Вопрос 49. Способы выращивания бактерий

Способы культивирования: 1)стационарный,2)глубинный с аерацией,3)с использованием проточных питательных сред 1)питат.среды сохраняются постоянными, дополнительных манипуляций с ними не проводят.Однако при таком способе культ-ния в ЖПС,где преобладают анаэробные энергетические процессы,выход биомассы незначителен.Поэтому разработаны новые методы,где выход биомассы или биол.активных соединений (АБ,витамины,АК) намного больше. 2)применяют спец.устройства-реакторы.Они представляют собой герметические котлы (приспособленные автоклавы),в которые заливается ЖПС.Реакторы снабжены автоматическими приспособлениями,позволяющими поддерживать постоянную температуру,оптим рН,дозированное поступление необходимых дополнит-х в-в.Но главная их особенность-они постоянно продуваются стерильным воздухом и в них установлены мешалки,с помощью которых среда постоянно перемешивается.Поэтому во всей питат-й среде создается такая концентрация свободного О₂ ,при которой энергетическиепроцессы происходят в аэробных условиях,т.е. достигается максимальное использование энергии,заключенной в глюкозе, а след-но и максимальный выход биомассы. 3)позволяет создать такие условия,при которых клетки имеют возможность длительное время находиться в определенной фазе роста (экспоненциальной) при постоянной конц.питат.в-в и в одних и тех же условиях,обеспечивающих непрерывный рост культуры.Методы получения непрерывных культур основаны на том,что в аппарат,где растут клетки,непрерывно добавляют свежую питат.среду и одновоеменно из него удаляют соотвествующее кол-во бактерий. Различают хемостаты(аппарат,в кот.постоянно добавляется свежая питат.среда;с помощью механического перемешивания и аэрации создаются оптим.условия для снабжения бактерий О₂ и питат.в-ми,по мере из поступления часть бактерий удаляется) и турбидостаты (принцип работы основан на поддержании постоянной плотности (мутности) бакт.популяции в аппарате). Т.о.в соотвествии со способами культивирования различают периодические(при стац.и глубинном методах культ-ния) и непрерывные(при проточном)культуры микроорганизмов.Кр.того,при опред-х условиях получают синхронные культуры(клетки делятся одновременно)(используют для изучения стадий клет.цикла и роли отдельных генов в их осуществлении). Питательные среды.М.б. жидкими(на основе водных растворов каких-либо в-в-мясной воды,гидролизатов,молока,крови),плотными(к ним добавляют агар(1,5-3%)-полисахарид из морских водорослей, желатин), полужидкими(агар0,3-0,7%).По происхождению среды: естественные (кровяные,молочные,яичные) и искусственные (сбалансированные смеси питат.в-в). Питат.среды должны отвечать требованиям:1)содержать в достаточном кол-ве все необходимые питат.в-ва(источники энергии,С,N),соли и ростовые факторв.2)оптим.для роста данного вида рН.3)достаточная влажность.4)прозрачные по возможности.5)стерильные. По назначению питат.среды подразделяют: 1)универсальные-среды,на кот.хорошо растутмногие виды петогенных и непатогенных бактерий(мясо-пептонный бульон=мясная вода+1%пептон+0,5%NaCl, мясо-пептонный агар=МПБ+2-3%агар).2)дифференциально-диагностические- позволяют отличать одни виды бактерий от других по их ферементативной активности или культур-м проявлениям(среды ЭНДО,Левина,Плоскирева) 3)Селективные-среды,содержащие в-ва,используемые микроорганизмами определенных видов и не благопрепятствующие/препятствующие росту других(среды .Мюллера,селенитовая,1%пептонная вода) 4)дифференциально-селективные-сочетают в себе свойства 2)и3).Используются для ускорения обнаружения и идентификации бактерий,относящихся к большому числу широко распр-ных видов энтеробактерий и псевдомонад (среды Сиволодского).5)специальные-среды, спец. приготовленные для получения роста тех бактерий,кот.не растут_плохо растут на универ-х питат.средах(кровяной МПА-для получения роста патогенных стрептококков).6)ситетические-среды строго определенного хим.состава,представляющие собой р-ры нерганич-х солей с добавлением хим.соединений,кот.служат источником С или N (минимальная среда М-9),также могут включать АК,витамины. 7)полусинтетические-синтетические,к кот.добавляют продукт природного происхождения(сыворотку крови).