Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Gosudarstvennaya_farmakopeya_RB

.pdf
Скачиваний:
121
Добавлен:
05.02.2016
Размер:
12.09 Mб
Скачать

обесцвечивания раствора. Доводят объем в каждой пробирке до 10 мл водой Р (нейтрализованные гидролизаты).

Во вторую серию градуированных пробирок объемом 10 мл вносят 1 мл

каждого нейтрализованного гидролизата. В каждую пробирку добавляют 1 мл ацетилацетонового реактива (смесь, приготавливаемая непосредственно перед

использованием – 1 объем ацетилацетона Р и 50 объемов раствора 53г/л натрия карбоната безводного Р). Закрывают пробирки пробками и помещают на водяную баню при температуре 90 C на 45 мин. Охлаждают до комнатной температуры. В

каждую пробирку добавляют 2,5 мл спирта Р и 1,0 мл раствора диметиламинобензальдегида (приготавлитвают непосредственно перед

использованием: растворяют 0,8 г диметиламинобензальдегида Р в 15 мл спирта Р, добавляют 15 мл кислоты хлористоводородной Р) и доводят объем в каждой пробирке до 10 мл спиртом Р. Пробирки закрывают, содержимое перемешивают

переворачивая пробирки и оставляют в темном месте на 90 мин. Измеряют оптическую плотность (2.2.25) каждого раствора при длине волны 530 нм, используя

контрольную пробу в качестве раствора сравнения. Строят градуировочный график на основании оптических плотностей для 4 стандартных растворов и

соответствующего содержания гексозамина и определяют значение количества

гексозамина в исследуемом растворе.

2.5.21. МЕТИЛПЕНТОЗЫ В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Исследуемый раствор. Для приготовления раствора, содержащего около 5 мг/мл сухого полисахарида используют мерную колбу необходимого объема.

Содержимое контейнера количественно переносят в колбу и разводят до

необходимого объема водой Р. Раствор разводят таким образом, чтобы объемы,

предназначенные для тестирования, содержали от 2 мкг до 20 мкг рамнозы (метилпентозы). В три пробирки помещают 0,25 мл, 0,50 мл и 1,0 мл разведенного

раствора.

Стандартные растворы. Разводят 0,100г рамнозы Р в 100мл воды Р

(основной раствор, содержащий 1г/л метилпентозы). Непосредственно перед использованием разводят 1 мл основного раствора до 50 мл водой Р (рабочая концентрация 20мг/л метилпентозы). В 5 пробирок помещают 0,10 мл, 0,25 мл, 0,50 мл, 0,75 мл и 1,0 мл рабочей концентрации.

Готовят контрольную пробу с использованием 1 мл воды Р

Объем в каждой пробирке доводят до 1 мл с использованием воды Р.

Пробирки помещают в ледяную воду, прибавляют по каплям с постоянным помешиванием по 4,5 мл охлажденной смеси, состоящей из одного объема воды Р и

6 объемов кислоты серной Р. Пробирки нагревают до комнатной температуры и

помещают на водяную баню на несколько минут. Охлаждают до комнатной

температуры. Добавляют в каждую пробирку 0,10 мл раствора 30 г/л цистеин гидрохлорида Р приготовленного непосредственно перед применением.

Взбалтывают и дают отстояться в течение 2 ч.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) каждого раствора при длине волны 396 нм и 430 нм, используя контрольную пробу в качестве раствора сравнения. Для каждого раствора рассчитывают разницу между оптической плотностью, измеренной

при длине волны 396 нм и оптической плотностью, измеренной при длине волны 430 нм. Строят градуировочный график на основании разницы оптических плотностей для 5 стандартных растворов и соответствующей концентрации метилпентозы, а

также строят график концентрации метилпентозы в исследуемом растворе для каждого тестируемого объема. Рассчитывают среднюю величину по трем значениям.

2.5.22. УРОНОВЫЕ КИСЛОТЫ В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Исследуемый раствор. Для приготовления раствора, содержащего около 5

мг/мл сухого полисахарида, используют мерную колбу необходимого объема.

Переносят содержимое контейнера в колбу и разводят до необходимого объема

водой Р. Раствор разводят таким образом, чтобы объемы, предназначенные для исследования, содержали от 4 мкг до 40 мкг глюкуроновой кислоты (уроновых кислот). В 3 пробирки помещают 0,25 мл, 0,50 мл и 1,0 мл разведенного раствора.

