Gosudarstvennaya_farmakopeya_RB

Если нет других указаний в частной статье, результаты определения считают недействительными, если коэффициент разделения (RS) между измеряемыми на хроматограмме пиками менее 1,0.

2.2.28. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Газовая хроматография (ГХ) представляет собой метод разделения, в

котором подвижной фазой является газ (газ-носитель), а неподвижной фазой, помещенной в колонку, является твердое вещество или жидкость, нанесенные на твердый инертный носитель или равномерно покрывающие внутренние

стенки колонки.

Газовая хроматография основана на механизмах адсорбции и/или распределения.

Оборудование. Оборудование состоит из системы подачи газов, устройства ввода пробы, хроматографической колонки, детектора и регистрирующего устройства. Колонки обычно изготавливают из стекла или нержавеющей стали и заполняют неподвижной фазой. Газ-носитель проходит с заданной скоростью через устройство ввода пробы, колонку, а затем через детектор.

Определение проводят при постоянной температуре колонки или в

соответствии с заданной температурной программой.

Используемый детектор должен обеспечивать определение тех количеств анализируемых веществ, которые элюируются из колонки. Обычно используют пламенно-ионизационный детектор, детектор по теплопроводности, термоионный детектор и электронозахватный детектор.

Методика. Колонку, устройство ввода пробы и детектор термостатируют при указанной температуре (# перед использованием колонка должна быть кондиционирована). Готовят испытуемый раствор и раствор(ы) сравнения, как указано в частной статье. При помощи растворов сравнения настраивают прибор и подбирают объемы вводимых проб, которые позволяют получить

необходимый сигнал. Выполняют повторные введения для проверки

сходимости сигнала и проверяют, если необходимо, число теоретических тарелок.

Вводят растворы и регистрируют результаты хроматографирования. Для

проверки сходимости сигнала выполняют повторные введения. Определяют

площади пиков анализируемых компонентов. В случае, если коэффициент симметрии, вычисленный, как описано ниже, имеет значение от 0,8 до 1,20,

допускается определение по высоте пиков. При использовании

программирования температуры необходимо проводить определение по площадям пиков. При использовании внутреннего стандарта следует

удостовериться, что ни один из пиков, относящихся к анализируемому веществу

или его примеси, не маскируется пиком внутреннего стандарта.

Если указано в частной статье, процентное содержание одного или

нескольких компонентов анализируемой пробы определяют посредством

вычисления процентной доли площади соответствующего пика или пиков в суммарной площади всех пиков, исключая пики растворителей или добавленных

реактивов (метод внутренней нормализации). В этих случаях рекомендуется

использование широкодиапазонного усилителя и автоматического интегратора.

# КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Абсолютная градуировка. Испытуемый раствор и раствор сравнения

попеременно хроматографируют на газовом хроматографе в условиях, указанных в частной статье. Для испытуемого раствора и раствора сравнения рассчитывают средние значения площадей или высот пиков анализируемого вещества. По полученным средним значениям рассчитывают концентрацию анализируемого вещества в испытуемом растворе.

Метод внутреннего стандарта. Для каждой хроматограммы сначала рассчитывают отношение площади или высоты пика анализируемого вещества к

площади или высоте пика внутреннего стандарта. Полученные отношения усредняют для испытуемого раствора и раствора сравнения и по найденным средним значениям определяют концентрацию анализируемого вещества в испытуемом растворе.

Методика. Полная неопределенность методики анализа должна соответствовать требованиям статьи «Валидация аналитических методик и

испытаний. Раздел D. Критерии проведения валидации методик количественного определения».

При этом необходимо, чтобы неопределенность пробоподготовки была

незначима по-сравнению с полной неопределенностью методики анализа (см. там же).

Рекомендуется использовать следующую методику проведения конечной аналитической операции (хроматографирования). Хроматографируют несколько

раз (no) раствор сравнения и определяют относительное стандартное отклонение (RSD) хроматографического сигнала (площадь или высота пика в случае абсолютной калибровки, отношения площади или высоты пика к площади или высоте пика внутреннего стандарта в методе внутреннего стандарта).

Величина no является достаточной, если значение RSD не превышает значение RSDmax. Значение RSDmax. является характеристикой теста “Проверка пригодности хроматографической системы” и должна соответствовать требованиям Табл. 1.

Таблица 1.

Требования к RSDmax. При проведении количественного определения на

этапе проверки пригодности хроматографической системы (предполагается,

что неопределенность пробоподготовки незначительна в сравнении с полной

неопределенностью методики анализа)

Если полученное значение RSD. не превышает значение RSDmax.,

приведенное в Табл.1., попеременно хроматографируют одинаковое количество n > no раз раствор сравнения и испытуемый раствор (или несколько испытуемых растворов, если анализируют несколько серий).

