2.4 Патологоанатомические признаки

Слизистые обо­лочки желудка и кишечника красного цвета. Кровь плохо свернувшаяся, по ходу кровеносных сосудов имеются множественные точечные кровоизлияния. Содержимое желудка издает запах горького миндаля. Легкие отечны, ярко-розового цвета.

2.5 Методы определения цианидов в патологическом материале

Извлечение синильной кислоты. Выделение синильной кислоты из исследуемого материала проводят перегонкой с водяным паром. 100-150 г измельченного патологического материала (взятого в те­чение 23 ч после смерти животного) смешивают с дистиллиро­ванной водой до консистенции жидкой кашицы, подкисляют 10%-ным раствором винной кислоты (С₆Н₆О₆) и переносят в круглодонную колбу. Затем колбу присоединяют к холодильнику. От­дельно нагревают до кипения парообразователь и, когда весь прибор собран, присоединяют парообразователь и начинают подогревать баню под колбой. Перегонку следует вести медленно. Полученный дистиллят исследуют.

2.5.1 Качественные реакции на цианиды

1. Реакция образования берлинской лазури: Из приемника берут 2-4 мл дистиллята, к нему добавляют 10%-ный раствор едкого натра до получения щелочной реакции (1-2 капли), за­тем прибавляют по 3 капли свежеприготовленных 5%-ных растворов сульфата закисного железа (FeSO₄) и хлорида окисного железа (FeCl₃), тщательно взбал­тывают и подкисляют соляной кислотой (1:3) – 4-6 капель. В зависимости от количества синильной кислоты появляется синий осадок или окрашивание синее, сине-зеленое. При очень малых количествах синильной ки­слоты окрашивание может появиться спустя 2448 ча­сов. Ход реакции можно представить следующим образом:

HCN + NaOH ↔ Н₂О + NaCN;

2NaCN+FeSO₄ ↔ Fe(CN)₂+Na₂S0₄;

Fe(CN)₂ + 4NaCN → Na₄[Fe(CN)₆];

3Na₄[Fe(CN)₆] + 4FeCl₃ → Fe₄ [Fe(CN)₆]₃ + 12NaCl.

2. Реакция с нитратом серебра. В колбочку помещают 10-15 мл полученного дистиллята (или со­держимого желудка) и туда же добавляют 3-5 мл 10%-ного раствора винной кислоты, иногда можно за­менить щавелевой кислотой (H₂C₂O₄·2H₂O). Колбочку закрывают часовым стеклом, на нижнюю поверхность которого наносят висячую каплю 2%-ного раствора ни­трата серебра (AgNO₃). При наличии синильной кислоты капля на часовом стекле мутнеет от образования и вы­падения нерастворимого цианистого серебра. Под ми­кроскопом можно увидеть спутанные, разной величины, тончайшие иглы цианистого серебра.

3. Проба с пикратной бумажкой. Фильтровальную бумажку пропитывают 1%-ным раствором пикрино­вой кислоты и высушивают при комнатной температуре, после чего смачивают 10%-ным раствором гидрокарбо­ната натрия (NaHCO₃) и вновь высушивают.

Определение производят следующим образом. В кол­бочку помещают 10-15 мл полученного дистиллята или содержимого желудка, добавляют 2-3 мл 10%-ного раствора винной кислоты и туда же немедля подвеши­вают пикратную бумажку. Колбочку закрывают пробкой или часовым стеклом. При наличии синильной кислоты через 10-15 минут пикратная бумажка заметно меняет окраску из золотисто-желтой в красно-оранжевую. В присутствии большого количества альдегидов, серо­водорода, ацетона реакция неприменима, так как эти вещества также окрашивают реактивную бумажку в красный цвет.

4. Проба с бензидиновой бумажкой. Полоску фильтровальной бумаги, пропитанной свежим 0,25 %-ным раствором бензидина (NH₂C₂H₄ · С₆Н₄ · NH₂), в смеси (1:1) с 0,5%-ным раствором сульфата меди (CuSO₄), подвешивают в колбочку, в которую помещен исследуе­мый объект, подкисленный винной кислотой. Колбочку закрывают пробкой или часовым стеклом. При наличии синильной кислоты бензидиновая бумажка синеет.

5. Проба с полисульфидом аммония – (NH₄)₂S₂. В фарфоровую чашечку помещают 5-10 мл полученного дистиллята, прибавляют 5-7 капель 5%-ного раствора полисульфида аммония, 3-5 капель 10%-ного раствора едкого натра и осторожно выпари­вают на водяной бане досуха. Полученный остаток после охлаждения подкисляют 10%-ным раствором азотной кислоты и затем добавляют 1 каплю 20%-ного раствора хлорида окисного железа. При наличии цианидов раствор приобретает кроваво-красную окраску. Ход реакции можно представить следующим образом:

NaCN + (NH₄)₂S₂ → NаSCN + (NН₄)₂S;

3NaSCN + FeCl₃ → Fe(SCN)₃ + 3NaCl.