Стандартные растворы. Растворяют 50 мг натрия глюкуроната Р в 100 мл

воды Р (основной раствор, содержащий 0,4 г/л глюкуроновой кислоты).

Непосредственно перед использованием разводят 5 мл основного раствора до 50 мл, используя воду Р (рабочая концентрация глюкуроновой кислоты 40 мг/л). В 5 пробирок помещают 0,10 мл, 0,25 мл, 0,50 мл, 0,75 мл, и 1,0 мл рабочей

концентрации.

Готовят контрольную пробу, используя 1 мл воды Р.

Доводят объем в каждой пробирке до 1 мл водой Р. Помещают пробирки в ледяную воду и, постоянно помешивая, по каплям добавляют в каждую пробирку по 5,0 мл боратного раствора Р. Закрывают пробирки пробками и помещают на 15

мин на водяную баню. Охлаждают до комнатной температуры. В каждую пробирку добавляют 0,20 мл раствора 1,25 г/л карбазола Р в этаноле Р. Закрывают пробирки

пробками и помещают на 15 мин на водяную баню. Охлаждают до комнатной температуры. Измеряют оптическую плотность (2.2.25) каждого раствора при длине

волны 530 нм, используя контрольную пробу в качестве раствора сравнения. Строят градуировочный график оптических плотностей для 5 стандартных

растворов и соответствующих концентраций глюкуроновой кислоты, и определяют

концентрации глюкуроновой кислоты в исследуемом растворе для каждого

тестируемого объема. Рассчитывают среднюю величину по трем значениям.

2.5.23. СИАЛОВАЯ КИСЛОТА В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Исследуемый раствор. Содержимое одного или нескольких контейнеров количественно переносят в мерную колбу соответствующего объема. Чтобы получить раствор с концентрацией полисахарида около 250 мкг/мл, содержимое разводят до необходимого объема водой Р. 4,0 мл этого раствора переносят с помощью шприца в 10 мл ультрафильтрационную кювету, пропускающую молекулы с относительной молекулярной массой менее 50 000. Дважды промывают шприц

водой Р и промывную жидкость тоже переносят в ультрафильтрационную кювету.

Проводят ультрафильтрацию, постоянно перемешивая жидкость, в присутствии азота под давлением около 150 kПa. Наполняют кювету водой Р каждый раз, когда

объем жидкости в ней уменьшается до 1 мл до тех пор, пока не профильтруется 200

мл, а оставшийся объем в кювете не будет составлять 2 мл. Используя шприц,

переносят оставшуюся жидкость в 10 мл мерную колбу. Промывают кювету 3 раза по 2 мл водой Р каждый раз. Смывную жидкость сливают в колбу и доводят объем до

10 мл водой Р (испытуемый раствор). В каждую из двух опытных пробирок вносят 2,0 мл испытуемого раствора.

Стандартные растворы. Используют стандартные растворы, описанные в частной статье.

Готовят 2 серии из 3 пробирок. В пробирки каждой серии помещают 0,5 мл, 1,0 мл и 1,5 мл стандартного раствора, соответствующего типу вакцины, предназначенной для исследования, и корректируют водой Р объем в каждой

пробирке до 2-х мл. Готовят контрольную пробу, используя 2,0 мл воды Р в каждой из двух пробирок.

В каждую пробирку добавляют 5,0 мл резорцинового реактива Р. Нагревают при 105º С в течение 15 мин, охлаждают в холодной воде и переносят пробирки на баню с ледяной водой. Во все пробирки добавляют 5 мл спирта изоамилового Р и

тщательно перемешивают. Помещают в емкость с ледяной водой на 15 минут.

Центрифугируют пробирки и держат их в емкости с ледяной водой до проведения исследования методом абсорбционной спектрофотометрии. Измеряют оптическую

плотность (2.2.25) надосадочной жидкости при длинах волн 580 нм и 450 нм, используя спирт изоамиловый Р в качестве раствора сравнения. Для каждой длины

волны рассчитывают оптическую плотность как среднее значений, полученных в двух идентичных растворах. Вычитают среднее значение для контрольного раствора из средних значений, полученных для других растворов.

