2. Лейкоцитарная система крови

Образование лейкоцитов

• Места лейкопоэза: миелоидная ткань костного мозга (образование гранулоцитов, моноцитов, В-лимфоцитов и предшественников Т-лимфоцитов) и лимфоидная ткань (дифференцировка и размножение В- и Т-лимфоцитов, плазмоцитов).

• Схема лейкопоэза.

- Гранулоцитопоэз: СКК→КОК-ГММЭ → бипотентные предшественники (нейтрофильно-эозинофильный, гранулоцитарно-моноцитарный, гранулоцитарно-эритроцитарный)→унипотентные предшественники нейтрофилов, базофилов и эозиофилов; соответствующие миелобласты→промиелоциты→миелоциты→ метамиелоциты→ палочкоядерные гранулоциты →сегментоядерные гранулоциты (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы).

- Моноцитопоэз: СКК →полипотентный предшественник миелопоэза →бипотентный предшественник гранулоцитов и моноцитов →унипотентный предшественник моноцитов →монобласт →промоноцит →моноцит.

- Лимфопоэз: СКК →полипотентный предшественник лимфопоэза (КОК лимф.) →предшественники Т- и В-лимфоцитов (пре-КОК-Т, пре-КОК-В) →Т- и В-лимфобласты →Т- и В-лимфоциты.

Лейкоциты циркулирующей крови

• Виды и функции лейкоцитов (их процентное соотношение составляет лейкоцитарную формулу).

- Нейтрофилы (48-78% от общего числа лейкоцитов): их зернистость содержит вещества, обладающие высокой бактерицидной активностью (лизоцим, катионные белки, дефензины, лактоферрин, коллагеназа, миелоперксидазу, образующую хлорноватистую кислоту и др.); на плазмолемме имеются рецепторы к иммуноглобулинам, белкам комплемента, молекулам адгезии, цитокинам. Основные функции нейтрофилов – фагоцитоз и уничтожение микробов и клеточных обломков; продукция факторов хемотаксиса; гранулоцитарного и моноцитарного КСФ, ИЛ-6 (интерферона β₂) и др. Фагоцитоз сопровождается резким повышением нейтрофилами О₂ («респираторный взрыв»), до 90% которого идет на продукцию свободных радикалов кислорода, повреждающих объекты фагоцитоза.

- Базофилы (0 – 1,0%): «фармакологические бомбы» - синтезируют и депонируют в гранулах биоактивные вещества (гепарин, гистамин, лейкотриены, фактор хемотаксиса эозинофилов и др.); на плазмолемме имеют β₂-адренорецепторы, рецепторы к IgЕ, стимуляция которых вызывает дегрануляцию базофилов; участвуют в регуляции агрегатного состояния крови, тонуса и проницаемости сосудов, тонуса бронхов; стимулируют синтез IgЕ, участвуют в аллергических реакциях (например, анафилактический шок, бронхиальная астма).

- Эозинофилы (0,5-5,0%): грагулы содержат антипаразитарный щелочной белок, простагландины, лейкотриены, гистаминазу, ингибитор дегрануляции тучных клеток и базофилов; на мембране имеются β₂-адренорецепторы, рецепторы к IgE, IgG, IgM и белкам комплемента (например, С_3а и С_5а); эозинофилы участвуют в уничтожении гельминтов (аскарид и др.), тормозят функцию базофилов.

- Лимфоциты (20-35%): обеспечивают гуморальный и клеточный иммунитет; регулируют деятельность клеток других типов в иммунных реакциях, процессах пролиферации и регенерации тканей, дифференцировки клеток, секретируют цитокины.

- Моноциты (3-11%): фагоцитоз в кислой среде (обеспечение неспецифической защиты организма против микробов, опухолевых клеток и зараженных вирусами клеток); участие в иммунных реакциях (в качестве антигенпредставляющих и эффекторных клеток); синтез цитокинов, некоторых компонентов системы комплемента, факторов, принимающих участие в гемостазе.

• Циркулирующий и пристеночный пулы лейкоцитов: миграция лейкоцитов из сосудистого русла в периферические ткани особенно активно происходит на уровне посткапиллярных венул; она невелика у гранулоцитов, сильно выражена у моноцитов и лимфоцитов. Миграция происходит в несколько стадий: лейкоциты адгезируются на поверхности эндотелия, мигрируют за пределы сосуда за счет сократительной активности цитоскелета; направленность миграции обусловлена факторами хемотаксиса.

• Количественная характеристика лейкоцитов.

• Физиологические лейкоцитозы (увеличение количества лейкоцитов крови выше 9·10⁹\л).

