Инструкция к выполнению практической работы № 52 (17) по теме: «Обмен липидов. Определение количества β – и пре –β – липопротеинов в сыворотке крови по Бурштейну и Самаю».

Цели занятия:

1. Закрепить теоретические и практические знания по теме: «Химия и обмен липидов»

2.Провести биохимическое исследование – определение количества ЛПНП в сыворотке крови.

Исходный уровень знаний и умений

Учащийся должен знать:

1.Анаболитические и катаболические процессы липидного обмена.

2. Роль лабораторной диагностики в исследовании липидного обмена пациента.

3.Строение, состав и характеристика липопротеидов.

4. Классификация типов отклонения липидного обмена от нормы.

5. Технику приготовления растворов и реактивов.

6. Технику проведения всех этапов биохимического анализа.

7.Понятие о контроле качества лабораторных исследований.

8. Технику работы на ФЭКе.

9. Меры предосторожности в работе с реактивами, биологическим материалом, оборудованием.

Учащийся должен уметь:

1. Работать с пипетками, дозатором.

3. Работать на ФЭКе.

4. Провести биохимическое исследование по предложенной методике.

5. Дать начальную интерпретацию полученным результатам исследования.

Структура занятия.

1. Теоретическая часть.

1. Повторение и углубление теоретических и практических знаний по теме: «Химия и обмен липидов».

Большинство липидов обнаруживается в крови не в свободном состоянии, а в составе белково-липидных комплексов, представленных в частности, хиломикронами, α - , β- липопротеидами, для разделения которых могут быть с успехом использованы, например, методы электрофореза. Фракции липопротеидов отличаются молекулярным весом и процентным содержанием отдельных липидных компонентов. Для α – липопротеидов (ЛПВП), содержащих большое количество белка, характерен более высокий удельный вес. Для β - липопротеидов (ЛПНП) и пре – β – липопротеидов (ЛПОНП) характерно значительное содержание липидов, удельный вес их значительно низкий, поэтому становится возможным разделение упомянутых липопротеидных фракций различными методами.

Среди множества методов гораздо большее применение нашли химические методы определения концентрации липопротеидов. Большинство из них основывается на образовании гепарин-липопротеинового комплекса в присутствии некоторых электролитов ( например, хлорид кальция) – проба Бурштейна и Самай, 1956 г. В настоящее время метод является унифицированным. Он служит для определения β – липопротеидов.

Пре – β – ЛП (ЛПОНП) – удельный вес – 1,01 – 0,95; Молекулярный вес – 3 млн – 128 млн; белок – 7 –10%; липиды – 90 –93%, из них ТАГ – 56%, холестерин – 15%

2. Указания к занятию. Методика рекомендаций.

2.1 Внимательно изучить инструкцию.

2.2. Приготовьте рабочее место к проведению биохимического анализа.

2.3. Осмыслите ход выполнения лабораторной работы.

2.4.Обратите внимание на примечание к выполнению анализа.

2.5.Соблюдайте меры предосторожности в работе с реактивами, биологическим материалом, приборами.

2.6.Соблюдайте дезрежим в работе.