- •Усманов Рустем Эмбияевич изменение функциональной активности дофаминергической системы мозга крыс при интоксикации ионами свинца. Курсовая работа
- •Оглавление
- •Раздел 1 обзор литературы
- •Раздел 2 материалы и методы
- •Раздел 1 обзор литературы
- •1.1 Тяжелые металлы – общая характеристика
- •1.2 Химические свойства и область применения свинца
- •1.3 Источники свинцового загрязнения и особенности биологического действия
- •Симптомы свинцовых отравлений.
- •1.4 Дофаминергическая система и ее участие в поведенческих актах Локализация в цнс
- •Типы дофаминовых рецепторов
- •Глава 2 материалы и методы исследования
- •2.1 Организация экспериментов с лабораторными животными
- •2.2 Поведенческие модели стресса
- •2.3 Статистические методы
- •Список литературы
2.2 Поведенческие модели стресса
Тестирование проводилось в утреннее время.
Тест открытое поле. Влияние соединений на спонтанную и исследовательскую активность и эмоциональность животных изучали с помощью теста открытого поля. Поле представляло собой прямоугольник 90·110 см, с деревянными стенками и пластиковым полом с начерченными на нем 21 квадратом, в центре которых располагались фишки, а в 8 крайних, граничащих со стенками квадратах были проделаны специальные отверстия. Тестирование проводилось при освещенности 90 лк.
Крыс тестировали в течение 2 минут через 1,5 часа после инъекций. Исследовали следующие поведенческие феномены:
горизонтальная двигательная активность (ГДА) определялась по числу пересеченных квадратов, причем засчитывалось пересечение квадрата в случае переход его границ обоими задними лапами, являлась характеристикой локомоторной активности животных.
вертикальная двигательная активность (ВДА) – по числу вертикальных стоек, рассматривалась как проявление исследовательской активности,
исследовательская активность (ИА) – по числу заглядываний в отверстия и обнюхивания фишек, также являлась проявлением исследовательского поведения,
груминг (Гр) – по числу умываний передними лапками головы, трактовался как показатель эмоционального состояния животного,
дефекация (деф) – по числу болюсов, также как и Гр, являлась показателем эмоциональности животного, а также показателем состояния вегетативной нервной системы,
уринации (Ур) – по числу уринаций.
Тест черно-белая камера. Камера представляет собой ящик из оргстекла, состоящий из двух равных отсеков (так называемые «светлый» и «темный» отсеки камеры) 252525 см. В перегородке между отсеками имеется выдвижная дверка. «Темный отсек» сверху снабжен открывающейся наверх крышкой, снаружи, поверх оргстекла по периметру стен и пола, был полностью обклеен черной светонепроницаемой бумагой. Над «светлым отсеком» имелась электрическая лампа мощностью 40 Вт.
Во время эксперимента в течение первых 5 мин крыса находилась в «темном отсеке». Затем, над «светлым отсеком» зажигалась электрическая лампочка и открывалась дверца в перегородке. Тестирование длилось 5 мин, в ходе которых визуально регистрировалась ИА животных: число и длительность (с) выглядываний из «темного отсека» в «светлый» через отверстие в перегородке, а также число и длительность (с) выходов в «светлый отсек». Под выглядыванием понималось пересечение всей мордочкой животного порога в перегородке между отсеками, а под выходом – пересечение мордочкой и всеми передними лапами порога. При этом регистрировалась длительность каждого двигательного акта в отдельности, и сумма в целом. Показателем неспецифического поведения служила интенсивность Деф (об этом свидетельствовало число болюсов, обнаруженных в темном отсеке после окончания тестирования).
Тест Порсолта. При тестировании крысы опускались в металлический цилиндр высотой 60 см и диаметром 50 см, уровень воды составлял 35-40 см, температура (24±2) °С. Длительность теста составляла 3 мин, в течение которых регистрировались следующие поведенческие показатели: латентность первого «зависания» (иммобильность >5 с), суммарное время активного и пассивного плавания (с) и количество движений, направленных на освобождение от воды: груминогоподобные движения, отряхивания, выпрыгивания, ныряния. Под иммобильностью подразумевается полное отсутствие плавательных движений при пассивном удержании животного на воде.
После тестирования каждого животного в «открытом поле» и «черно-белой камере», дно камер вначале тщательно протирали влажной тряпкой (без применения каких либо дезинфицирующих и дезодорирующих средств) и затем сухой. Это исключало возможность внесения корректив в поведение следующего испытуемого.