- Виды: пищевой, миогенный ,эмоциональный, при беременности.

- Механизмы: 1) ведущим является перераспределительный механизм - мобилизация лейкоцитов краевого сосудистого пула и зрелого пула костного мозга; 2) может присоединяться продукционный механизм (например, при миогенном лейкоцитозе).

- Отличие от реактивных (продукционных) лейкоцитозов: небольшое увеличение лейкоцитов в крови (до 1,5 раз), отсутствие сдвига влево в нейтрофильном ряду.

• Лейкопения (снижение содержания лейкоцитов ниже 4·10⁹\л; наблюдается, как правило, при патологических состояниях).

Разрушение лейкоцитов.

• Продолжительность жизни лейкоцитов: гранулоциты (погибают после единственной вспышки активности), моноциты и короткоживущие лимфоциты – от нескольких часов до 5 – 10 суток; долгоживущие лимфоциты – от нескольких месяцев до 5 лет.

• Разрушаются лейкоциты в тканях, куда они мигрировали.

Нейрогуморальная регуляция лейкоцитарной системы.

• Влияние цитокинов.

- Трансформацию СКК в полипотентный (КОК-ГММЭ) и бипотентные предшественники миелопоэза стимулируют фактор СКК, ИЛ-1, ИЛ-3, ИЛ-6, ИЛ-11, КСФ-ГМ, тормозят – ИЛ-8, ИЛ-10, лейкоцитарные кейлоны.

- Образование монопотентных предшественников и более дифференцированных клеток активируют соотвествующие колониестимулирующие факторы (КСФ) и другие факторы:

образование нейтрофилов активирует КСФ-Г, ИЛ-8, продукты распада нейтрофилов; тормозит – изоферритин, выделяющийся из зрелых нейтрофилов;

образование эозинофилов активирует КСФэоз. (или ИЛ-5);

образование базофилов (и тучных клеток) активирует КСФбаз.;

образование моноцитов активирует КСФмон., тормозит выделяющийся из моноцитов простагландин Е.

- Трансформацию СКК в предшественник Т-лимфоцитов и в дифференцированные Т-лимфоциты стимулируют ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-9, ИЛ-12, гормоны тимуса и др.; тормозит - ТРФ_β.

- Трансформацию СКК в предшественник В-лимфоцитов и в дифференцированные В-лимфоциты стимулируют ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-11 и др.; тормозит – трансформирующий ростковый фактор ТРФ_β.

• Влияние гормонов на лейкопоэз.

- Глюкокортикоиды стимулируют пролиферацию нейтрофилов, тормозят образование эозинофилов и лимфоцитов, выход моноцитов из костного мозга.

- Адреналин стимулирует пролиферацию моноцитов и выход нейтрофилов из костного мозга в кровь.

- Тимозин, СТГ, окситоцин стимулируют пролиферацию Т-лимфоцитов.

• Нервная регуляция лейкопоэза.

- Рецепторное звено – сосудистые и тканевые хеморецепторы.

- Центральное звено – гипоталамус и вегетативные центры при взаимодействии с высшими центрами.

- Эфферентное звено – вегетативная нервная система:

симпатические влияния и адреналин через β₂-адренорецепторы (нейтрофилез, перераспределительный лейкоцитоз);

парасимпатические влияния (лимфоцитоз, эозинопения, перераспределительная лейкопения).

Методики исследования лейкоцитов.

• Методика подсчета лейкоцитов. Кровь для разведения и лизиса эритроцитов смешивают с раствором уксусной кислоты. Лейкоциты считают по всей сетке в 100 больших (не разделенных на малые) квадратах счетной камеры и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема и разведения крови. Автоматический подсчет лейкоцитов проводя с помощью гематологических анализаторов и счетчиков: разведенная кровь пропускается через микроотверстие прибора, проходящая через него клетка увеличивает сопротивление между электродами, и возникающий импульс передается на счетное устройство. Норма: количество лейкоцитов крови равно 4 - 9·10⁹\л.

• Лейкоцитарная формула определяется путем последовательного подсчета всех видов лейкоцитов (считают 200 лейкоцитов в мазке крови) с выявлением их процентного соотношения (норма см. выше 2.2). В лейкоцитарной формуле можно определить ядерный индекс (ЯИ) в нейтрофильном ряду: Метамиелоциты + Палочки\Сегменты, который равен 0,05-0,08; сдвиг влево (ЯИ>0,08) свидетельствует об увеличении молодых форм нейтрофилов, вправо (<0,05) – старых форм.