- •1. Биофизика
- •Лабораторная работа № 1 изучение энергии активации биологических процессов на примере работы na, к-атф-азы
- •Влияние температуры на ферментативную активность Na, к-атф-азы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 2 определение концентрации пигментов в растениях по спектрам поглощения
- •Упражнение 1. Определение концентрации хлорофиллов a и b в экстрактах из зеленых листьев
- •Упражнение 2. Изучение зависимости поглощения от концентрации вещества
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 3 измерение осмотической устойчивости эритроцитов
- •Упражнение 1. Изучение гемолиза с помощью колориметра
- •Упражнение 2. Измерение осмотической устойчивости эритроцитов
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 4 влияние уф-облучения на светопропускание раствора эритроцитов
- •Упражнение 1. Исследование гемолиза эритроцитов под действием освещения в присутствии красителя
- •Упражнение 2. Исследование зависимости гемолиза от времени освещения
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 5 изучение электропроводности крови и эритроцитов
- •Упражнение 1. Изучение электропроводности цельной крови, эритроцитов и плазмы
- •Упражнение 2. Изучение влияния гемолиза на электропроводность эритроцитов
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 6 регистрация потенциала действия нерва лягушки при различных температурах
- •Изготовление препарата изолированного седалищного нерва лягушки
- •Упражнение 1. Наблюдение пд нерва лягушки и расчет скорости проведения возбуждения по нерву
- •Упражнение 2. Расчет энергии активации процесса проведения возбуждения в нерве
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 7
- •Лабораторная работа № 8
- •Лабораторная работа № 9 определение проницаемости кожи лягушки для ионов
- •Упражнение 1. Изучение динамики распределения ионов
- •Упражнение 2. Влияние ингибиторов и блокаторов на проницаемость кожи лягушки
- •Контрольные вопросы
Упражнение 1. Изучение электропроводности цельной крови, эритроцитов и плазмы
Принцип метода. Метод основан на измерении количества заряженных группировок в составе молекул и свободных ионов.
Электропроводность определяют с помощью шприца. Сначала нужно найти электропроводность самого шприца: вставить его в ячейку и переключить «Conductivity» в положение «increasing». Затем в шприц влить 3-4 мл цельной крови, не вынимая его из ячейки, и измерить электропроводность. Величину электропроводности цельной крови рассчитывают как разность между показателями электропроводности крови со шприцем и без него. Затем в пластмассовую пробирку набирают 2 мл цельной крови, а во вторую пробирку – 2 мл воды. После этого кровь разделяют на 2 фракции с помощью центрифуги при 7000 – 8000 об/мин в течение 15 мин. По окончании центрифугирования плазму отделяют от эритроцитов и устанавливают величину электропроводности полученных фракций. Затем с помощью формулы рассчитывают удельную электропроводность цельной крови, эритроцитов и плазмы. При этом нужно учитывать длину проводника (высоту столба крови и внутреннее сечение шприца) (πr2).
Упражнение 2. Изучение влияния гемолиза на электропроводность эритроцитов
Для выполнения этой работы готовят 5 мл 1% суспензии эритроцитов, добавляют 0,5 мл 0,04% раствора эритрозина или метиленового синего. Полученную взвесь тщательно перемешивают и определяют электропроводность. Затем суспензию в кварцевой пробирке или чашке Петри помещают в камеру для УФ-облучения на 15 мин. Электропроводность рассчитываю – через 5, 15 и 30 мин после облучения. По окончании исследований необходимо построить график зависимости величины электропроводности от времени облучения эритроцитов.
Контрольные вопросы
1. Охарактеризуйте электрокинетические явления в биологии.
2. Назовите особенности электропроводности клеток и тканей для постоянного тока.
3. Что такое явление поляризации?
4. Виды поляризации в живых клетках.
5. Использование явления электропроводности в медицине.
6. Каким образом можно рассчитать коэффициент поляризации?
7. Каким образом изменяются поляризационные явления в живой ткани при увеличении частоты переменного электрического тока?
Лабораторная работа № 6 регистрация потенциала действия нерва лягушки при различных температурах
Для многих клеток и тканей организма характерно наличие разности потенциалов между наружной и внутренней мембраной. Она поддерживается за счет метаболических процессов (потенциала покоя нерва, мышцы и т.д.). В ряде случаев разность потенциалов может исчезать и вновь возникать; изменение разности потенциалов при раздражении называется потенциалом действия (ПД).
Такие электрические явления, как возбуждение клеток и проведение возбуждения по клеткам, играют большую роль в важнейших физиологических процессах. Подавляющее большинство информационных процессов в организме, их регулирование и адаптация осуществляются при прямом участии биопотенциалов. Благодаря непосредственной связи биоэлектрических потенциалов с обменом веществ и функциональным состоянием клетки они представляют собой чувствительные количественные параметры происходящих изменений в клетках в норме и патологии.
Цель работы: проследить на экране осциллографа и зафиксировать ПД нерва лягушки при температуре 20 и 10 °С и разных частотах раздражения. Рассчитать коэффициент Вант-Гоффа (Q10), энергию активации процесса проведения возбуждения, скорость проведения возбуждения.
Приборы и оборудование
Катодный осциллограф, усилитель переменного тока, стимулятор, камера с раздражающим и отводящими электродами для работы при комнатной температуре, микрохолодильник, селеновый выпрямитель, набор препаровальных инструментов, чашки Петри, раствор Рингера для холоднокровных, миллиметровая бумага или калька.