Общий принцип изготовления

1. Подбор соответствующих штаммов возбудителя;

2. Культивирование соответствующих штаммов возбудителей на питательных средах;

3. Гомогенизация и стандартизация микробной массы;

4. Инактивация добавлением антисептических веществ либо нагреванием;

5. Фасовка;

6. Контроль на стерильность, специфичность, активность.

Диагностические сыворотки

Для идентификации или типизации возбудителей инфекционных болезней или для обнаружения антигена в исследуемом патматериале путем постановки серологических реакций. В зависимости от вида серологической реакции, при постановке которой применяются диагностические сыворотки, и делят н следующие группы:

1. Агглютинирующие диагностические сыворотки (РА);

2. Преципитирующие (РП);

3. Антитоксические (РН);

4. Флюоресцирующие (люминесцирующие) сыворотки (МФА, РИФ);

Агглютинирующие

Применяют для определения вида возбудителя и его серовара (серотипа) в капельной или пробирочной РА.

1. Групповые агглютинирующие лептоспирозные сыворотки;

2. Монорецепторные сальмонеллезные О- и Н-агглютинирующие сыворотки;

3. Агглютинирующие О-колисыворотки;

4. Листериозные агглютинирующие сыворотки;

5. Кампилобактериозные агглютинирующие сыворотки.

Преципитирующие

Сибиреязвенная преципитирующая сыворотка для постановки РП.

Антитоксические

Применяются для определения типа токсина выделенной культуры токсигенного возбудителя и для обнаружения токсина в исследуемом материале.

1. Антитоксические типоспецифические сыворотки клостридиум перфрингенс типов А, В, С, Д, Е;

2. Антитоксические типоспецифические сыворотки клостридиум ботулинум;

Люминесцирующие

Сущность МФА заключается в том, что по известному антителу, меченному флюорохромом, определяют неизвестный антиген. Окрашенные флюорохромами иммунные глобулины сывороток, взаимодействуя с антигенами, образуют комплексы, ярко светящиеся зеленым или желто-зеленым светом при люминесцентной микроскопии. МФА применяется для диагностики таких заболеваний, как сибирская язва, рожа свиней, листериоза, сальмонеллезов, кампилобактериоза, туляремии, бруцеллеза и др.

Для приготовления флюоресцирующих сывороток могут быть использованы любые диагностические сыворотки.

Общие принципы изготовления диагностических сывороток

1. Подбор штаммов возбудителя;

2. Культивирование соответствующих штаммов на питательных средах;

3. Стандартизация до определенной концентрации микробов в 1 мл;

4. Инактивация методом нагревания;

5. Гипериммунизация животных (лошадей, волов, овец, кроликов);

6. Взятие крови через 8-10 дней после последней инъекции антигена;

7. Отделение сыворотки;

8. Консервирование сыворотки (фенол, тиомерсал);

9. Отстаивание в течение 2 месяцев;

10. Фильтрация через бактериальные фильтры;

11. Фасовка, лиофильная сушка;

12. Контроль: стерильность, активность, специфичность.

Аллергены

Микробные белки и продукты жизнедеятельности микроорганизмов. Применение основано на явлении инфекционной аллергии, т.е. гиперчувствительности замедленного типа в ответ на введение в ранее инфицированный организм гомологичного антигена.

1. Бруцеллин ВИЭФ;

2. ППД-туберкулин для млекопитающих, для птиц, КАМ-аллерген;

КАМ-аллерген применяется для постановки симультанной пробы – одновременное введение животному ППД-туберкулина для млекопитающих и КАМ-аллергена.

3. Маллеин – для диагностики сапа у лошадей;

Изготовление аллергенов.

Каждый аллерген готовится по своей технологии.

Маллеин:

Стерильный фильтрат убитой нагреванием бульонной культуры сапной бактерии. Имеет вид прозрачной светло-желтой стерильной жидкости. Представляет собой продукт жизнедеятельности сапных культур. Для получения маллеина вирулентные штаммы засевают в колбы с МПБ с добавлением глицерин, выдерживают при температуре 37 градусов в течение 4 месяцев. Автоклавируют для инактивации возбудителя. Осаждают. Фильтруют через бактериальные фильтры. Разливают Контроль на стерильность, безвредность, специфичность, активность.