4. Биологические испытания, основанные на альтернативном ответе

4.1. Оценка и сравнение пороговых доз при их прямом определении

При испытаниях некоторых лекарственных средств результат их дей­ствия учитывается не в количественной, а в альтернативной форме (наличие или отсутствие эффекта – гибели, судорог и т. д., иногда это называют реакцией «все или ничего»). В ряде случаев может быть получена величина эффективной (пороговой) дозы ЕД для каждого отдельного испытуемого препарата: фиксируют ту дозу, при которой получается ожидаемый эффект. Тогда оценкой эффективной дозы для данного испытуемого пре­парата может служить среднее значение по достаточно большой группе животных. При расчетах найденные индивидуаль­ные эффективные дозы ЕД заменяются их логарифмами x=lgЕД, ибо распределение этих логарифмов обычно ближе к нормальному, чем распределение самих доз. После того как вычислены значения

;

,

находят доверительные границы для эффективной дозы:

.

Величина ищется для числа степеней свободы .

Вычисление эквивалентной эффективной дозы и ее доверительных границ производится по формулам:

;

;

; ;

,

а t(P, f) ищется для числа степеней свободы . Доверительные границы для отношения эквивалентных эффективных доз равны:

.

Если рассматриваемый эффект не является необратимым, то лучше использовать одну группу тест-объектов, применяя к каждому из них сначала один испытуемый препарат, а затем после ин­тервала, необходимого для полного восстановления начально­го состояния, другой. Получив для каждого тест-объекта раз­ность логарифмов пороговых доз , вычисляют:

,

,

причем t(P, f) ищется для числа степеней . Такая постановка испытания позволяет уменьшить влияние изменчивости исходных состояний и параметров тест-объектов и при­водит к сужению доверительных интервалов. При этом целе­сообразно разбить группу тест-объектов на две примерно рав­ные подгруппы с тем, чтобы одна из них получала сначала стандартный образец, а затем испытуемый препарат, а другая подгруппа – наоборот. Этим обеспечивается лучшая рандомизация.

4.1.1. Обработка результатов оценки активности испытуемого препарата по сравнению со стандартным образцом на кошках

Из полученных в опыте данных вычисляют величину смертельной дозы испытуемого препарата для каждого животного в миллилитрах на 1 кг массы тела (Y). Находят величину средней смертельной дозы для стандартного образца и испытуемого препарата ( и соответственно), а также их стандартные отклонения и , вычисленные по следующим формулам:

s² = , где f = n – 1;

s = ;

.

Результаты опытов удовлетворяют требованиям метода, если отношение стандартного отклонения среднего результата к средней смертельной дозе не превышает 5,7 %. В противном случае необходимо увеличить число опытов.

Испытуемый препарат считают прошедшим испытание, если отношение средних смертельных доз стандартного образца и испытуемого препарата составляет 90–110 %, а их разность не превышает величины .

Стандартное отклонение разности рассчитывают по формуле:

.

Критическое значение критерия Стьюдента t для числа степеней свободы f = n_S + n_U –2 при P = 95 % вычисляют как в предыдущих разделах или находят в таблице II приложений.

Таблица 14.2.4.1