2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Медицинская_бактериология_Соколова_Т_Н_

ны. В настоящее время не регистрируется. Источник инфекции - больной человек. Переносчик - платяная вошь, заражение человека происходит при укусе инфицированной вши (риккетсии содержатся в слюне и в испражнениях).

Риккетсиоз - острая инфекционная болезнь, которая переносится членистоногими, характеризуется циклическим течением, лихорадкой, сыпью, и поражением нервной системы.

Патогенез

Попадая в кровь, риккетсии размножаются в эндотелии сосудов, вызывая их поражение, что проявляется различной розеолезнопетехиальной сыпью, лихорадкой, поражением нервной системы, интоксикацией. Риккетсии могут сохраняться в организме реконвалесцента в течение многих лет.

Микробиологическая диагностика

Основная микробиологическая диагностика – серологические реакции с целью выявления Ig в сыворотке крови: РИФ, РСК, РПГА, ИФА. Проводят также бактериоскопическое исследование: мазки окрашивают по Романовскому-Гимзе, по Здрадовскому и др. Биологический метод: кровь обследуемого больного вводят морским свинкам или белым мышам. У животных появляется лихорадка и развивается периорхит (в случае эндемического сыпного тифа).

Специфическая профилактика: для риккетсиозов большое значение имеет борьба с вшивостью, ранняя диагностика, изоляция и госпитализация больных. Необходима тщательная санитарная обработка больных и дезинсекция одежды больного. Для специфической профилактики использовалась инактивированная формалином вакцина.

ХЛАМИДИИ И ХЛАМИДИОЗЫ

Хламидии относятся к порядку Chlamydiales, семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia. Имеют вид мелких грамотрицательных кокков. Все они облигатные внутриклеточные паразиты, не синтезируют АТФ (энергетические паразиты). Размножаются только в живых клетках хозяина. Хламидии имеют две различающиеся формы, которые обозначаются как элементарные и инициальные (или ретикулярные) тельца. Элементарные тельца являются небольшими частицами размером около 300 нм. Это экстрацеллюлярные (внеклеточные) транспортные формы, высоко инфекционные. Инициальные тельца малоинфекционны и представляют собой внутриклеточные репродуктивные формы. После размножения ретикулярных телец

61

элементарные тельца скапливаются в цитоплазме инфицированной клетки, образуя микроколонии, окруженные мембраной, защищающей их от действия лизоцимов. Микроколонии образуют включения в клетке-хозяине, их используют для диагностики хламидиозов.

Рис. 39. Скопления в цитоплазме инфицированной клетки микроколоний

Патогенез

Chlamydia pneumoniae вызывает пневмохламидиоз - заболевание, относящееся к антропонозам, характеризуется острым началом, лихорадкой и преимущественным поражением органов дыхания. Размножаясь в эндотелии сосудов, хламидии могут повреждать и эндокард.

Chlamydia trachomatis серовары А – С вызывают трахому – поражение конъюнктивы и прилегающих тканей глаза. Трахома распространена в Африке, на Ближнем Востоке и в некоторых регионах Азии. Здесь она остается основной причиной слепоты.

Серовары D – K вызывают поражение мочеполовой системы (урогенитальный хламидиоз). Серовары L1–L3 – венерический лимфогранулематоз. В последние годы заболевания, вызванные Ch.trachomatis, признаны в США самыми распространенными болезнями, передаваемые половым путем.

Chlamydia psittaci вызывают орнитоз - пневмонию с гриппоподобными симптомами. Резервуаром и источником заражения являются домашние и дикие птицы. В настоящее время возбудитель орнитоза выделен более чем от 150 видов птиц. Наибольшее эпидемиологическое значение имеют домашние птицы (особенно утки и индюшки), комнатные птицы (попугаи, волнистые попугайчики, канарейки и другие мелкие певчие птицы) и особенно городские голуби, зараженность которых колеблется в пределах 30-80%. Люди заражаются воз- душно-пылевым и воздушно-капельным путем.

62

Микробиологическая диагностика хламидиозов

Большое значение имеет взятие материала для исследований и сроки доставки в лабораторию. Они должны быть минимальными. Материал берут из уретры, шейки матки, конъюнктивы. Делают мазок на стекле для микроскопии, затем помещают в среду для транспортировки.