Возможно значительное изменение величины n за предел объединения выборок растворов сравнения и анализируемого (ых) раствора (ов) от предела объединенного стандартного отклонения (см. статью «Статистический анализ

результатов химического эксперимента»).

# КОНТРОЛЬ ПРИМЕСЕЙ Для контроля примесей обычно используют следующие подходы.

1 . Количественное определение примеси с использованием раствора сравнения с известной концентрацией примеси (обычно в методе абсолютной калибровки). Такой подход предполагает одинаковый сигнал примеси в присутствии и в отсутствии основного вещества.

2.Метод внутренней нормализации. Такой подход предполагает выполнение линейности в широком диапазоне и может потребовать учета различий в сигналах примеси и основного вещества. Его часто применяют для определения суммы примесей. При этом сумму площадей всех пиков на хроматограмме (без учета пика растворителя) принимают за 100% и содержание

каждой конкретной примеси или суммы примесей находят как долю площади

пика этой примеси или суммы площадей пиков примесей в общей сумме площадей всех пиков на хроматограмме.

3.Сравнение с разбавленным раствором основного вещества.

4.Метод стандартных добавок. К анализируемой пробе прибавляют известное количество примеси. По данным хроматографирования испытуемой пробы и испытуемой пробы с добавкой определяют содержание примеси. Для повышения точности возможно использование метода внутреннего стандарта.

# Пригодность хроматографической системы. Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Данный тест обычно проводят с использованием растворов сравнения.

Если нет других указаний в частной статье, хроматографическая система считается пригодной при выполнении следующих условий:

-относительные времена удерживания указанных веществ должны быть около регламентируемых значений;

-число теоретических тарелок (эффективность хроматографической системы), рассчитанное по указанному пику, должно быть не менее регламентируемой величины;

-коэффициент разделения указанных пиков должен быть не менее указанной величины;

-относительное стандартное отклонение, рассчитанное для высоты или площади указанного пика или их отношений к высоте или площади внутреннего стандарта из хроматограмм раствора сравнения, должно быть не более регламентируемой величины; для расчета относительного стандартного отклонения используют данные пяти параллельных

хроматограмм; если требуемое относительное стандартное отклонение

превышает 2.0%, его расчет проводят, используя данные шести или более параллельных хроматограмм;

-коэффициент асимметрии указанного пика, рассчитанный из хроматограмм раствора сравнения, должен быть в пределах, указанных в частной статье.

Для обеспечения выполнения требований теста «Проверка пригодности хроматографической системы» допускается модификация хроматографических условий, описанных в частной статье (изменение температуры термостата колонок и/или расход газа-носителя).

ПАРОФАЗНАЯ ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Парофазная газовая хроматография является методом, наиболее подходящим для разделения и определения летучих соединений, которые присутствуют в твердых или жидких образцах. Метод основан на анализе газовой фазы, находящейся в равновесии с твердой или жидкой фазой.

Оборудование. Оборудование состоит из газового хроматографа,

снабженного устройством для ввода газовой фазы, находящейся над испытуемым образцом. Устройство ввода может быть подсоединено к блоку, автоматически контролирующему и регулирующему давление и температуру. При необходимости используют устройство для удаления растворителей.

# Возможно использование других способов ввода газовой фазы в хроматографическую колонку.

Анализируемую пробу вводят в контейнер, снабженный подходящей пробкой и клапанной системой, которая регулирует прохождение газа-носителя. Контейнер помещают в термостатируемую камеру с температурой, устанавливаемой в соответствии со свойствами анализируемого образца.

Пробу выдерживают при заданной температуре в течение времени, достаточном для установления равновесия между твердой или жидкой фазой и газовой фазой.

В контейнер вводят газ-носитель и по истечении указанного времени открывают клапан, чтобы газ поступал в хроматографическую колонку, перенося с собой перешедшие в газовую фазу компоненты.

Методика. Настраивают прибор для получения необходимого сигнала, используя подготовленные образцы сравнения

а) Метод прямой градуировки

В одинаковые флаконы раздельно помещают анализируемую пробу и каждый из образцов сравнения, приготовленные, как указано в частной статье, избегая

контакта между устройством для ввода проб и образцами.

Флаконы герметично закрывают и помещают в термостатируемую камеру с

температурой и давлением, указанными в частной статье. После установления

равновесия газовую фазу хроматографируют в указанных условиях.

