- •Занятие 3.
- •1.1 Потоки углерода и энергии при гетеротрофном росте микробов и образовании продукта:
- •1.2 Сродство к субстрату и рост микроорганизмов.
- •1.3 Стабильность культуры и предъявляемые требования.
- •1.4 Создание высокоактивных продуцентов.
- •2. Технологические факторы.
- •2.1 Классификация биореакторов и расчет их производительности.
- •2.2 Принципы действия и конструкции биореакторов.
- •2.3 Лабораторные, пилотные и промышленные биореакторы: проблемы масштабирования.
- •Занятие 3.
- •Вариант 1.
- •Занятие 3.
- •Вариант 2.
1.1 Потоки углерода и энергии при гетеротрофном росте микробов и образовании продукта:
Источник углерода и энергии
Микробная биомасса
Энергия Поддерживание жизнедеятельности Продукты
Условные обозначения:
Поток углерода
Поток энергии
Для роста любого микроорганизма необходимы источники углерода и энергии.
В случае гетеротрофных микроорганизмов (гетеротрофы – это организмы, использующие в качестве источника углерода экзогенные органические вещества, которые одновременно для них служат источниками энергии) это одно соединение или смесь углеродсодержащих соединений, которые удовлетворяют обе эти потребности.
У автотрофных микроорганизмов (автоторофы – организмы, использующие для построения своего тела углекислый газ в качестве единственного источника углерода и обладающие системой ферментов для ассимиляции углекислого газа, и способные синтезировать все компоненты клетки) углеродные и энергетические субстраты различаются.
Для гетеротрофных микроорганизмов коэффициент выхода продукта зависит от распределения энергии и углерода между процессами анаболизма и катаболизма. Коэффициенты выходов зависят от природы источника углерода и энергии, а также от биохимических особенностей микроорганизма; коэффициенты выхода зависят также и от концентрации источников углерода и энергии.
Избыточная энергия, высвобождаемая при ее использовании, рассеивается в виде тепла и приводит к необходимости охлаждения реакторов.
Скорость потребления определенного субстрата растущими культурами часто представляется в виде:
- ds/dt = qx (*), где
q - метаболический коэффициент, который очень широко используется в микробиологии.
*® (1) - dx/ds = q =
1.2 Сродство к субстрату и рост микроорганизмов.
Одним из важных микробиологических факторов, влияющих на процесс биосинтеза биологически активных веществ, является сродство к субстрату.
При анализе роста культур в биотехнологических процессах необходимо учитывать:
остаточную концентрацию питательных веществ (субстратов);
конкурентоспособность микроорганизмов;
особенности их роста на сжиженных углеродных энергетических субстратах
Первый из этих факторов имеет два важных аспекта. Один из них экономический, связанный с полнотой использования субстрата; второй касается качества продукта, его чистоты и нетоксичности, поскольку остатки субстрата попадают в конечный продукт. Полнота использования субстрата, который является лимитирующим в периодической или непрерывной культуре, определяется сродством к нему данных микроорганизмов.
1.3 Стабильность культуры и предъявляемые требования.
Еще одним немаловажным фактором процесса биосинтеза является стабильность его культуры.
Пригодность выбранной культуры для использования ее в промышленном микробиологическом процессе часто не оценивается и становится критическим фактором, когда дело доходит до практического ее применения. Самое главное – это генетическая стабильность культуры.
Теплопередача и перенос веществ в биореакторах увеличиваются за счет диссипации энергии в системе обычно в результате интенсивного механического перемешивания содержимого реактора вращающимися мешалками. Такие мешалки оказывают двоякое действие: с одной стороны способствуют диспергированию мелких пузырьков воздуха в толще культуральной среды и обеспечивают перемешивание, необходимое для минимизации концентрационных градиентов, эффективного охлаждения реактора и уменьшения выделения пузырьков воздуха, а с другой стороны возникающие при таком перемешивании гидродинамические силы могут повреждать клетки.
Образование специфического продукта может зависеть также от морфологии плесневого гриба. Непригодны для использования в промышленности те штаммы, морфология которых значительно изменяется при изменении условий культивирования.
Ранее считалось, что вероятность повреждений бактериальных клеток определяется скорость вращения лопастей мешалки. Однако, согласно наиболее правдоподобной современной гипотезе о механизме повреждений, они обусловлены кавитационными явлениями в вихрях, возникающих сразу за лопастями мешалок, но окончательно вопрос о повреждении бактериальных клеток в интенсивно перемешиваемых культурах все еще не решен.
Еще среди плесневых грибов и бактерий, вероятно, можно отобрать выносливые микроорганизмы, более или менее пригодные для использования их в условиях, характерных для интенсивных процессов, то культуры тканей, в частности культуры клеток млекопитающих, нуждаются в особых биореакторах, конструкция которых учитывает присущую этим клеткам хрупкость. Наиболее пригодны для использования в промышленности микроорганизмов с широкими диапазонами оптимумов рН, концентрации растворенного кислорода и температуры. Частично эти трудности позволяют обойти техническое усовершенствование установок и улучшения контроля за условиями в них.