- •Медицинская микробиология, вирусология, иммунология
- •Раздел 1 Общий курс
- •Принятые сокращения и условные обозначения
- •Уважаемые студенты, внимательно прочитайте:
- •Правила техники безопасности
- •Правила поведения в микробиологической лаборатории
- •Правила работы с исследуемым материалом
- •За несоблюдение правил техники безопасности студент отстраняется от занятия
- •Правила организации и оборудования микробиологической лаборатории. Морфология эукариотов (грибы, простейшие)
- •Структура бактериологической лаборатории
- •Оборудование рабочего места На рабочем столе должно быть все необходимое для работы:
- •Морфологические особенности грибов
- •Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы
- •Световой микроскоп состоит из частей:
- •Системы микроскопии
- •Морфология грибов и методы их изучения
- •Методы изучения
- •Структурные компоненты бактериальной клетки и их функции:
- •Морфология прокариот
- •Техника приготовления препаратов
- •3. Фиксация
- •4. Окраска
- •2 Этап. Обработка этанолом (дифференциация)
- •3 Этап. Окраска фуксином
- •Методы, используемые для изучения нативных препаратов
- •Методы выявления спирохет (трепонем, боррелий, лептоспир)
- •Методы выявления микоплазм
- •Методы выявления хламидий
- •Методы выявления риккетсий
Методы выявления спирохет (трепонем, боррелий, лептоспир)
Оболочка спирохет тонкая, эластичная, содержит большое количество липопротеидов до 70 80% и тонкий фрагментированный слой пептидогликана. Обычными методами трепонемы не окрашиваются, так как при фиксации спиртом оболочка легко разрушается и клетка не в состоянии удерживать красители. Спирохеты так же как и простейшие, плохо окрашиваются: анилиновыми красителями. Для их дифференцирования применяют краску Романовского-Гимзы. Лучше окрашиваются боррелии (в синий цвет), хуже лептоспиры (розовый), еще хуже трепонемы (слабо - розовый). Кроме того, бледная трепонема покрыта мукополисахаридным чехлом, на переднем конце которой под клеточной стенкой имеется скопление протеолитических ферментов, с их помощью она способна активно внедряться в цитоплазму и даже ядро клеток организма хозяина.
Бледная трепонема покрыта мукополисахаридным чехлом, на переднем конце бледно трепонемы под клеточной стенкой имеется скопление протеолитических ферментов, с помощью которых она способна активно внедряться в цитоплазму и даже в ядро клеток организма хозяина
Теоретическая справка
к Работе № 3
Методы выявления микоплазм
Микоплазмы – это прокариоты малых размеров, имеют только цитоплазматическую мембрану и не способны синтезировать пептидогликан. Это полиморфные микроорганизмы, по форме представляют собой сферические или грушевидные структуры, а также разветвленные или спиральные нити, как правило, неподвижны. Клетки микоплазм, в отличие от других прокариот, не имеют клеточной стенки, окружены ЦПМ. Снаружи ЦПМ находится капсулоподобный слой. Морфологию микоплазм изучают в живом состоянии в фазово-контрастном микроскопе и путем электронной микроскопии ультратонких срезов их клеток. По Граму окрашиваются медленно, грамотрицательны.
Теоретическая справка
к Работе № 4
Хламидии. (Морфология, жизненный цикл хламидий).
Хламидии - мелкие, чувствительные к антибиотикам бактерии диаметром около 0,2-1,5 мкм, которые развиваются только внутри живых клеток («облигатные внутриклеточные паразиты») н вызывают широкий спектр патологических процессов у человека н животных. Естественный цикл развития хламидий проходит в цитоплазматических включениях живых клеток (элементарное тельце - ретикулярное тельце — ретикулярные тельца - промежуточные тельца -элементарные тельца) и продолжается от двух до трех суток. Завершив цикл размножения, хламидии разрушают цитоплазматические включения, выходят из клетки-хозяина во внешнюю среду и заражают новые клетки.
По современной классификации хламидии относят к роду Chlamidia семейства Chlamidiaceae порядка Chlamidiales. Вид С. trachomatis - возбудитель антропонозных хламидийных инфекций, первично поражающих слизистые оболочки (трахома, урогенитальный хламидиоз, венерическая лимфогранулема); это - один из самых распространенных и наиболее актуальных возбудителей заболеваний, передаваемых половым путем ().
В 9-м издании «Определителя бактерий Берджи» (1989), у С. trachomatis выделены 3 биовара: 1) трахомы, 2) венерической лимфогранулемы, 3) мышиной пневмонии. А. А Шаткий (1982) в составе С. trachomatis предложил выделить 3 группы возбудителей с разделением их на иммунотипы:
эндемической трахомы (иммунотипы А, В, Ва, С);
урогенитального хламидиоза (D, E, F, О, Н, I, К);
венерической лимфогранулемы (L2, L2, L3).
На поверхности хламидий имеется несколько антигенов, определяющих специфическую активность возбудителей в различных серологических реакциях:
1) группоспецифический антиген - термостабильный полисахарид, общий для хламидий всех типов; этот антиген выявляется на всех стадиях жизненного цикла микроорганизмов,
2) видоспецифические антигены - термолабильные белки, также присутствующие на всех этапах развития хламидий; по этим антигенам можно дифференцировать С. trachomatis от С. psittaci; 3) типоспецифические антигены -термолабильные протеины, позволяющие идентифицировать различные серовары возбудителей трахомы от венерической лимфогранулемы.
Возбудитель венерической лимфогранулемы имеет биологическое отличие от возбудителей других урогенитальных хламидиозов. Он имеет выраженный тропизм к лимфоидной ткани и встречается в Юго-Восточной Азия.