Строят график, отражающий разницу между оптической плотностью при длинах волн 580 нм и 450 нм стандартных растворов как функцию содержания N-

ацетилнейраминовой кислоты и определяют концентрации N-ацетилнейраминовой кислоты (сиаловой кислоты) в исследуемом растворе.

2.5.24. ДИОКСИД УГЛЕРОДА В ГАЗАХ

Диоксид углерода в газах определяется с помощью инфракрасного анализатора (Рисунок 2.5.24.-1).

Рисунок 2.5.24.-1.Инфракрасный анализатор

Инфракрасный анализатор включает в себя систему, генерирующую 2 идентичных инфракрасных пучка, состоящий из спиралей, электронагреваемых до

низкой температуры слабого каления и оснащенного рефлекторами. Один луч

проходит сквозь камеру, предназначенную для пробы, а другой сквозь референтную камеру. Камера для пробы получает поток исследуемого газа, а референтная

камера содержит азот Р1. Две камеры детектора заполнены диоксидом углерода Р1 и автоматически получают выборочное излучение. Поглощение излучения вызывает

нагревание и дифференциальное расширение газа в двух камерах, позволяет

исследовать поглощение части испускаемого излучения диоксидом углерода в

исследуемом газе. Разница давления между двумя камерами детектора приводит к

растяжению металлической диафрагмы, разделяющей их. Эта диафрагма является

частью конденсатора, емкость которого меняется по мере изменения давления,

которое само по себе зависит от содержания диоксида углерода в исследуемом газе. Поскольку инфракрасные лучи периодически блокируются вращающимся прерывателем, происходит частотное модулирование электрического сигнала.

2.5.25. ОКСИД УГЛЕРОДА В ГАЗАХ

МЕТОД I

Прибор. Прибор (Рисунок 2.5.25.-1) состоит из следующих частей, соединенных

последовательно:

Рисунок 2.5.25.-1.Прибор для определения угарного газа

Размеры представлены в миллиметрах

U-образная трубка (U1), содержащая безводный силикагель Р, пропитанный

триоксидом хрома Р,

Промывочная емкость (F1), содержащая 100 мл раствора 400 г/л калия гидроксида Р,

U- образная трубка (U2), содержащая шарики калия гидроксида Р,

U- образная трубка (U3), содержащая фосфора (V) оксид Р, распределенный на

предварительно гранулированную плавленную пензу,

U- образная трубка (U4), содержащая 30 г йода (V) оксида перекристаллизованного Р в гранулах, предварительно высушенного при температуре 200оC и поддерживаемого при температуре 120оC (T) во время теста. Пентоксид йода упакован в трубке в 1 см столбики, разделенные 1см столбиками стекловаты для

достижения эффективной длины 5 см,

реакторная трубка (F2) содержащая 2,0 мл раствора калия йодида Р и 0,15 мл

раствора крахмала Р.

Метод. 5,0 литров аргона Р пропускают через аппарат и при необходимости обесцвечивают голубой цвет йодного раствора, добавляя минимально необходимое

количество свежеприготовленного 0,002 М раствора натрия тиосульфата Р. Газ

продолжают пропускать до тех пор, пока после прохождения 5,0 литров аргона Р для обесцвечивания йодного раствора будет требоваться всего 0,045 мл 0,002 М

раствора натрия тиосульфата Р. Исследуемый газ, пропускают из цилиндра

через аппарат, учитывая предписанные в частной статье объем и скорость потока. Остатки выделившегося йода в реакторной пробирке извлекают, пропустив через

аппарат 1,0 литр аргона Р. Выделившийся йод титруют 0,002 М раствором натрия тиосульфата Р. Проводят контрольный опыт, используя одинаковый объем аргона Р. Разница между объемами 0,002 М раствора натрия тиосульфата,

использованного при титровании не должна превышать указанное в частной статье значение.

МЕТОД II

Моноксид углерода в газах может быть определен с помощью инфракрасного

анализатора (см. Рисунок 2.5.25.-2).

