1.1.2 Реактивы
– 1 %-ный забуференный раствор крахмала (картофельного) – навеску растворимого крахмала берут из такого расчета, чтобы в 100 мл раствора содержался 1 г сухого крахмала. Например, если влажность крахмала 13 %, то навеска крахмала в граммах для 100 мл 1 %-ного раствора должна составить:
(1)
Взвешенную на технических весах навеску крахмала без потерь переносят в мерную колбу на 100 мл, добавляют 25 мл дистиллированной воды и перемешивают, затем добавляют еще 25 мл воды и помещают колбу в кипящую водяную баню, выдерживая ее до полного растворения крахмала и непрерывно помешивая раствор. Содержимое колбы охлаждают до 20 С, добавляют 10 мл буферного раствора (рН 4,8…4,9), доводят водой до метки и перемешивают;
– буферный раствор (рН 4,8…4,9);
– 0,1 н раствор соляной кислоты;
– основной раствор йода – в тарированном стаканчике с притертой крышкой отвешивают 0,5 г йода и 5,0 г йодированного калия и добавляют 2,0 мл дистиллированной воды. Стаканчик закрывают крышкой, содержимое перемешивают до полного растворения йода. Раствор переливают в мерную колбу с притертой крышкой на 200 мл, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Полученный раствор хранят в темном месте и используют в течение 30 дней;
– рабочий раствор йода – 2 мл основного раствора разбавляют в мерной колбе на 100 мл дистиллированной водой до метки. Перед употреблением необходимо проверить оптическую плотность рабочего раствора йода на фотоэлектроколориметре в кювете с длиной грани 1,0 см при светофильтре с длиной волны =453 нм.
Оптическая плотность раствора йода должна быть равна 0,160 0,01. В случае отклонения оптической плотности раствора от этой величины ее приводят к необходимой добавлением нескольких капель воды или основного раствора йода;
– солодовая вытяжка – взвешивают на технических весах две навески измельченного солода – одну для определения влажности и вторую для определения АС. Величина навески просяного солода 10 г, ячменного, овсяного и ржаного 5 г. Навеску количественно переносят в химический стакан или коническую колбу на 200…250 мл, добавляют 10 мл буферного раствора (рН 4,7…4,9) и 90 мл дистиллированной воды.
Полученную смесь выдерживают в течение 60 мин при 30 С, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтруют и фильтрат используют в качестве основного раствора для определения АС. Для проведения ферментативной реакции готовят рабочий раствор, пользуясь данными таблицы 1.
Таблица 1 – Приготовление рабочих ферментных растворов солода
Ожидаемая активность солода, ед.АС |
Масса солода в 5 мл рабочего раствора, мг |
Расход основного раствора на приготовление рабочего раствора, мл/100 мл |
Для просяного солода |
||
5…10 |
30 |
6 |
11…15 |
20 |
4 |
16…20 |
10 |
2 |
Для ячменного, овсяного, ржаного солода |
||
16…20 |
20 |
8 |
21…30 |
10 |
4 |
31…50 |
7,5 |
3 |