Наиболее старым методом является цитологический, при котором при микроскопии выявляют характерные внутриплазматические включения полулунной формы, являющиеся патогномоничным признаком хламидий. Используют окраску по Романовскому-Гимзе и раствором Люголя. Использование при микроскопии метода иммунофлюоресценции повышает чувствительность цитологического метода. Наиболее достоверным подтверждением является выделение культуры хламидий. Культивирование их проводят в желточных мешках куриных эмбрионов или в культуре клеток.

Используют также обнаружение антигена хламидий в материале с помощью реакции иммунофлюоресценции, также используют такие серологические методы, как РЭМА, РСК, РНГА, ИФА, аллергические реакции. Используется ПЦР для обнаружения ДНК хламидий.

МИКОПЛАЗМЫ И МИКОПЛАЗМЕННЫЕ ИНФЕКЦИИ

Микоплазмы относятся к классу Mollicutes (мягкокожие), семейству Mycoplasmataceae. Семейство включает 2 рода Mycoplasma и Ureaplasma, которые имеют значение в патологии человека.

Микоплазмы представляют собой полиморфные микроорганизмы, не имеющие клеточной стенки, окруженные цитоплазматической мембраной, содержащие стеролы. Из-за отсутствия клеточной стенки могут приобретать различные формы: кокковидную, нитевидную, колбовидную. Обнаруживают их при фазовоконтрастной микроскопии.

Выращивают на специальных сложных по составу питательных средах, содержащих стеролы (холестерин и др.) и предшественники нуклеиновых кислот. Микоплазмы образуют небольшие колонии с темным центром и более светлой периферией (форма, напоминает яичницу-глазунью) диаметром до 1-1,5 мм. Размножаются бинарным делением, могут образовывать нитчатые формы.

63

капельном пути передачи воротами инфекции чаще служат слизистые оболочки респираторного тракта, внедрение возбудителя может происходить в слизистые оболочки мочеполовых органов (при половом пути передачи инфекции).

Патогенез

Mycoplasma pneumoniae поражает респираторный тракт. Mycoplasma hominis вызывает полиорганную патологию. Ureaplasma urеalyticum поражает мочеполовую систему.

Микоплазмы: внеклеточные паразиты. К мембране клеткихозяина они прикрепляются посредством белков–адгезинов. Некоторые виды микоплазм продуцируют нейротоксин, относящийся к экзотоксинам. Он нейтрализуется специфической антисывороткой. Экзотоксин оказывает первичное токсическое действие на нервную систему, действует на нервные клетки, поражает капилляры, делает проницаемым гематоэнцефалический барьер. Поражается также сердеч- но-сосудистая система. Иммунитет при микоплазмозе напряженный, что делает перспективной работу по созданию вакцин.

Микробиологическая диагностика

Для диагностики чаще используют серологические реакции: РСК, РИФ, РН – ингибирование роста микоплазм в присутствии специфической сыворотки. Возможно выделение чистой культуры с использованием сложных питательных сред и вирусологических методов культивирования.

ПАТОГЕННЫЕ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА ГРИБЫ И ПРОСТЕЙШИЕ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНВАЗИЙ И МИКОЗОВ Контрольные вопросы

1.Методы лабораторной диагностики микозов: перечислить и охарактеризовать.

2.Общая классификация микозов.

3.Возбудители и лабораторная диагностика эпидермофитии паховой (крупных складок) и эпидермофитии стоп.

4.Возбудители и лабораторная диагностика трихофитии, микроспории, фавуса.

5.Возбудители аспергиллеза. Возбудители и лабораторная диагностика кандидоза, пневмоцистоза.

6.Методы лабораторной диагностики инвазий: перечислить и описать.

65

7.Этиология и лабораторная диагностика малярии, токсоплазмоза, криптоспоридиоза.

8.Этиология и лабораторная диагностика амёбиаза, лямблиоза, мочеполового трихомоноза.

9.Ассоциативные инфекции простейших с хламидиями, микоплазмами, гонококком.