Рисунок 2.5.25.- 2. – Инфракрасный анализатор

Инфракрасный анализатор включает в себя систему, генерирующую 2

идентичных инфракрасных пучка, состоящую из спиралей, электронагреваемых до низкой температуры слабого каления и оснащенную рефлекторами. Один луч проходит сквозь камеру, предназначенную для пробы, а другой сквозь референтную камеру. Камера для пробы получает поток исследуемого газа, а референтная камера содержит азот Р1. Две камеры детектора заполнены оксидом углерода Р1 и автоматически получают выборочное излучение. Поглощение этого излучения

вызывает нагревание и дифференциальное расширение газа в двух камерах,

позволяя исследовать поглощение части испускаемого излучения оксидом углерода в газе. Разница давления между двумя камерами детектора приводит к растяжению

металлической диафрагмы, разделяющей их. Эта диафрагма является частью

конденсатора, емкость которого меняется по мере изменения давления, которое

само по себе зависит от содержания оксида углерода в исследуемом газе.

Поскольку инфракрасные лучи периодически блокируются вращающимся

прерывателем, происходит частотное модулирование электрического сигнала.

2.5.26. ОКСИД АЗОТА И ДИОКСИД АЗОТА В ГАЗАХ

Оксид азота и диоксид азота в газах определяется хемилюминесцентным анализатором (Рисунок 2.5.26.-1).

Рисунок 2.5.26.-1.Хемилюминесцентный анализатор

Конструкция аппарата представляет собой следующее:

-фильтр, проверяющий и контролирующий поток исследуемого газа;

-конвертер, преобразующий диоксид азота в оксид азота, для определения

суммарного содержания оксида азота и диоксида азота. Перед применением

необходимо проверить эффективность конвертера;

-озоновый генератор, контролирующий скорость потока; озон производится

высоковольтными электрическими разрядами через два электрода; в озоновый

генератор подается чистый кислород или безводный воздух окружающей среды, а

концентрация озона должна намного превышать максимальное содержание всех определяемых оксидов азота,

-камера, в которой взаимодействуют оксид азота с озоном;

-система определения слабого излучения при длине волны 1,2 мкм, состоящая из селективного оптического фильтра и фотоэлектронного множителя.

2.5.27. КИСЛОРОД В ГАЗАХ

Кислород в газах определяется с помощью парамагнитного анализатора.

Принцип метода основан на высокой парамагнитной чувствительности молекулы

кислорода. Кислород проявляет сильное взаимодействие с магнитными полями. Это взаимодействие измеряется количеством электричества, зависящего от величины

содержания кислорода. Измерения концентрации кислорода зависят от давления и температуры, и если анализатор автоматически не реагирует на изменения температуры и давления, необходимо произвести калибровку прибора непосредственно перед самым использованием. Поскольку парамагнитный эффект

кислорода имеет линейный характер, погрешность прибора не должна превышать

0,1%.

Градуировка прибора. Градуировка установки производится следующим

образом:

- в соответствии с инструкцией изготовителя прибора устанавливают нулевой

уровень, пропуская через прибор азот Р1 с соответствующей скоростью потока, пока не будут получены постоянные показатели;

- устанавливают соответствующий предел, пропуская воздух (20,9% об/об O2)

через прибор с необходимой скоростью потока, пока не будут получены постоянные показатели. Предел должен быть установлен на 20,9% об/об в соответствии с

инструкциями производителя.

Исследование. Пропускают исследуемый газ, через прибор с постоянной

скоростью потока, пока не будут получены необходимые показания

2.5.28. ВОДА В ГАЗАХ

Вода в газах определяется с помощью электролитического гигрометра, описанного ниже.

Измерительная камера состоит из тонкой пленки фосфора (V) оксида, расположенной между 2 платиновыми проводами в качестве электродов. Водный пар в исследуемом газе поглащается фосфора (V) оксидом, который преобразуется

в фосфорную кислоту, являющуюся электрическим проводником. Постоянное

напряжение вокруг электродов производит электролиз воды и регенерацию

фосфора (V) оксида. Затем измеряется возникающий электрический ток, который пропорционален содержанию воды в исследуемом газе. Данная система является самокалибрующейся, поскольку она соответствует закону Фарадея. Берут образец

исследуемого газа и оставляют его для уравновешивания при комнатной температуре. Постоянно пропускают газ через камеру, пока не получат стабильные показатели. Измеряют содержание воды в исследуемом газе. Необходимо следить,

чтобы в течение всего периода работы прибора температура была постоянной.