б) Метод стандартных добавок

Равные объемы анализируемой пробы помещают в одинаковые указанные в частной статье флаконы. Во все флаконы, кроме одного, прибавляют указанные количества раствора сравнения, содержащего известную концентрацию анализируемого вещества, для получения ряда образцов, с равномерно

увеличивающимися концентрациями этого вещества.

Флаконы герметично закрывают и помещают в термостатируемую камеру с температурой и давлением, указанными в частной статье. После установления равновесия хроматографируют газовую фазу в указанных условиях.

Уравнение линейной зависимости рассчитывают методом наименьших квадратов. По полученному уравнению определяют концентрацию анализируемого вещества в испытуемой пробе.

Допускается определение концентрации с использованием графического метода. Для этого по оси ординат откладывают средние значения полученных результатов, а по оси абсцисс - концентрации стандартных добавок анализируемого вещества. Экстраполируют линию, проходящую через полученные точки, до пересечения с осью абсцисс. Расстояние между этой точкой и началом координат представляет собой концентрацию анализируемого вещества в испытуемом растворе.

с) Метод последовательных отборов

Применение данного метода описывают в частной статье.

2.2.29. ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Жидкостная хроматография (ЖХ) представляет собой метод разделения, в котором подвижной фазой является жидкость, а неподвижной фазой,

помещенной в колонку, является тонкодисперсное твердое вещество или

жидкость, нанесенная на твердый тонкодисперсный носитель, или химически модифицированный тонкодисперсный носитель посредством введения

органических групп.

Жидкостная хроматография основана на механизмах адсорбции, распределения, ионного обмена или разделения по размерам молекул.

Оборудование. Оборудование обычно состоит из системы подачи подвижной фазы, устройства ввода пробы (с использованием автосамплера

или петлевого дозатора), хроматографической колонки, детектора, дегазатора и

регистрирующего устройства. Подвижная фаза обычно подается под давлением из одной или нескольких емкостей и протекает через устройство

ввода пробы, колонку, а затем через детектор с заданной скоростью. Температуру хроматографической колонки поддерживают постоянной.

Состав подвижной фазы, в зависимости от указанного в частной статье, может или оставаться постоянным на протяжении всего анализа (изократическое элюирование), или может изменяться в соответствии с задаваемой программой (градиентное элюирование).

Используемый детектор должен обеспечивать определение тех

количеств анализируемых веществ, которые элюируются из колонки. Обычно для детектирования используют абсорбционную спектрофотометрию, а также дифференциальную рефрактометрию, флуориметрию, сжигание и электрохимические методы.

Методика. Колонку уравновешивают при указанном составе подвижной фазы. Готовят испытуемый раствор и раствор(ы) сравнения, как указано в

частной статье. Растворы не должны содержать твердых частиц. Используя

растворы сравнения, настраивают прибор и подбирают объемы вводимых проб, которые позволяют получить необходимый (адекватный) сигнал.

Выполняют повторные введения для проверки сходимости сигнала и проверяют,

если необходимо, число теоретических тарелок.

Вводят растворы и регистрируют результаты хроматографирования. Для

проверки сходимости сигнала выполняют повторные введения. Определяют площади пиков анализируемых компонентов. В случае, если коэффициент

асимметрии, вычисленный, как описано ниже, имеет значение от 0.8 до 1.20,

допускается проводить определение по высоте пиков. При использовании градиентного элюирования необходимо проводить определение по площадям

пиков. При использовании внутреннего стандарта следует удостовериться,

что ни один из пиков анализируемого вещества или его примеси не маскируется пиком внутреннего стандарта.

Из полученных значений вычисляют содержание определяемого компонента или компонентов. Если указано в частной статье, процентное содержание одного или нескольких компонентов анализируемой пробы определяют посредством вычисления процентной доли площади соответствующего пика или пиков к суммарной площади всех пиков, исключая пики растворителей или добавленных реактивов (метод внутренней нормализации). В этих случаях рекомендуется использование широкодиапазонного усилителя и автоматического интегратора.

# КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Абсолютная градуировка. Если нет других указаний в частной статье, испытуемый раствор и раствор сравнения попеременно хроматографируют на жидкостном хроматографе, получая не менее пяти хроматограмм, в условиях, указанных в частной статье. Для испытуемого раствора и раствора сравнения

рассчитывают средние значения площадей или высот пиков анализируемого вещества. По полученным средним значениям рассчитывают концентрацию

анализируемого вещества в испытуемом растворе.