Классификация грибов

Грибы эукариоты классифицируются в отдельный таксон –

Mycota, который подразделяется на два отдела: Myxomycota (грибыслизневики) и Eumycota (настоящие грибы). Отдел Eumycota содержит 7 классов, согласно присущим им анаморфным (бесполым) и телеморфным (половым) стадиям развития (см. таблицу ниже). Фикомицеты относятся к низшим, а эумицеты – к высшим грибам. Большинство патогенных грибов относится к дейтеромицетам. Это сборная группа разных видов грибов, не имеющих полового процесса и размножающихся вегетативно или с помощью спор (несовершенные грибы).

Классификация отдела Eumycota

Грибы имеют эукариотическое строение клетки. Клеточная стенка содержит полисахариды преимущественно – хитин (но с низким содержанием азота, в отличие от клеток членистоногих), гликаны. Многие грибы в зависимости от окружающих условий проявляют диморфизм. Один и тот же вид может быть как мицелиальным (плесневым), иметь строение в виде нитей (гифов), так и дрожжеподобным – предствлять собой крупные клетки. Из пораженных тканей и органов чаще выявляются дрожжеподобные клетки, а при культивировании in vitro – в форме типичных плесневых микроорганизмов.

Грибы растут на средах с кислым рН (на них рост бактерий затруднён), чаще всего используют среду Сабуро (пептонный агар с большим содержанием мальтозы или глюкозы). Для придания средам селективных свойств в них добавляют антибиотики (пенициллин,

66

стрептомицин, гентамицин, левомицетин), обычно делают парные посевы (при 25оС и 37оС) с целью выявления возможного диморфизма гриба. Все заболевания, вызываемые этими микроорганизмами, называются микозами.

Общая характеристика вирулентности грибов

Факторы патогенности грибов:

Для грибов характерна низкая вирулентность, большинство грибов не способно продуцировать токсины и другие факторы патогенности, поэтому микозы мало заразны. Человек заразен в основном при поверхностных микозах, кандидозе.

Грибы продуцируют протеолитические и липолитические ферменты, разрушающие клетки и ткани макроорганизма; могут продуцировать токсины. Основное патогенное действие: они оказывают прямое воздействие на клетки человека продуктами метаболизма и химическими веществами своей клеточной стенки.

Общая характеристика иммунитета при микозах

Грибы и продукты их метаболизма – сильные иммуногены, вызывают сильный иммунный ответ. При микозах развивается и гуморальный, и клеточный иммунитет, развивается сенсибилизация (аллергия). Иммунный ответ отсутствует при сапрофитиях – поверхностных микозах т.к. поражается роговой слой эпидермиса и поверхность волосяного стержня, а значит, не происходит контакта с иммунной системой.

Методы лабораторной диагностики микозов

В лабораторной диагностике микозов используют микроскопический, культуральный, иммунологический методы, а при системных микозах используют молекулярно-генетические.

Микроскопический метод диагностики микозов - один из основных методов выявления возбудителя. В отличие от бактерий, вначале микроскопируют неокрашенные препараты. Готовят раздавленную или висячую каплю для обнаружения структуры грибов в образцах жидкой консистенции и после предварительной обработки 10% раствором КОН в фрагментах кожи, ногтях, волосах и др. В образцах с большим содержанием кератина проводят микроскопию окрашенных препаратов. Используют окраску по Граму (грибы – грамположительные клетки), окрашивают с помощью реактива Шиффа (выявление полисахаридов клеточных стенок грибов), по РомановскомуГимзе и др. Проводят обработку гистологических препаратов тканей человека флюоресцирующей сывороткой (прямая РИФ) с целью вы-

67

явления антигенов возбудителя.

Идентификацию грибов проводят по морфологическим и биохимическим признакам. Этот метод требует для своего осуществления нескольких недель, что связано с длительным ростом грибов на питательных средах.

Иммунологические методы диагностики микозов: серологические реакции проводят для обнаружения специфических антител в сыворотке крови или антигенов возбудителя в крови, ликворе, моче. Иммунологический метод проводят для установления диагноза до получения результатов посевов. Используют реакции латексагглютинации (выявление IgM), РСК (выявление IgG), ИФА, кож- но-аллергические пробы (но диагностическую ценность ограничивает их неспецифичность). Недостатком этих методов является то, что грибы содержат большое количество перекрёстно реагирующих антигенов.

