Задания и ориентировочные основы действий

Изучить и зарисовать следующие препараты:

Препарат № 133а – Гистосрез красного костного мозга.

Окраска гемотоксилин и эозин.

Получите изображение препарата на «малом» увеличении. В поле зрения найдите ярко-красные неправильной формы «балки» костной ткани. Между костными «балками» располагается светло-фиолетовая или красноватая зернистая ткань красного костного мозга и прослойки соединительной ткани.

Переведите микроскоп на «большое увеличение». На «большом увеличении» найдите клетки миелопоэза, находящиеся на различных этапах дифференцировки. Наиболее достоверно вы можете идентифицировать мегакариоциты, для которых характерны относительно большие размеры, крупное «комковатое» ядро. Работая микровинтом микроскопа, чтобы видеть препарат на всю его толщину, найдите ретикулярные клетки, имеющие светлые, крупные ядра. Найдите жировые клетки, которые видны как оптически пустые, округлой формы «дырки». Оптическая пустота жировых клеток обусловлена тем, что в процессе приготовления препарата липиды растворяются и вымываются из клетки. Найдите элементы сосудистого бассейна красного костного мозга: в соединительно-тканных прослойках - артерии различного диаметра, в ретикулярной ткани - синусоидные капилляры. Артерии, как правило, мелкого калибра порезаны поперечно и видны как кольцевые образования с характерными признаками сосудистой стенки. Синусоидные капилляры просматриваются хорошо на фоне фиолетовой или красноватой зернистой ткани красного костного мозга как небольшие образования округлой формы, заполненные эритроцитарной массой розового цвета – зрелые эритроциты и зрелыми лейкоцитами, в лейкоцитах просматриваются ядра. Таким образом, отчетливо виден факт экстраваскулярного кроветворения. Найдите мегакариоцит, контактирующий с синусоидным капилляром. Клетки компартментов и ростков класса дифференцирующихся в срезе дифференцировать трудно. Их идентифицируют в мазке красного костного мозга.

Определить, зарисовать и обозначите: 1. Костные «балки», 2. Строма: 2а) соединительно-тканные прослойки; 2 в) артерии, вены; 3. Красный костный мозг: 3а) Ретикулярные клетки; 3б) Жировые клетки; 3в) Клетки гемопоэза. 3г) мегакариоциты. 4. Синусоидный каппиляр. 4а) зрелые эритроциты и лейкоциты .

Препарат № 133. Мазок красного костного мозга.

Окраска по Романовскому-Гимза.

Материал для получения мазка красного костного мозга добывается пункцией из губчатых костей, чаще всего грудины. Прокол грудины проводится специальной иглой Кассирского, через которую шприцем аспирируется небольшое количество красного костного мозга. Из полученного пунктата готовят мазок, таким образом, как это было описано при приготовлении мазка крови.

При большом увеличении по определенным характерным признакам строения дифференцируйте клетки, находящиеся на разных стадиях развития. Для правильной диагностики клеток воспользуйтесь микрофотографиями и рисунками мазка красного костного мозга.

Определить:1) стволовые, 2. предшественники (полустволовые, унипотентные клетки); 2) бласты; 3) промегакариоцит; 4) мегакариоцит; Клетки эритроцитарного ростка:5) прозритроцит; 6) проэритроцит базофильный; 7) прозритроцит полихроматофильный; 8) оксифильный проэритроцит; 9) ретикулоцит; 10) эритроцит. Клетки миелоцитарного ростка:11) промиелоциты а) базофильный, б) эозинофильный, в) нейтрофильный; 12) миелоциты а) базофильный, 60 эозинофильный, в) нейтрофильный; 13) метамиелоциты а) базофильный, б) эозинофильный, в) нейтрофильный; 14) палочкоядерные :а) базофильный, б) эозинофильный, в) нейтрофильный. Зрелые клетки:15) сегментоядерные а) базофильный, б) эозинофильный, в) нейтрофильный. Моноцитарный росток:16) промоноцит; 17) моноцит. Зарисовать схему гемопоэза.

Препарат № 130 - Лимфатический узел.

Окраска гемотоксилин и эозин.

Получите изображение препарата на «малом» увеличении. Найдите капсулу лимфатического узла, оцените ее толщину, плотность. Найдите трабекулы, отходящие от капсулы. В некоторых участках капсулы между соединительными волокнами можно обнаружить жировые клетки. Снаружи от капсулы располагается жировая клетчатка и лимфатические приносящие сосуды. По капсулой найдите округлые, либо овальные вторичные лимфатические узелки (сиреневого цвета), в которых отлично видны светлые реактивные центры (лимфобласты) и более темная периферия (зрелые лимфоциты). Лимфоидные фолликулы (вторичные узелки) формируют корковое вещество.

