клин. тиреоидол.–2005.–№ 4.–С.32–36.

Савченко А.А., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолюминесцентным методом//Лаб.дело.–1989.–№11.–С.23–25.

Северин С.Е., Катунов В.Ю., Муйжнек Е.Л. и др. Проблемы избирательной регуляции клеточной активности – от фундаментальных основ к практическим результатам//Вопр. биол., мед. и фармакол. химии.–1998.–№1.–С.6–15.

67

Славинский А.А., Никитина Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: нафтол–AS-D-хлорацетат-эстераза//Клин. лаб. ди-

агн.-2000.–№5.–С.34–37.

Смирнова Г.Е., Прокофьев С.А., Зверева Я.С. и др. Клиническое значение и прогностическая роль антител к рецептору ТТГ у детей с болезнью Грейвса

//Клин. и экспер. тиреодол.–2006.–Т.2, №3.–С.44–50.

Труфакин В.А., Шурлыгина А.В., Дергачева Т.И. и др. Циркадные вариации метаболической реакции лимфоцитов крови людей на гормональные стимулы в норме и при развитии иммунодефицита//Бюл. эксперим. биол. и мед.–1995.–

Т.119, №2.–С.181–183.

Фадеев В.В. Болезнь Грейвса//Рус. мед. жур.–2002.–Т.10, №27.–С.1262–1265.

Хватова Е.М. Индукция окислительных ферментов как механизм метаболической адаптации к гипоксии//Дегидрогеназы в норме и патологии. Горький,

1980.–С.37–43.

Шищенко В.М., Петричук С.В., Духова З.Н. и др. Новые возможности цитохимического анализа в оценке состояния здоровья ребенка и прогнозе его раз- вития//Педиатрия.–1998.–№4.–С.96–101.

Эндокринология: национальное руководство /под ред. И.И.Дедова, Г.А.Мельниченко.–М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.–С.497–504.

Afeltra A., Paggi A., De Rosa F.G. et.al. Antineutrophil cytoplasmic antibodies in autoimmune thyroid disorders//Endocr. Res.–1998.–Vol.24, №2.–P.185–194.

Alnaqdy A., Al-Maskari M. Determination of the levels of anti-thyroid-stimulating hormone receptor antibody with thyroid peroxidase antibody in Omani patients with Graves'//Med. Princ. Pract.–2005.–Vol.14, №4.–P.209–212.

Ansari M.A., Roberts K.N., Scheff S.W. Oxidative stress and modification of synaptic proteins in hippocampus aсТer traumatic brain injury// Free Radic. Biol. Med.–

2008.–Vol.45, №4.–Р.443–452.

68

Armengol M.P., Manel J., Lucas-Martin A. et al. Thyroid autoimmune disease: demonstration of thyroid antigen-specific b cells and recombination-activating gene expression in chemokine-containing active intrathyroidal germinal centers//Am. J. Pathol.–2001.–Vol.159.–P.861–873.

Aust G., Kamprad M., Lamesch P. et al. CXCR6 within T-helper (Th) and T- cytotoxic (Tc) type 1 lymphocytes in Graves' disease (GD)//Eur. J. Endocrinol.– 2005.–Vol.152, №4.–P.635–643.

Bisset L.R., Lung T.L., Kaelin M. Reference values for peripheral blood lymphocyte phenotypes applicable to the healthy adult population in Switzerland//Eur. J. Haematol.–2004.–Vol.72, №3.–P.203–212.

Board M., Humm S., Newsholme E.A. Maximum activities of key enzymes of glycolysis, glutaminolysis, pentose phosphate pathway and tricarboxylic acid cycle in normal, neoplastic and suppressed cells//Biochem.J.–1990.–Vol.265, №2.–P.503– 509.

Bortell R., Moss J., McKenna R.C. et al. Nicotinamide adenine dinucleotide (nad) and its metabolites inhibit t lymphocyte proliferation: role of cell surface nad glycohydrolase and pyrophosphatase activities//J. Immunol.–2001.–Vol.167, №4.–

P.2049–2059.

Boyum A. Isolation of lymphocytes from blood and bone marrow// Scand.J.Clin.Lab.Invest.–1968.–Vol.21 (Suppl.97).–P.77–80.

Brent G.A., Moore D.D., Larsen P.R. Thyroid hormone regulation of gene expres- sion//Annu.Rev.Physiol.–1991.–Vol.53.–P.17–37.

Brunn J., Blocjk U., Ruf J. et al. Volumetrie der schildrusenlappen mittels real- time-sonographie//Deutsche Medizinische Wochenschrift.–1981.–Vol.106.–P.1338–

1340.

Chang C.H., Yamada M., Blanchard M.E. et al. Peripheral blood lymphocyte transformation to G2s in patients with autoimmune thyroid disease with and without ophthalmopathy//Autoimmunity.–2002.–Vol.35, №5.–P.313–317.

69