29. Требования к продуцентам белка.

1) Минимальное время генерации;2)Способность накапливать белок до 40-70%;3) Максимально усваивать питательные вещества среды;4)быть непотогенным и не выделять в среду токсические вещества, метаболиты;5)иметь высокую устойчивость и выживаемость при не стерильных условиях выращивания;6)легко отделятся от жидкой фазы при сепарировании и флотировании; БОО( белки одноклеточных организмов)- исп-ся в качестве белкового обогатителя для кормов животных; для человека служит белковым наполнителем; заменяет животные белки в рационе питания.

30.Использование метода тонкослойной хромотографии для разделения липидов.

В зависимости от природной неподвижной фазы тонкослойной хромотографии, хромотография может быть адсорбционной, распределительной, Молекулярно-ситовой и осадочной. Адсорбционная тонкослойная хромотография основана на различии в сродстве компонентов смеси к неподвижной фазе (сорбент) осуществляющего в результате перемещения подвижной фазы (элюента) под действием капиллярных сил по слою сорбента толщиной 0,1-0,5мм нанесенного на пластину. Хромотог проводит в закрытой камере, чтобы избежать испарение элюента. В зависимости от направления перемещения элюента по пластинке различают нисходящую, горизонтальную и восходящую. Используют готовые пластины типа сорбифол, силюфол. Для проведения анализа используют 1% испытуемые в-ва или смеси в-в в легколетучем растворителе. Хромотогр пластинку размельчают. На линию старта наносят 0,05мл испытуемого в-ва или смеси в-в. Если наносят несколько в-в, то расстояние между пробами должно составлять 1см. Пластинку с нанесенными пробами помещают в камеру с элюентом, с момента погружения возникает фронт смачивания, кот перемещается вверх по слою сорбента. При этом перемещаются исслед-ые в-ва, со скоростью зависящей от их коэффициента адсорбции. Когда фронт смачивания достигнет верхней границы хромотограф разделение заканчивается. В-ва, имеющие окраску обнаруживаются в виде отдельных пятен на хромотограмме. Если хромотография бесцветного в-ва, то их обнаруживают после спец-ой обработки. Положения пятна характеризуются Rf. Rf=расстояние пройденное в-вом от линии старта/расстояние пройденное элюентом от линии старта. Значение Rf зависит: 1)от степени родства, хромотографируемого органического соединения к сорбенту, 2)свойствами самого сорбента, 3)природой элюента. Идентификация нейтральных липидов: 1)элюент – петролейный эфир – этиловый эфир, укс-ая к-та, соотношение 80:20:1, 2) в качестве маркеров использ стеариновая к-та (15 капель) и оливковое масло (2 кап), 3)пластинку подсушиваем при комнатной темпер несколько минут и затем проносим через 20% р-р сульфата аммония. Далее помещаем в сушильный шкаф при темпер 160-180 на 5-15мин. Липиды образуют темные пятна. Далее определяют Rf и по таблице проводим идентификацию липидов. Идентификация фосфо и глико липидов (полярные липиды): 1)элюент – хлороформ, этанол, вода, 65:25:4, 2)маркер – лецитин 2 кап, 3)пластинку подсушиваем при комнатной темпер несколько минут, затем помещаем в камеру с парами йода, липиды образуют темные пятна на желтом фоне. Посчитываем Rf и проводим идентификацию.