- •Общая микробиология
- •2. Основные группы микроорганизмов. Эукариоты и прокариоты. Особенности структурной организации прокариот. Генетический аппарат бактерий, его особенности, примеры автономных репликонов бактерий.
- •3. Понятие о подвижных генетических элементах. Гены-вставки, транспозоны, их функции. Инсерционный мутагенез.
- •6. Типы генетических рекомбинаций (гомологичная, негомологичная, сайтспецифическая). Механизмы мобилизации бактериальных генов: трансформация, трансдукция и конъюгация. Фаговая конверсия.
- •7. Принцип фенотипической классификации бактерий. Основные морфологические формы бактерий. Работы а. Левенгука.
- •8. Структурные компоненты бактериальной клетки: цитоплазматическая мембрана, внутриклеточные включения, жгутики, их структура и функции. Методы обнаружения включений и жгутиков.
- •9. Экологически зависимые структуры бактериальной клетки. Строение и функции бактериальной эндоспоры и капсулы, методы их обнаружения.
- •10. Тинкториальные свойства бактерий. Связь с особенностями строения трех основных типов клеточной стенки. Принцип окраски по методу Грама.
- •11. Актиномицеты, спирохеты как нетипичные бактерии. Особенности строения и физиологии.
- •12. Риккетсии, хламидии, микоплазмы как нетипичные бактерии. Особенности строения, метаболизма, экологии.
- •15. Принципы и методы культивирования бактерий. Условия, влияющие на рост и размножение бактерий. Ростовые факторы. Питательные среды и их классификация. Работы р. Коха.
- •17. Культуральные свойства бактерий. Характеристика колоний. Методы изучения культуральных свойств бактерий. Понятие о биотипе (биоваре).
- •18. Стерилизация и дезинфекция. Понятие о дезинфектантах и антисептиках. Основные методы стерилизации при проведении микробиологических исследований.
- •20. Антибиотикорезистентность бактерий. Генетические механизмы лекарственной устойчивости бактерий, пути преодоления. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
- •21. Вирусы как особая форма жизни. Экология вирусов. Строения и химический состав вириона. Принципы классификации вирусов. Значение вирусов в патологии человека. Работы д. Ивановского.
- •24. Бактериофаги: строение, взаимодействие с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные фаги. Лизогения. Практическое использование фагов. Понятие о фаговаре
- •25. Микробиологический анализ как основа лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Принципы и основные направления. Культурально-зависимые и культуральнонезависимые методы диагностики.
- •26. Культуральный метод (бактериологический анализ) в диагностике инфекционных заболеваний. Правила забора материала и основные этапы анализа. Принципы идентификации бактерий.
- •27. Принципы и методы экспресс-диагностики инфекционных заболеваний. Молекулярногенетические методы. Понятие о полимеразной цепной реакции (пцр), преимущества и ограничения метода.
- •28. Иммунохимический анализ. Задачи иммунохимического анализа. Серотипирование и серодиагностика. Реакции биологической нейтрализации.
- •Нейтрализация бактериального токсина.
- •Реакция торможения гемагглютинации.
- •Нейтрализация цитопатического действия вирусов.
- •29. Иммунохимический анализ: реакции агглютинации, преципитации. Варианты постановки реакций.
- •Реакция агглютинации на стекле.
- •Развернутая реакция агглютинации.
- •Рп в жидкой фазе (кольцепреципитация).
- •Рп в твердой среде (пример, двойная иммунодиффузия по Оухтерлони).
- •30. Иммунохимические реакции на основе меченых антител. Иммуноферментный анализ. Иммуноблотинг.
- •Иммуноферментный анализ.
- •Иммуноблотинг.
- •31. Серологическая диагностика. Титр антител. Принципы изучения качественной и количественной сероконверсии.
- •Генетические основы патогенности бактерий.
- •36. Патогенность и вирулентность бактерий: факторы и механизмы, способствующие адгезии, колонизации, инвазии, персистенции. Антифагоцитарные факторы бактерий.
- •37. Бактериальные экзотоксины, их характеристика, принцип действия. Классификация экзотоксинов. Молекулярное строение и функция бинарных токсинов. Суперантигены, механизм их токсического эффекта.