Обратите внимание на отходящие от вторичных узелков анастомозирующие мякотные шнуры (также сиреневого цвета). Форма их разнообразная. Они входят в состав мозгового вещества. Между капсулой и вторичными узелками, между вторичными узелками, а также между мякотными шнурами просматриваются более светло окрашенные участки – это синус, они заполнены лимфой. По месту расположения их определите: краевой, промежуточный корковый, промежуточный мозговой, центральный синусы.

Определите границу коркового и мозгового вещества. В этой части расположена тимус зависимоя зона, где дифференцируются Т-лимфоциты.

На большом увеличении определите светлые, крупные ядра ретикулярных клеток, и мелкие, темно-фиолетовые ядра зрелых малых лимфоцитов. В реактивных центрах обратите внимание на более крупные светлые лимфобласты.

Определить, зарисовать и обозначить: I. Капсула: 1) соединительная ткань, 2) жировые клетки, 3) миоциты. II. Трабекула: 4) соединительная ткань.4а) кровеносные сосуды 5) Корковое вещество. 1. Вторичный лимфатический узелок: 1а) реактивный центр, дифференцирующиеся лимфоциты, 1б) зрелые лимфоциты, 1в) ядра ретикулярных клеток. 2 краевой синус. а) ретикулярные клетки, б) лимфоциты. 3. Промежуточный корковый синус. III. Мозговое вещество: 4. Мякотные шнуры. 5. Промежуточный мозговой синус. 6. Центральный (воротный) синус.

Препарат № 132 – Селезенка кошки.

Окраска гематоксилин и эозин.

При малом увеличении изучить серозную оболочку, в соединительной ткани которой определить миоциты и элементы соединительной ткани. Найти, отходящие в глубь селезёнки, соединительно-тканные трабекулы, а в них трабекулярные артерии и вены безмышечного типа. Трабекулярные вены лишены мышечного слоя, а тонкая соединительнотканная оболочка их срастается с тканью трабекул, поэтому они имеют вид щелей, выстланных эндотелием. В отличие от вен в трабекулярных артериях хорошо выражен средний слой, состоящий из миоцитов. Оболочка трабекулярных артерий розового цвета, чётко выделяется на фоне соединительной ткани трабекул.

Определить селезеночные тельца - белую пульпу селезёнки. Обратить внимание, что селезеночные тельца располагаются хаотично, по всей толще селезенки. В селезеночных тельцах (Мальпигиевые тельца или лимфоидные фолликулы) проходят центральные артерии, которые часто расположены эксцентрично. Реактивный центр фолликула выделяется более светлой окраской. Между селезеночными тельцами располагаются синусы - красная пульпа, имеющая красный цвет из-за присутствия эритроцитов. Красная пульпа обильно кровоснабжается, однако пульпарные сосуды её на препарате различить трудно из-за большого количества различных клеток крови, среди которых преобладают эритроциты.

Определить, зарисовать и обозначить: 1. Капсула: 1а) соединительная ткань, 1б) миоциты, 1в) мезотелий. 2. Трабекула: 2а) соединительная ткань,2б) миоциты, 2в) трабекулярная артерия. 2г). трабекулярная вена. 3. Белая пульпа (селезёночное тельце): 3а) центральная артерия. 3б) реактивный центр. 4).Красная пульпа.

Демонстрационные препараты:

Препарат № 134, 168 – Солитарный фолликул в слизистой оболочке кишки

Окраска гематоксилин и эозин.

На малом увеличении в слизистой оболочке стенки толстой кишки определите солитарный фолликул. Структура округлой формы, фиолетового цвета.

Определить, зарисовать обозначить: 1. Солитарный фолликул. 2. Лимфоциты. 3 Ядра ретикулярных клеток – более светлые и крупные.

Препарат № 131 – Накопление краски в лимфатическом узле.

Окраска титановый синий, квасцовый кармин.

Препарат № 83 – Ретикулиновая строма лимфатического узла.

Окраска азотнокислым серебром по Гомори с докраской гематоксилином.

Препарат окрашен по специальной методике, позволяющей избирательно окрашивать в том или ином органе ретикулиновые волокна. В данном случае, препарат позволяет увидеть элементы стромы лимфатического узла - ретикулиновые волокна.

Получите изображение препарата на "малом" увеличении. В поле зрения Вы видите обилие ретикулиновых волокон, окрашенных в черный цвет солями серебра. Разберитесь в том, что Вы видите. Кроме лимфатического узла здесь присутствуют скопления рыхлой волокнистой соединительной ткани и крупные кровеносные сосуды. Найдите лимфатический узел с характерным рисунком капсулы, вторичных узелков и мякотных шнуров. Поставьте в центр поля зрения один из вторичных узелков и переведите микроскоп на "большое" увеличение. В поле зрения отчетливо видны ретикулярные волокна черного цвета. В петлях ретикулиновых волокон располагаются лимфоциты. Сравните плотность волокон во вторичных узелках и синусах.

Изучить микрофотографии и электроннограммы.

1. Синусоид красного костного мозга; стволовые кроветворные клетки.

2. Синус лимфатического узла; береговая клетка;

3. Венулы из мякотного тяжа лимфатического узла.