6 курс / Эндокринология / Клеточно_метаболические_механизмы_дизрегуляционных_нарушений_в_системе

Патогенез и клинические проявления ДТЗ во многом определяются кон-

центрацией АТ-ТПО, что также характеризует интенсивность аутоиммунных реакций [Rapoport B., 1998; Колода Д.Е., 2005; Alnaqdy A, 2005]. Вышеотме-

ченная количественная зависимость корреляционных связей в контрольной группе и у больных ДТЗ проявляется также и во взаимосвязях показателей им-

мунного статуса с уровнем содержания АТ-ТПО в сыворотке крови. Так, у

женщин контрольной группы сывороточная концентрация АТ-ТПО положи-

тельно взаимосвязана только с уровнем содержания Ig A (P<0,05). У больных ДТЗ концентрация АТ-ТПО положительно взаимосвязана с величиной относи-

тельного и абсолютного содержания CD19+-лимфоцитов (P<0,05 в обоих случа-

ях) и HLA-DR+-клеток (P<0,05 и P<0,01, соответственно). В группе с ДТЗ сыво-

роточная концентрация АТ-ТПО отрицательно коррелирует с величиной лейко-

В-клеточного соотношения (P<0,05) и уровнем относительного синтеза Ig M (P<0,05). Примечательно, что между уровнем содержания В-лимфоцитов в пе-

риферической крови и концентрацией АТ-ТПО выявляется положительная вза-

имосвязь. И хотя снижение уровней относительного синтеза иммуноглобули-

нов и отрицательные взаимосвязи их с концентрацией тиреоидных гормонов и АТ-ТПО отражают сниженную активность В-лимфоцитов, указанная взаимо-

связь характеризует патогенетическое значение клеток данной популяции в иммунопатогенезе ДТЗ.

Корреляционный анализ характеризует линейные взаимосвязи между ис-

следуемыми показателями. Для того, чтобы описать нелинейные взаимосвязи между величинами показателей иммунного статуса и концентрацией АТ-ТПО в сыворотке крови мы использовали метод нейросетевой предикции. Каждому примеру в обучающей выборке для нейросетевого предиктора соответствует заранее известное действительное число (в данном случае – концентрация АТ-

ТПО), в отношении которого и проводится обучение [Горбань А.Н., 1990, 1994,

1998]. Предиктор работает как система, самостоятельно находящая функцию зависимости ответа Y=f (X1+X2+…+Xn) от обучающих параметров выборки

(показателей иммунного статуса) [Kochenov D.A., 1993].

30

Степень обученности нейросети определяется значением функции оценки, ко-

торое в процессе обучения стремится к минимуму. По окончанию обучения программа вычисляет информативность обучающих параметров в нейропре-

дикторной модели.

Установлено, что в модели нейросетевого предиктора концентрации АТ-

ТПО по показателям иммунного статуса у женщин контрольной группы наибо-

лее значимыми показателями являются уровень содержания лейкоцитов в пе-

риферической крови и относительное количество лимфоцитов (рис. 3.1.2).

Остальные показатели иммунного статуса обладают очень низкой информатив-

ностью. В группе больных ДТЗ нет таких определяющих параметров. Наиболее информативные показатели модели – уровни содержания лейкоцитов в крови,

относительное количество CD3+-лимфоцитов, абсолютное содержание CD16+-

клеток, процентное содержание CD4+-лимфоцитов и уровень относительного синтеза Ig A (представлены 5 максимально информативных показателей по убыванию значимости).

Исходя из полученных результатов, можно сделать следующие выводы. В

контрольной группе с низким содержанием АТ-ТПО в сыворотке крови синтез аутоантител определяется показателями, количественно характеризующими клеточный состав в системе иммунитета. В то же время у больных ДТЗ наибо-

лее значимыми явились показателями, характеризующие популяционный и субпопуляционный состав клеток иммунной системы, а также функциональную активность лимфоцитов: Т-лимфоциты, NK-клетки, Т-лимфоциты-хелперы,

уровень относительного синтеза Ig A. Необходимо отметить, что все наиболее информативные параметры иммунной системы в представленных моделях нейросетевого предиктора не коррелируют с уровнями концентрации АТ-ТПО как в контрольной группе, так и у больных ДТЗ, что подтверждает нелинейный характер взаимосвязи между данными параметрами.

