5 курс / Онкология / ВОЗМОЖНОСТИ_ЖИДКОЙ_БИОПСИИ_В_СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ_ПРОГНОЗА_ТЕЧЕНИЯ

72

В образцах до лечения мы наблюдали положительные корреляции поСпирмену между количеством EpCAM+CK+ и EpCAM-vim+ (r=0,427, p=0,021),

EpCAM+CK+ и vim+ (r=0,436, p=0,018), EpCAM+vim- и EpCAM-vim+ (r=0,384, p=0,040), CD44+ALDHveryhigh и CK+vim- (r=0,377, p=0,048), CK-vim+ и

CD133+ALDHhigh (r=0,505, p=0,027) и EpCAM-vim+ и ALDHhigh (r=0,597, p=0,004) (рис. 10).

Статистически значимых корреляций между числом клеток различного фенотипа в процессе лечения не наблюдалось, за исключением отрицательной корреляции между EpCAM+CK+ и CD44+CD133+ (r=-0,584, p=0,011). В нашей когорте наблюдалась корреляция между количеством лейкоцитов и

CD44+ALDHveryhigh клетками до лечения (r=0,419, p=0,037); количество клеток

CD133+ не было связано с количеством лейкоцитов. Это может косвенно отражать отсутствие экспрессии CD133 лейкоцитами, что делает этот маркер более привлекательным для жидкостной биопсии по сравнению с CD44, который часто присутствует как на опухолевых стволовых клетках, так и на лейкоцитах

[166]. Мы также наблюдали отрицательную корреляцию между количеством клеток CK+vim+ и уровнемCA-125 до лечения (r=-0,417, p=0,034). Однако в нашей когорте уровни СА-125 в сыворотке не были значимо связаны с какими-

либо клиническими характеристиками.

Следует отметить, что в образцах, полученных до лечения, количество клеток CD44+CD133+ALDHhigh находилось в линейной регрессионной зависимости от количества клеток EpCAM+CK+ (R2=0,315, p=0,002). Эта связь не сохранялась в образцах, полученных во время лечения.

В биномиальном регрессионном анализе вероятности возникновения рецидива, чувствительного к платине, по сравнению с нечувствительным рецидивом, наблюдалась тенденция к связи между большим количеством эпителиальных ЦОК EpCAM+CK+ до лечения с более высокой вероятностью платиночувствительности рецидива (ОШ 1,60, 95% ДИ 0,996-2,57) в сочетании с наличием операции (ОШ 40,84, 95% ДИ 2,78-599,1) и возрастом (ОШ 1,22, 95%

ДИ 1,03-1,43).

74

CD133+ALDHveryhigh выше порогового значения (шесть клеток) медиана ВБП составила 6,4 (95% ДИ 0,9-НД) месяцев, а для пациенток с числом клеток ниже порогового значения – 9,7 (95% ДИ 8,6-НД) месяцев. Медиана общей выживаемости в данной когорте еще не достигнута. Результаты уни- и

мультивариантногоанализов для ВБП представлены в таблице 14.

Таблица 14. – Результаты одно- и многофакторного регрессионного анализа выживаемости без прогрессирования

76

чем число CD133+-клеток. Клетки, экспрессирующие оба маркера,

присутствовали в 10 образцах.

Таблица 16. – Число опухолевых клеток, экспрессирующих маркеры стволовости, в асците пациенток с РЯ, на 1 млн выделенных клеток

Популяция Фенотип клеток Количество клеток/млн. выделенных, медиана (Q1-Q3)

Статистически значимых взаимосвязей между числом клеток стволового фенотипа и стадией болезни, уровнем СА-125 сыворотки крови,

чувствительностью к химиотерапии выявлено не было.

Отметим, что между числом CD44+-клеток в асцитической жидкости и числом мезенхимальных клеток EpCAM-виментин+ в крови присутствовала весьма высокая положительная корреляционная связь (r=0,917, p<0,001). Также высокая положительная корреляция наблюдалась между числом CD44+ в асците ибифенотипичныхCK+виментин+ в крови (r=0,861, p<0,001), но не эпителиальных СК+виментин- в крови (r=-0,211, p=0,204). В то же время корреляции между числом CD44+ в асците и крови, CD133+ в асците и крови были умеренными отрицательными (CD44+, r=-0,335, p=0,039; CD133+, r=-0,375, p=0,020). Число клеток CD133+ в асците отрицательно коррелировало с числом

ALDHhigh и CD44+ALDHhighклеток в крови (r=-0.427, p=0,008 и r=-0,582, p<0,001 соответственно).

В процессе исследования определялось содержание VEGF, IL-1β, IL-10,IL- 18, IL-4 в образцах асцита, где подсчитывали численность стволово-подобных клеток. В качестве контроля использовали асцит пациенток с доброкачественными опухолями яичников (таблица 17).

78

Как видно из таблицы, содержаниепровоспалительных цитокинов IL-1β и

IL-4 в асците пациенток с РЯ не отличалось от такового у пациенток с доброкачественными опухолями. В то же время уровниVEGF и IL-10 у пациенток с РЯ были намного выше, чем в группе сравнения. Уровень VEGF в асците при РЯ коррелировал положительно с уровнем IL-18 (r=0,484, p=0,002) и

отрицательно – с уровнем IL-1β (r=-0,643, p<0,001) и IL-4 (r=-0,576, p<0,001).

Уровни IL-1β и IL-4 коррелировали между собой положительно (r=0,497, p=0,001), также положительная корреляция присутствовала между IL-1β и IL-10 (r=0,599, p<0,001).

Также наблюдалось несколько корреляций уровней цитокинов в асците с уровнем СА-125 крови: отрицательная для IL-18 (r=-0,543, p<0,001) и VEGF (r=- 0,525, p<0,001) и положительная для IL-1β (r=0,680, p<0,001) и IL-10 (r=0,741, p<0,001).

Следует констатировать, что наблюдалась сильная отрицательная корреляция между содержанием VEGF в асците и сыворотке пациенток с РЯ (r=- 0,852, p<0,001). При этом уровень VEGF сыворотки крови положительно коррелировал с числом CD45-CD133+ клеток в асците (r=0,783, p=0,036). При анализе методом простой линейной регрессии повышение уровня VEGF

сыворотки было связано с большим числом CD45-CD44-CD133+ клеток в асците

(p=0,030). Также наблюдалась корреляция между содержанием IL-4 в сыворотке крови и IL-1β в асците при РЯ (r=0,726,p=0,012).

Что касается корреляций с числом стволово-подобных клеток, отметим, что была обнаружена отрицательная связь между CD44+ и IL-4 в асците (r=-0,575, p<0,001) и положительная – между CD44+ и IL-10 (r=0,598, p<0,001), а

такжеотрицательные связи между CD133+ и IL-18, IL-1β, IL-10 (r=-0,416, p=0,009; r=-0,488, p=0,002; r=-0,718, p<0,001 соответственно).

Число клеток CD44+CD133+ в асците отрицательно коррелировало с содержанием в асците VEGF(r=-0.473, р=0,003).

Интересно, что корреляции между содержанием цитокинов в асците и числом стволово-подобных клеток в крови имели противоположную