2.5.29.СЕРНИСТЫЙ ГАЗ

Вколбу (A) вливают 150 мл воды Р (Рисунок 2.5.29.-1) и через всю систему пропускают диоксид углерода Р в течение 15 мин со скоростью 100 мл/мин. К 10 мл

разведенного раствора пероксида водорода Р добавляют 0,15 мл раствора 1 г/л

бромофенолового синего Р в спирте Р (20% об/об).Затем прибавляют 0,1 М

раствор натрия гидроксида Р до появления фиолетово-синий оттенка. Раствор помещают в пробирку (D). Не прерывая поток диоксида углерода, снимают воронку (B) и через образовавшееся отверстие вводят в колбу (A) 25,0 г исследуемого

вещества при помощи100 мл воды Р. Через воронку прибавляют 80 мл кислоты

хлористоводородной разведенной Р и кипятят в течение 1 ч. Открывают пробку воронки и останавливают поток диоксида углерода, а также нагревание и охлаждение воды. Переносят содержимое пробирки с небольшим количеством воды Р в 200 мл коническую колбу с широким горлом. Колбу нагревают на водяной бане в

течение 15 мин и дают остыть. Добавляют 0,1 мл раствора 1 г/л бромфенолового

синего Р в спирте Р (20% об/об) и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до

изменения цвета с желтого на фиолетово-синий. Параллельно проводят контрольный опыт.

Рисунок 2.5.29.-1.– прибор для определения диоксида серы

Рассчитывают содержание сернистого газа в пропорции на миллион, используя уравнение:

Содержание сернистого газа = 128× а,

где:

a – число миллилитров 0,1 М раствора натрия гидроксида.

2.5.30.ОКИСЛЯЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА

В125 мл коническую колбу с притертой пробкой вносят 4,0 г исследуемого

вещества и добавляют 50,0 мл воды Р. Закрывают пробкой и взбалтывают в течение 5 мин. Переносят содержимое в 50 мл центрифужную пробирку с притертой пробкой и центрифугируют. Затем 30 мл чистой надосадочной жидкости переносят в 125 мл

коническую колбу с притертой пробкой, добавляют 1 мл кислоты уксусной ледяной Р и от 0,5 г до 1,0 г калия йодида Р. Закрывают пробкой, взбалтывают и дают отстояться 25 – 30 мин в темном месте. Затем прибавляют 1 мл раствора крахмала Р и титруют 0,002 М раствором натрия тиосульфата до исчезновения окраски.

Проводят контрольный опыт. На титрование расходуется не более 1,4 мл

0,002 М раствора натрия тиосульфата (0,002% в пересчете на H2O2).

1 мл 0,002 М раствора натрия тиосульфата соответствует 34 мкг

окисляющих веществ, рассчитанных как пероксид водорода.

2.5.31. РИБОЗА В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Исследуемый раствор. Для приготовления раствора, содержащего около 5

мг/мл сухого полисахарида используют мерную колбу необходимого объема.

Содержимое контейнера количественно переносят при помощи воды Р в колбу и

доводят этим же растворителем до необходимого объема с содержанием рибозы от 2,5 мкг до 25 мкг рибозы. Помещают 0,20 мл и 0,40 мл разведенного раствора в пробирки, получая три серии каждого раствора.

Стандартные растворы. Растворяют 25 мг рибозы Р в воде Р и доводят раствор этим же растворителем до 100,0 мл (основной раствор, содержащий 0,25 г/л

рибозы). Непосредственно перед использованием разводят 1 мл основного раствора до 10,0 мл водой Р (рабочая концентрация: 25 мг/л рибозы). Помещают 0,10 мл, 0,20 мл, 0,40 мл, 0,60 мл, 0,80 мл и 1,0 мл рабочей концентрации в шесть пробирок.

Готовят контрольный раствор, используя 2 мл воды Р.

Доводят объем в каждой пробирке до 2 мл, используя воду Р. Встряхивают.

Добавляют в каждую пробирку 2 мл раствора 0,5 г/л железа хлорида Р в кислоте хлористоводородной Р и встряхивают. Добавляют 0,2 мл раствора 100 г/л орцина Р

в этаноле Р. Помещают пробирки на водяную баню на 20 мин. Охлаждают в ледяной воде. Измеряют оптическую плотность (2.2.25) каждого раствора при длине волны 670 нм, используя контрольный раствор в качестве раствора сравнения. На основании показателей 6 стандартных растворов и соответствующего содержания

рибозы строят градуировочный график и определяют содержание рибозы в

исследуемом растворе для каждого объема. Рассчитывают среднее значение по 3 полученным результатам.

