- •Окраска бактерий в мазках
- •Для обнаружения возбудителей используют различные методы и группы методов.
- •Окраска метиленовым синим Лефлера Методика окраски.
- •Окраска основным фуксином по Пфейферу
- •Окраска генциановым или метиловым фиолетовым
- •Окраска карболовым тионином Николя
- •Окраска акридиновым оранжевым по Дарту-Тернеру
- •Окраска по Граму Красящие растворы.
- •Красящие смеси для грамположительных бактерий:
- •Красящие смеси для грамотрицательных бактерий:
- •Методика окраски.
- •Окраска по Романовскому-Гимзе Приготовление красителя
- •Методика окраски
- •Окраска плазмодиев малярии в мазках по Романовскому-Гимза
- •Методика окраски «толстой капли».
- •Метод Френкеля
- •Флюоресцентное окрашивание мазков мокроты (метод Хагеманна) ,
- •Метод Киньуна (для срезов)
- •Метод Файта (для срезов)
- •Серебрение бактерий в мазках — метод Фонтана
- •Выявление жгутиков и ресничек Метод Леффлера
- •Метод Лайфзона
- •Метод Меллера
- •Окраска малахитовым зеленым Шеффера-Фултона
- •Метод Ожешки
- •Метод Битгера
- •Выявление возбудителей сыпного тифа и других риккетсий Выявление риккетсий в мазках (метод Маккиавелло)
- •Выявление риккетсий в срезах (метод Ника)
- •Выявление коринебактерий дифтерии
- •Выявление стрептококков
- •Выявление стафилококков
- •Выявление пневмококков
- •Выявление менингококков
- •Выявление гонококков
- •Выявление возбудителей чумы
- •Выявление анаэробных спорообразующих бактерий группы клостридии
- •Выявление возбудителей сибирской язвы
- •Выявление возбудителей кишечной инфекции
- •Выявление спирохет и других спиралевидных бактерий
- •Выявление возбудителей возвратного тифа
- •Выявление лептоспир
Для обнаружения возбудителей используют различные методы и группы методов.
1. Методы выявления кислых гликозаминогликанов (ГАГ) с помощью ШИК-реакции. Наилучшие результаты получают при выявлении простейших, в частности пневмоцист и токсоплазм, микоплазм, хламидий, некоторых грибов (особенно рода Candida) и капсулообразующих бактерий.
2. Методы с использованием основного фуксина, азура, тионина и метиленового синего (окраски по Пфейферу, Леффлеру, Николя и др.), которые в небольших концентрациях позволяют выявить разную, в основном бактериальную флору- Наиболее эффективны способы окраски по Цилю-Нильсену для выявления спирто- и кислотоустойчивых бактерий, в частности семейства Mycobacteriaceae (микобактерий туберкулеза, лепры и др.) и некоторых простейших (криптоспоридий). Используемые при этом основной фуксин и метиленовый синий позволяют выявить, помимо бактериальной флоры, фуксинофильные внутриклеточные включения, характерные для некоторых вирусных, особенно респираторных, инфекций. Азур и эозин эффективны для выявления различной бактериальной микрофлоры, особенно грамположительной, и некоторых простейших, в частности плазмодия малярии.
3. Методы, основанные на использовании анилинового фиолетового (окраска по Граму и ее модификации), позволяющие выявлять грамположительные бактерии и некоторые грибы, в первую очередь рода Candida. Следует, однако, иметь в виду, что наиболее интенсивно окрашиваются молодые формы. Погибшие или погибающие микроорганизмы утрачивают способность окрашиваться этими методами. В то же время часть грамотрицательных возбудителей, по крайней мере эшерихий, в случае их гибели становятся грамположительными или окрашиваются полихромно.
4. Методы, основанные на импрегнации нитратом серебра кусочков тканей, срезов или мазков, направлены на выявление разной, в основном бактериальной, флоры, поиски которой облегчаются в связи с тем, что импрегнированные серебром микроорганизмы немного увеличиваются в размерах.
Говоря о гистологических срезах, следует отметить, что некоторые микроорганизмы, особенно ДНК-вирусы (семейств Herpesviridae и Adenoviridae) и многие грибы (классов Ascomycetes и Phycomycetes), вполне удовлетворительно окрашиваются гематоксилином. В этом случае использование дополнительных способов окраски из числа перечисленных излишне. Осторожно следует подходить к интерпретации находок при бактериоскопии секционного материала, особенно при поздних вскрытиях, поскольку происходит постмортальная инвазия, а размножение многих видов бактерий происходит даже в предагональном периоде, на что указывают многие авторы.
Окраска метиленовым синим Лефлера Методика окраски.
Смешивают 30 мл насыщенного спиртового раствора метиленового синего со 100 мл 0,01 % раствора гидроксида калия. Мазки окрашивают в течение 3 — 5 мин, ополаскивают в проточной воде, дифференцируют 3 сек в 0,5 % растворе уксусной кислоты и ополаскивают в проточной воде. Проводят через спирты, просветляют в ксилоле и заключают в бальзам. Препараты можно изучать при масляной иммерсии без заключения в бальзам, но в этом случае они хранятся недолго.
Результат: бактерии окрашиваются в густо-синий цвет.