3.6. Обработка результатов двойного перекреста (биологическая активность инсулина методом а и в)

Биологическую активность инсулина определяют по его гипогликемическому действию.

Таблица 14.2.3.18

Схема двойного перекреста

	ГРУППА 1	ГРУППА 2	ГРУППА 3	ГРУППА 4
I ПОСТАНОВКА (день I)	s1	s2	u1	u2
II ПОСТАНОВКА (день II)	u2	u1	s2	s1

В качестве ответа животного (y) принимают:

– для кролика – сумму двух концентраций глюкозы в крови через 1 ч и 2,5 ч после инъекции инсулина;

– для мыши – концентрацию глюкозы в крови через 40 мин после инъекции.

В обоих случаях схема расчетов одинакова.

В данном подразделе приведен пример обработки результатов двойного перекреста на кроликах.

Таблица 14.2.3.19.

Ответы y (суммы двух концентраций глюкозы (мг%) в крови животных через 1 ч и 2,5 ч после инъекции инсулина)

Группа 1			Группа 2			Группа 3			Группа 4
y		Сумма за два дня (B)	y		Сумма за два дня (B)	y		Сумма за два дня (B)	y		Сумма за два дня (B)
s1	u2		s2	u1		u1	s2		u2	s1
112	104	216	65	72	137	105	91	196	118	144	262
126	112	238	116	160	276	83	67	150	119	149	268
62	58	120	73	72	145	125	67	192	42	51	93
86	63	149	47	93	140	56	45	101	64	107	171
52	53	105	88	113	201	92	84	176	93	117	210
110	113	223	63	71	134	101	56	157	73	128	201
116	91	207	50	65	115	66	55	121	39	87	126
101	68	169	55	100	155	91	68	159	31	71	102

Таблица 14.2.3.20

Суммы ответов и контрасты

	Стандартный образец S	Испытуемый препарат U	Сумма
День I
Малая доза	S1I = 765	U1I = 719
Большая доза	S2I = 557	U2I = 579
Сумма	SI = 1322	UI = 1298	DI = 2620
День II
Малая доза	S1II = 854	U1II = 746
Большая доза	S2II = 533	U2II = 662
Сумма	SII = 1387	UII = 1408	DII = 2795
Сумма ответов за два дня	S = 2709	U = 2706
Линейные контрасты
День I	LSI = –208	LUI = –140	LI = –348
День II	LSII = –321	LUII = –84	LII = –405
Сумма	LS = –529	LU = –224

Для того чтобы проверить правильность проведенного опыта и вычислить его дисперсию, проводят дисперсионный анализ полученных данных. При этом рассчитывают значения дисперсий для 11 показателей (см. сводную таблицу 14.2.3.21).

Для этого на основании данных, представленных в таблице 14.2.3.19 и 14.2.3.20, а также поправочного коэффициента, вычисляют суммы квадратов источников дисперсии.

Поправочный коэффициент

Итог =

Таблица 14.2.3.21

Сводная таблица дисперсионного анализа (двойной перекрест)

Источник дисперсии (показатель)	Число степеней свободы (f)	Сумма квадратов	Средний квадрат	Наблюдаемое значение критерия Фишера Fнабл.	Критиче ское значение критерия Фишера Fкритич.
Параллельность	1	1453	1453	1,06	<4,2 (P=95 %)
Дни × препараты	1	32	32	0,02	<4,2 (P=95 %)
Дни × регрессию	1	50	50	0,04	<4,2 (P=95 %)
Отклонение (1)		38260	1366
Блоки	2n – 1 = 31	39795	1284	9,35
Препараты	1	0	0	0	<4,2 (P=95 %)
Регрессия	1	8860	8860 = E	64,5	>7,64 (P=99 %)
Дни	1	478	478	3,48	<4,2 (P=95 %)
Дни × параллельность	1	447	447	3,26	<4,2 (P=95 %)
Отклонение (2) (дисперсия опыта)		3843	137,3 = s2
Итог	N – 1 – m = 63	53423

N = 64 (общее число ответов в опыте);

n = 16 (число ответов в группе);

m = 0 (число утраченных и замененных значений).

Значимость различий дисперсий проверяют с помощью критерия Фишера. Обязательным является выполнение требований для показателей «Регрессия» и «Дни  параллельность». «Регрессия» характеризует дозозависимость, а «Дни  параллельность» – показатель групповой устойчивости, характеризующий согласованность углов наклона линий дозозависимости в первый и второй день. Для «Регрессии» наблюдаемое значение критерия Фишера должно быть больше критического (P = 99 %), а для показателя «Дни  параллельность» – меньше критического (P = 95 %).

Для того чтобы найти F_набл., средние квадраты показателей «Параллельность», «Дни  препараты» и «Дни  регрессию» делят на средний квадрат показателя «Отклонение (1)», а все остальные – на средний квадрат «Отклонения (2)». Полученные результаты сравнивают с табличными критическими значениями критерия Фишера (приложения, таблица III). Число степеней свободы f₁ = 1, а f₂ = 28.

Вычисление биологической активности и ее доверительных границ

Соотношение доз равно 2, следовательно ;

(f = 28 и P = 95 %);

+ lg ;

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого препарата вычисляют по формуле:

.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого препарата составляют 1,5240 и 1,6830.