Корреляционный анализ позволил исследовать влияние отдельных пока-

зателей тиреоидного статуса на состояние клеточного и гуморального иммуни-

32

тета у женщин контрольной группы и больных ДТЗ. Однако в условиях целост-

ной регуляторной системы щитовидной железы состояние иммунного статуса определяется всем комплексом гормонов и различных биологически активных веществ. Для изучения комплексного влияния показателей тиреоидного статуса на величину исследуемых параметров иммунной системы в контрольной груп-

пе и в группе больных ДТЗ была применена модель множественной регрессии

(табл. 3.1.2 и 3.1.3). Детерминированными составляющими модели, зависящи-

ми от множества факторов (в данном случае – гормонов щитовидной железы и ТТГ), явились показатели клеточного и гуморального иммунитета. Константа регрессии характеризует комплексное влияние неисследуемых регуляторных факторов (например, кортизола, инсулина, интерлейкинов, лейкотриенов и т.д.)

на показатели иммунной системы.

Установлено, что наибольшей статистической значимостью в моделях множественной регрессии у женщин контрольной группы обладают константы регрессии (табл. 3.1.2). Действительно, в условиях нормального гормонального статуса состояние регулируемой системы, в данном случае – иммунитета, зави-

сит от комплексного воздействия различных гормонов и других биологически активных веществ (медиаторов, цитокинов и т.д.). В связи с этим статистиче-

ская значимость коэффициентов множественной регрессии, определяемых уровнями концентраций тиреоидных гормонов и ТТГ, низкая. Исключениями являются регрессионные модели, определяющие концентрацию Ig M и величи-

ну уровней относительного синтеза Ig M. Известно, что воздействие тиреоид-

ных гормонов вызывает активацию белкового синтеза [Brent G.A. et al., 1991; Hashimoto H. et al., 1994; Rauchova H. et al., 2004]. По-видимому, синтез Ig M,

который первым вступает в иммунные процессы, во многом регулируется именно тиреоидными гормонами (при нормальном гормональном статусе).

Причем регрессионная модель уровней относительного синтеза Ig M поддер-

живается выявленными взаимосвязями данного иммунологического параметра с концентрациями Т3 и сТ4 таким образом по указанной модели определяется наибольшая величина коэффициента множественной корреляции.

33

Таблица 3.1.2

Множественная регрессионная зависимость иммунных показателей от парамет-

ров тиреоидного статуса женщин контрольной группы

Здесь и в табл.3.1.3: B0 – константа регрессии; R – коэффициент множествен-

ной корреляции; P – статистически достоверные коэффициенты регрессии на соответствующем уровне значимости.

34

Таблица 3.1.3

Множественная регрессионная зависимость иммунных показателей от парамет-

ров тиреоидного статуса женщин контрольной группы

35

У большинства представленных параметров иммунного статуса по моде-

ли множественной регрессии выявляется высокий уровень статистической до-

стоверности константы регрессии, как у больных ДТЗ, так и у женщин кон-

трольной группы (табл. 3.1.3). Однако, в регрессионных моделях таких показа-

телей иммунного статуса как относительное количество лимфоцитов в перифе-

рической крови, относительное содержание HLA-DR+-клеток, величина лейко-

Т-клеточного соотношения, концентрация Ig G в сыворотке крови и уровни от-

носительного синтеза Ig M и Ig G, обнаружена статистическая значимость и ко-

эффициентов регрессии, которые определяются концентрацией тиреоидных гормонов и ТТГ. Примечательно, что только у больных ДТЗ выявляется стати-

стическая значимость концентрации ТТГ в регрессионной модели, определяю-

щей относительное содержание лимфоцитов в периферической крови и вели-

чину лейко-Т-клеточного коэффициента. Причем последняя регрессионная за-

висимость подтверждается также и результатами корреляционного анализа.