2.5.32. ВОДА: МИКРООПРЕДЕЛЕНИЕ

ПРИНЦИП Кулонометрическое титрование воды основано на количественной реакции

воды с сернистым газом и йодом в безводной среде в присутствии основы с большой буферной способностью. В отличие от объемного метода (2.5.12) йод

получается электрохимическим способом в реакторной камере. Йод, получаемый на

аноде, сразу взаимодействует с водой и сернистым газом, содержащимся в реакторной камере. Количество воды в веществе прямо пропорционально количеству электричества, выделенного до конечного результата титрования. После расхода всей воды, находящейся в камере, достигается конечный результат и выделяется йод. Один моль йода соответствует одному молю воды, а количество

электричества 10,71 Кл соответствует 1 мг воды.

Вода удаляется из системы предварительным электролизом.

Индивидуальные определения могут выполняться последовательно в том же

растворе реагента, при следующих условиях:

каждый компонент исследуемой смеси совместим с другими компонентами;

других реакций не происходит;

объем и емкость воды электролитического реагента достаточны.

Кулонометрическое титрование ограничено количественным определением

малых объемов воды, при этом рекомендуется от 10 мкг до 10 мг воды.

Точность метода предопределяется степенью, до которой атмосферная влажность исключается из системы. Система должна контролироваться измерением количества базового отклонения.

Прибор. Прибор состоит из реакторной камеры, электродов и магнитной мешалки. Реакторная камера состоит из большого анодного отдела и меньшего

катодного отдела. В зависимости от конструкции электрода, оба отделения могут быть разделены диафрагмой. Каждое отделение содержит платиновый электрод.

Жидкость или растворенные образцы вводятся через отверстие для ввода пробы с помощью шприца. В качестве альтернативы может использоваться техника выпаривания, при которой проба нагревается в пробирке (печке) и вода

выпаривается и сохраняется в камере как поток сухого инертного газа. Следует избегать попадания в камеру твердых образцов. При работе необходимо

предпринимать меры предосторожности, как, например, попадание влаги из воздуха, работа в защитной камере с перчатками в атмосфере сухого инертного газа. Процедуры анализа должны контролироваться с помощью электронных приборов,

показывающих результаты.

Метод. Отделение реакторной камеры заполняют электролитическим

реактивом для микроопределения воды Р в соответствии с инструкциями производителя и выполняют кулометрическое титрование до получения стабильного конечного результата. В реакторную камеру вносят соответствующее количество

исследуемого вещества, перемешивают в течение 30 с, если в частной статье не указано иное, и опять титруют до получения стабильного конечного результата. В

случае использования печи необходимое количество образца вносят в пробирку и нагревают. После выпаривания воды из пробы в титрующей камере начинают

титрование. Записывают показания прибора и при необходимости рассчитывают процентный состав или количество воды, присутствующее в образце. При необходимости, когда этого требует тип образца или подготовка образца, выполняют контрольный опыт.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ТОЧНОСТИ Между двумя последовательными титрованиями образца вносят тщательно

взвешенное количество воды Р или стандартного раствора для

микроопределения воды Р того же порядка, что и в образце и производят кулонометрическое титрование. Скорость восстановления должна быть в диапазоне

от 97,5% до 102,5% для навески 1000 мкг H2O и в диапазоне 90,0% - 110,0% для

навески 100 мкг H2O.

2.5.33. ОБЩИЙ БЕЛОК

Многие из методов анализа, которые описаны в данном разделе, могут выполняться с использованием наборов, производимых изготовителями.

МЕТОД 1 Белок в растворе поглощает ультрафиолетовый свет при длине волны 280 нм

благодаря присутствию в структуре ароматических аминокислот, главным образом

тирозина и триптофана Это свойство белков может использоваться в целях их определения. Если буферный раствор, используемый для разведения белка, имеет

большую оптическую плотность, относительно плотности воды, в нем присутствует

интерферирующее вещество. Эту интерференцию можно устранить, если использовать буферный раствор в качестве раствора сравнения, но, если

интерферирующее вещество проявляет высокую оптическую плотность, результаты могут быть подвергнуты сомнению. При низких концентрациях белок может

сорбироваться на кювете, что приводит к существенному занижению концентрации

его в растворе. Этого можно избежать, подготавливая образцы с высокой концентрацией или используя детергенты неионного характера.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]