Подготовка к анализу

Перед началом определения готовят рабочий раствор красителя путем смешивания водного раствора кислотного сине-черного красителя и буферного раствора. Раствор готовят в колбе вместимостью 200 см³, объем которой после смешивания раствора и добавления 0,2 см³ вспомогательного вещества ОП-7 доводят дистиллированной водой до метки. Рабочий раствор красителя должен иметь рН 2,4 + 0,10. Для приготовления водного раствора красителя в колбу на 500 см см³ вносят 5,4 г кислотного сине-черного, приливают 200 см³ дистиллированной воды и растворяют при нагревании (температура должна быть не выше 70⁰С).

Буферный раствор готовят в колбе на 750 см³, растворяя 31,7 г лимонной кислоты, 8,4 г Na₂HPO₄*12 H₂O или 3,4 г Na₂HPO₄ и 0,6 г молока 400 см³ дистилированной (растворение ведут при нагревании).

Фотоколориметр к работе подготавливают следующим образом. За 15 мин. до проведения к фотоколориметру подключают источник энергии, механический корректор устанавливают в положении «открыто» а стрелку гальванометра ручкой электрического корректора на «0». В обе кюветы наливают контрольный раствор, правый барабан устанавливают на нулевое деление шкалы оптической плотности. Переключатель чувствительности гальванометра переводят в положение «1» и рукояткой фотометрических клиньев грубой настройки стрелка гальванометра подводится к нулю. Затем переключатель переводят в положение «2» и рукояткой точной настройки устанавливают стрелку гальванометра на ноль. Переключатель в положение «1» и в правую кювету наливают испытуемый раствор.

Ход определения

В пробирку отмеривают 1см³ молока, приливают 20 см³ рабочего раствора красителя и, закрыв пробирку резиновой пробкой, перемешивают содержимое, переворачивая пробирку 5-10 раз в течение 0,5 мин. Следует избегать встряхивания, так как при этом образуется трудноразрушаемая пена. Затем осадок отделяют центрифугированием в течение 10 мин. при 1500 об/мин и в течение 20 мин при 1000 об/мин (при отсутствие центрифуги допускается применять фильтрование). Отбирают пипеткой 2 см³ подосадочной жидкости (фильтрата) и помещают в мерную колбу на 200 см³. Объем в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

В правую кювету прибора с рабочей длиной 10 мм наливают разведенный в 100 раз фильтрат, вращениям правого барабана устанавливают стрелку гальванометра на «0» и определяют величину оптической плотности по шкале на правом барабане, используя светофильтр с длиной волны 590-600 нм.

Массовую долю белка в молоке в процентах определяют, пользуясь градуировочным графиком. Для построения графика в нескольких пробах молока (с массовой долей белка 2,5-3,5 % ) определяют массовую долю белка методом Кельдаля и оптическую плотность фильтрата. Вышеизложенным способом. На оси абсцисс откладывают значения массовой доли белка, на оси ординат -соответствующие им значение оптических плотностей.

3. Определение массовой доли казеина методом кислотного титрования

В основе метода кислотного титрования лежит способность казеина нейтрализоваться щелочью (при индикаторе фенолфталеина). Для этого казеина в одной пробе молока осаждаются разбавленной серной кислотой и раствор непосредственно титруют щелочью (без фильтрования). В другой пробе казеин осаждают и отфильтровывают, а полученный фильтрат без казеина вновь тируют. Количество казеина определяют по разности щелочи, пошедшей на оба титрования. Полное осаждение казеина происходит в изоэлектрической точке при рН молока около 4,7.

Посуда: Колбы конические на 200 см³, мерный цилиндр на 100 см³,мерная колба на 100 см³, воронка, бумажный фильтр.

Реактивы: 0,05н раствор серной кислоты, 0,1 н раствор гидроксида натрия, 2%-ный спиртовой раствор фенолфталеина.