- •38. Эндотоксины бактерий, их характеристика. Патогенез лпс-зависимой интоксикации. Понятие о модулинах. Контактные токсины, механизм их действия.
12. Риккетсии, хламидии, микоплазмы как нетипичные бактерии. Особенности строения, метаболизма, экологии.
Риккетсии – это мельчайшие бактерии, обитающие в кишечнике членистоногих. Они названы в честь американского микробиолога Г. Риккетса, который открыл возбудителя одного из риккетсиозов – пятнистую лихорадку и погиб от этой инфекции.
Подавляющее большинство риккетсий патогенны для человека. Их клеточная стенка построена аналогично грамотрицательным (розовые) бактериям.
Их атипизм проявляется в:
- неспособности синтезировать НАД - облигатные внутриклеточные паразиты. Их называют «энергетическими паразитами». Они выращиваются только в клеточных системах (куриный эмбрион).
полиморфизме (они существуют в виде кокков, палочек, нитевидных форм).
Видовым признаком риккетсий является их размножение в протоплазме или ядре клеток.
Заболевания: эпидемический вшивый сыпной тиф, эндемический крысиный сыпной тиф, пятнистые лихорадки;
Хламидии – это мелкие сферические бактерии, которые размножаются внутриклеточно, по химическому составу сходны с грамотрицательными бактериями. Хламидии имеют широкий спектр хозяев.
От типичных бактерий хламидии отличаются:
отсутствием в клеточной стенке пептидогликана (ригидность обеспечивается двухслойной мембраной);
наличием своеобразного жизненного цикла с взаимопревращениями двух основных морфофункциональных элементов – метаболически неактивных, инвазивных форм – элементарных телец и вегетативных форм – ретикулярных телец;
неспособностью синтезировать АТФ и являются облигатными внутриклеточными паразитами, («энергетическими паразитами»). Не выращиваются на питательных средах.
плеоморфизмом - внутри инфицированных клеток они представлены набором кокковидных форм, которые различаются по размеру, тинкториальным свойствами и пр.
Заболевания: трахома (конъюктивит), урогенитальный хламидиоз и прочие.
Микоплазмы - мельчайшие бактерии, лишенные ригидной клеточной стенки.
Термин «микоплазмы» формален, отражая способность к образованию «грибоподобных» мицелиальных форм, типичных для плесневых грибов и актиномицетов.
Микоплазмы широко распространены в природе. Они паразитируют на человеке, животных, растениях, есть сапрофитические виды. М. hominis и U. urealytiсum, вызывают урогенитальные заболевания.
Их атипизм характеризуют:
нет клеточной стенки, вместо этого они располагают трехслойной липидной мембраной, которая поддерживает осмотическую прочность микоплазм;
ауксотрофность по холестерину, это обусловливает их мембранный паразитизм (микоплазмы – облигатные внутриклеточные паразиты).
выраженный плеоморфизм в результате десинхронизации роста и деления клеток (некоторые из них до начала деления «успевают» многократно реплицировать свой геном, образуя удлиненные клетки, которые, «вырастая в стороны», дают ветвящиеся нити).
Отсутствие клеточной стенки у микоплазм связано с тем, что в геноме их нет информации, кодирующей синтез пептидогликана. С медицинской точки зрения важно и то, что они устойчивы к антибиотикам, действующим на клеточную стенку, что надо учитывать при назначении лечения.
13. Классификация бактерий по отношению к источникам углерода и факторам роста. Автотрофы, гетеротрофы. Прототрофы, ауксотрофы. Экологическая характеристика бактерий: сапрофиты и симбионты. Комменсалы. Облигатные и факультативные паразиты.
Классификация бактерий по отношению к источникам углерода:
Аутотроф - организмы, синтезирующие органические вещества из неорганических путем фотосинтеза.
Гетеротроф - организмы, использующие для своего питания готовые органические вещества.
Факторы роста – необходимые в малых количествах вещества, которые микроорганизм не способен синтезировать самостоятельно.