Общая классификация микозов

В зависимости от локализации поражений микозы подразделяют на 4 группы:

I. Системные или глубокие микозы, вызывающие поражение органов и тканей организма (кокцидиоз, гистоплазмоз, криптококкоз, бластомикозы)

II. Субкутанные или подкожные микозы, вызывающие поражение кожи, подкожной клетчатки, фасций и костей (споротрихоз, хромомикоз, мадуромикоз).

III.Эпидермомикозы вызывают поражение эпидермиса, ногтей

иволос (дерматомикозы).

IV. Поверхностные микозы, характеризующиеся поражением волос и поверхностного рогового слоя эпидермиса (кератомикозы и др).

Выделяют также оппортунистические микозы (условно-

патогенные грибы).

Общая характеристика

I. Системные или глубокие микозы Бластомикоз. Хроническое заболевание, относящееся к глубо-

ким микозам, характеризуется образованием гранулем и гнойных процессов в легких, коже, подкожной клетчатке, а при диссеминации - во многих внутренних органах.

Этиология Возбудитель Blastomyces dermalitidis.

68

Культуральные свойства. На среде Сабуро при 300С растет образуя, мицеллярные, септированные формы (рис.42); при 370С образует дрожжевые формы - овальные или округлые клетки, имеющие двойную оболочку (рис.43). Образуют серовато-желтые с пушком колонии.

Патогенез. При размножении в тканях бластомицеты стимулируют образование специфических гранулем с дальнейшим их распадом и образованием каверн (полость, дырка) в легких. Поражаются также кости, печень, селезенка, на коже образуются кровянистогнойные папулы.

Эпидемиология Бластомицеты распространены в почве, на гниющих растениях. Заражение происходит при вдыхании спор. Заболевание распространено в США, Канаде, Африке и некоторых других странах.

Микробиологическая диагностика

Материал для исследования: гной, кровь, моча, мокрота, биоптат, соскоб из язв и др.

Микроскопируют - обнаруживают крупные клетки с двойной оболочкой. Культивируют на среде Сабуро, грибы растут сероватожелтыми с пушком колониями.

Проводят серодиагностику – обнаружение антител в РСК и др. Проводят кожно-аллергическую пробу с бластомицином – экстрактом из клеток гриба.

Кокцидиоидомикоз. Относится к группе глубоких системных микозов, клинически характеризуется преимущественным поражением органов дыхания, кожи, подкожной клетчатки с образованием свищей и инфильтратов.

69

Этиология. Возбудитель - Coccidioides immitis (синонимы: кокцидиоидоз, кокцидиоидная гранулема, лихорадка долин, пустынный ревматизм, болезнь Пасадаса-Вернике). Диморфный гриб имеющий мицеллярную форму, заразную для человека, и тканевую или сферическую форму, не заразную для человека (рис. 39).

Рис. 44. Coccidioides immitis: 1 - артроконидия; 2 - эндоспоры; 3- сферула.

Эпидемиология. Хранителем инфекции является почва, в которой происходит развитие гриба с образованием спор. Кокцидиоидомикоз относится к эндемическим заболеваниям, распространенным в полупустынных и степных местностях.

Гистоплазмоз - ретикулоэндотелиоз (синонимы: болезнь Дарлинга, ретикулоэндотелиальный цитомикоз), относится к глубоким микозам, характеризуется полиморфизмом клинических проявлений от легких и латентных форм до прогрессирующих заболеваний, заканчивающихся смертью больного. Преобладают легочные формы гистоплазмоза.

Этиология. Возбудитель - Histoplasma capsulatum. Вызывает – гистоплазмоз. В тканях образует дрожжевую форму, а на средах при 20-250 С - мицеллярную.

Эпидемиология. Гистоплазма сохраняется в почве. В загрязнении (заражении) почвы имеет определенное значение выделение гриба инфицированными животными и птицами (летучие мыши, кошки, собаки, куры, скворцы и др.). Инфицирование людей происходит воз- душно-пылевым путем. Случаев заражения человека от больных людей и животных не наблюдалось. Гистоплазмоз широко распространен в различных странах Африки и Америки, встречается также в Европе и Азии, единичные случаи гистоплазмоза описаны в нашей стране, возможны и завозные случаи.

70