Регрессионные модели, определяющие уровень относительного синтеза

Ig M, у больных ДТЗ и женщин контрольной группы в качестве статистически значимых имеют один и тот же коэффициент – концентрацию Т3. Поскольку знак данного коэффициента регрессии отрицательный, можно сделать заключе-

ние, что независимо от аутоиммунной патологии Т3 ингибирует уровень синте-

за IgM, что подтверждают результаты корреляционного анализа.

Особенность регрессионных моделей у женщин с ДТЗ состоит в появле-

нии статистически достоверной зависимости между уровнями концентрации тиреоидных гормонов и содержанием IgG. С помощью корреляционного анали-

за зависимость между тиреоидными гормонами и величинами показателей гу-

морального иммунитета не обнаружена. Однако, при анализе комплексного гормонального влияния установлено, что Т3 отрицательно влияет на концен-

трацию Ig G, а сТ4 – положительно. Подобный дуализм в регуляторном влиянии тиреоидных гормонов на параметры иммунной системы характеризует модули-

рующее воздействие и проявляется и у женщин контрольной группы, и у боль-

ных ДТЗ.

36

Скорость и интенсивность иммунологических реакций зависит от исход-

ного состояния метаболизма лимфоцитов. Их метаболическая система обеспе-

чивает корригирующий ответ на возмущение, адаптационные перестройки им-

мунитета, повышение резистентности всего организма. И именно на уровне клеточной физиологии и биохимии возможно выяснение тонких процессов кле-

точной иммунологии.

Таблица 3.1.4

Показатели активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ и ГР в лимфоцитах крови женщин контрольной группы и больных ДТЗ (Ме, С25 – С75)

Исследование состояния метаболизма лимфоцитов выявило значительные их особенности при ДТЗ (табл. 3.1.4). Обнаружено повышение уровней актив-

ности Г6ФДГ, НАД(Ф)ГДГ, НАД(Ф)НГДГ, НАДНМДГ и ГР при снижении уровня активности НАДФИЦДГ в лимфоцитах.

37

Повышение активности Г6ФДГ – инициирующего и лимитирующего фермента пензофосфатного пути окисления углеводов отражает активизацию данного процесса в целом. Вследствие повышается уровень синтеза пентозо-

фосфатов (рибозофосфата и дезоксирибозофосфата), являющихся субстратом для образования нуклеиновых кислот, а также НАДФН. Как известно, Г6ФДГ и ГР тесно взаимосвязаны как пространственно, так и общим кофактором: восста-

новление глутатиона происходит за счет окисления НАДФН, который ревос-

станавливается в глюкозо-6-фосфатдегидрогеназной реакции [Ansari M.A., 2008; Tarrío N., 2008]. Глутатион – трипептид, компонент антиоксидантной си-

стемы клеток. Ряд ферментов – глутатионовых пероксидаз – используют вос-

становленный глутатион в качестве донора электронов для восстановления по-

врежденных свободными радикалами высокомолекулярных элементов клетки

(в частности, липидов плазматических мембран). Окисленный глутатион, в

свою

Таблица 3.1.5

Морфоденситометрические параметры активности СДГ в лимфоцитах крови женщин контрольной группы и больных ДТЗ (Ме, С25 – С75)

38

очередь, восстанавливается ГР, следовательно, увеличение его активности от-

ражает повышение уровня процессов перекисного окисления в лимфоцитах больных ДТЗ.

В лимфоцитах крови женщин с ДТЗ также исследована активность мито-

хондриальных дегидрогеназ (СДГ и ГФДГ).

Морфоденситометрические параметры активности СДГ в лимфоцитах крови у больных ДТЗ представлены в табл. 3.1.5. Не обнаружено изменения по-

казателей, отражающих активность и количество фермента. Найдено лишь из-

менение расположения гранул продукта реакции, что указывает на более близ-

кое их расположение в лимфоцитах больных ДТЗ.

Таблица 3.1.6

Морфоденситометрические параметры активности ГФДГ в лимфоцитах крови женщин контрольной группы и больных ДТЗ (Ме, С25 – С75)

Исследуемые морфоденситометрические параметры активности ГФДГ в лимфоцитах крови у женщин с ДТЗ представлены в табл. 3.1.6. Обнаружено до-

стоверное снижение фактора формы при увеличении оптической плотности и интегрального показателя гранул диформазана, образованного в результате

39