Группы факторов роста: 1.Пурины и Пиримидины ( для синтеза нуклеиновых кислот ); 2.Незаменимые аминокислоты (для синтеза белка); 3.Витамины ( коэнзимы и функциональные группы некоторых ферментов);
Прототроф - бактерии, не требующие ростовых факторов извне, так как способны синтезировать эти факторы сами. (E.coli). Организм, способный синтезировать сложные вещества из ограниченного числа простыхсоединений и потому способный развиваться на минимальной среде.
Ауксотроф- бактерии, нуждающиеся в факторах роста ( Lactobacillus). организмы, которые не способны синтезировать определенное органическое соединение, необходимое для роста этого организма
Экологическая характеристика бактерий:
Сапрофиты - свободноживущие гетеротрофы, развивающиеся на мертвых органических останках, приспособленных к несимбиотическому существованию.
Симбионты - форма взаимоотношений, при которой оба партнёра или только один извлекает пользу из другого
Комменсалы – полезно для одного (комменсала) и безразлично для другого.
Паразиты – симбионты, приносящие вред, усваивают органику в форме сложных веществ живого организма.
Облигатный паразитизм – паразитизм, являющийся обязательным для данного вида организмов.
Факультативные паразиты способны вести свободный образ жизни, но, попадая в организм хозяина, проходят в нём часть цикла своего развития и нарушают его жизнедеятельность.
14. Конструктивный метаболизм бактерий (АНАБОЛИЗМ). Скорость и фазы размножения бактерий на питательных средах. Бактериальные ферменты, их функции. Экзоферменты и эндоферменты. Конститутивные и индуцибельные ферменты.
Конструктивный метаболизм (анаболизм) – это совокупность реакций биосинтеза белков, нуклеиновых кислот, полисахаридов и липидов. Использование энергии АТФ для построения клеточного материала является не чем иным, как реакциями биосинтеза по созданию:
аминокислот;
нуклеотидов;
липидов;
углеводов.
Реакции протекают в несколько этапов. В результате начальных стадий из продуктов разложения глюкозы (пентозофосфаты, пирувата, ацетила КоА и т.д.) образуются белковые молекулы-мономеры, которые на следующих этапах собираются в макромолекулы.
Скорость и фазы размножения бактерий на питательных средах Размножение – увеличение числа клеток в популяции. Бактерии размножаются путем БИНАРНОГО деления (амитоз). Число особей растет в ГЕОМЕТРИЧЕСКОЙ прогрессии. При этом все прокариоты – ГАПЛОИДНЫ, т.е. только одна ДНК.
Размножение характеризуется:
ВРЕМЕНЕМ ГЕНЕРАЦИИ (интервал времени, за который число клеток удваивается);
КОНЦЕНТРАЦИЕЙ БАКТЕРИЙ (количество бактерий в 1 мл);
Прикладное значение – возможность определить время культивирования патогенных организмов. Средние показатели – время генерации=18-20 мин – время культивирования =18-24ч.
Фазы размножения: 1. Начальная (ЛАГ-ФАЗА) – начало интенсивного деления клеток, но пока что скорость деления низкая. 2. ЛОГ-ФАЗА – постоянное деление с максимальной скоростью, значительное увеличение числа клеток. 3. СТАЦИОНАРНАЯ - число клеток перестает увеличиваться. Количество погибших клеток приблизительно равно вновь появившимся. 4. ФАЗА ОТМИРАНИЯ – гибель клеток. Причины гибели клеток: 1.Недостаток питательных веществ; 2.Конкуренция за среду;
Бактериальные ферменты:
По механизму действия: оксидоредуктазы, трансферазы, изомеразы, лигазы, лиазы, гидролазы.
По месту реализации:
Экзоферменты (выделяются во внешнюю среду – фактор агрессии);
Эндоферменты (необходимы для внутренних процессов жизнидеятельности микроорганизмов);
По биохимическим свойствам:
Сахаролитические;
Липолитические;
Протеолитические;
Конститутивные ферменты – постоянно синтезируются в микробе. Индуцибильные ферменты – их концентрация возрастает в зависимости от наличия субстрата.