- •Работа № 5. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)
- •Алгоритм выделения чистых культур аэробных микроорганизмов
- •3 Этап
- •4 Этап
- •Самостоятельная работа во внеурочное время
- •1) Что изображено на схеме?
- •1 2 3 4
- •2) Заполнить таблицу по основным знаниям физиологии микроорганизмов
- •Питательные среды и их состав
- •Дифференциально-диагностические среды
- •1. Питательные среды для культивирования и изучения биохимических свойств
- •2.2. Среды для изучения протеолитических свойств
- •Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
- •Метод Дригальского
- •1 2 3 1 2
- •Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
Самостоятельная работа во внеурочное время
Ответьте на следующие вопросы:
1) Что изображено на схеме?
1-
2-
3-
4-
1 2 3 4
Охарактеризовать все фазы процесса
2) Заполнить таблицу по основным знаниям физиологии микроорганизмов
Микроорганизмы |
Тип питания, паразитизм |
Тип дыхания |
Пример питательной среды |
Кишечные палочки |
|
|
|
Стафилококки |
|
|
|
Вибрионы |
|
|
|
Подпись преподавателя______________________________________________________________
Теоретическая справка
к работе № 1
Для культивирования бактерий применяют питательные среды. Они могут быть естественными (молоко, морковь, картофель), искусственными (готовят специально). Питательные среды могут быть жидкие и плотные. В зависимости от свойств микробов используют разные среды. Их делят на 3 группы:
1) простые (универсальные) - на них растут только нетребовательные микробы (стафилококки, кишечная палочка). Это МПА и МПБ - мясопептонный агар и бульон.
2) элективные (избирательные) - на них растет только один вид микробов, а другие – нет. Например: 1% щелочная пептонная вода - для холерного вибриона, сахарный агар - для стрептококка, кровяно-теллуритовый агар - для дифтерийной палочки и т.д.
3) дифференциально-диагностические - для отличия одного вида от другого по биохимической активности (среды Эндо, Гисса и т.д).
Требования к питательным средам:
- питательность,
- изотоничность,
- буферность, оптимальная рН - 7.2 – 7.4
- стерильность,
- влажность,
- унифицированность в отношении основных компонентов
Питательные среды и их состав
Кровяной агар. Используют для выявления экзотоксина – гемолизина у бактерий. К расплавленному и охлажденному до 45°С МПА (2% агара) стерильно добавляют 5-10% дефибринированной стерильно взятой крови лошади, кролика или барана.
Щелочная пептонная вода. Используют для культивирования холерных вибрионов. Основной раствор пептона: пептона - 100 г, хлорида натрия -50 г, нитрата калия - 1 г, карбоната натрия - 25 г, воды дистиллированной - 1 л; рН 9,0. Стерилизуют при 120°С 20 мин. Для получения пептонной воды основной раствор разводят водой в 10 раз, доводят рН до 8,8 -8,9, стерилизуют.
Мясопептонный агар (МПА). Применяют для выращивания большинства бактерий. К готовому МПБ добавляют 2% агар и оставляют для набухания 30 мин. Кипятят до полного растворения агара. Стерилизуют 30 мин при 120°С.
Желточно - солевой агар (ЖСА). Среда содержит повышенные концентрации хлорида натрия (8-10%), которые не препятствуют размножению стафилококков, что обеспечивает элективность среды. Готовят среду из питательного солевого агара. В расплавленный и остуженный до 45 0С агар добавляется куриный желток.
Среда 199. Используют для выращивания культур клеток. Синтетическая среда, содержащая аминокислоты, витамины, глюкозу, минеральные соли. Среду используют с добавлением 5-10% коровьей или лошадиной сыворотки.