Метод внутреннего стандарта. Для каждой хроматограммы сначала

рассчитывают отношение площади или высоты пика анализируемого вещества к площади или высоте пика внутреннего стандарта. Полученные отношения усредняют для испытуемого раствора и раствора сравнения и по найденным

средним значениям определяют концентрацию анализируемого вещества в испытуемом растворе.

# КОНТРОЛЬ ПРИМЕСЕЙ Для контроля примесей обычно используют следующие подходы.

1.Количественное определение примеси с использованием раствора сравнения с известной концентрацией примеси (обычно в методе абсолютной калибровки). Такой подход предполагает одинаковый сигнал примеси в присутствии и в отсутствии основного вещества.

2.Метод внутренней нормализации. Такой подход предполагает выполнение линейности в широком диапазоне и может потребовать учета различий в чувствительности детектора по отношению к примеси и основному веществу. Его часто применяют для определения суммы примесей. При этом сумму площадей всех пиков на хроматограмме (без учета пика растворителя)

принимают за 100% и содержание каждой конкретной примеси или суммы

примесей находят как долю площади пика этой примеси или суммы площадей

пиков примесей в общей сумме площадей всех пиков на хроматограмме.

3.Сравнение с разбавленным раствором основного вещества.

4.Метод стандартных добавок. К анализируемой пробе прибавляют известное количество примеси. По данным хроматографирования испытуемой пробы и испытуемой пробы с добавкой определяют содержание примеси. Для повышения точности возможно использование метода внутреннего стандарта.

# Пригодность хроматографической системы. Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Данный тест обычно проводят с использованием растворов сравнения.

Если нет других указаний в частной статье, хроматографическая система считается пригодной при выполнении следующих условий:

- относительные времена удерживания указанных веществ должны быть около регламентируемых значений;

-число теоретических тарелок (эффективность хроматографической системы), рассчитанное по указанному пику, должно быть не менее регламентируемой величины;

-коэффициент разделения указанных пиков, рассчитанный из хроматограмм раствора сравнения, должен быть не менее указанной величины;

-относительное стандартное отклонение, рассчитанное для высоты или площади указанного пика или их отношений к высоте или площади внутреннего стандарта из хроматограмм раствора сравнения, должно быть не более указанной величины; для расчета относительного стандартного отклонения используют данные пяти параллельных хроматограмм;

-коэффициент симметрии указанного пика, рассчитанный из хроматограмм раствора сравнения, должен быть в пределах, указанных в частной статье.

Для обеспечения выполнения требований теста «Проверка пригодности хроматографической системы» допускается модификация хроматографических условий, описанных в частной статье.

2.2.30. ЭКСКЛЮЗИОННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Эксклюзионная хроматография представляет собой хроматографический метод, в котором процесс распределения молекул в растворе происходит в соответствии с их размерами. В случае использования органической

подвижной фазы метод называют гель-проникающей хроматографией, а в

случае использования водной подвижной фазы – гель-фильтрационной

хроматографией. Проба вводится в колонку, заполненную гелем или пористыми частичками наполнителя, и переносится подвижной фазой через

колонку. Распределение в соответствии с размерами происходит в процессе

движения и многоразовых обменов молекул растворенного вещества между молекулами растворителя (подвижной фазы) и тем же самым растворителем,

находящимся в порах материала, которым заполнена колонка. Диапазон

размеров распределенных молекул определяется диапазоном размеров пор наполнителя.

Достаточно маленькие молекулы, способные проникать во все поры материала, элюируются в полном объеме колонки (Vt – полный проникающий объем или граница эксклюзии). Молекулы с размерами, превышающими размер всех пор материала колонки, мигрируют лишь сквозь простор между частицами наполнителя, не препятствуя им, и элюируются в свободном объеме колонки (Vo – объем эксклюзии или мертвый объем). Распределение молекул в соответствии с размерами происходит между свободным объемом и полным объемом колонки; наиболее эффективное распределение происходит в первые две трети даного диапазона.

Оборудование. Специфичной частью оборудования является хроматографическая колонка подходящих размеров, заполненная материалом,

который обеспечивает распределение молекул соответствующих размеров в

необходимом диапазоне. Если необходимо, колонку термостатируют. Через

колонку с постоянной скоростью пропускают элюент. К одному концу колонки

обычно присоединяют приспособление для введения пробы, например, инжектор с прерывателем потока, шприцевой инжектор с мембраной для

введения пробы без приостановки потока или петлевой инжектор с клапаном,

который перекрывает поток. К этому же концу колонки также может быть присоединен соответствующий насос для подачи элюента с контролируемой

скоростью. Проба может также наноситься непосредственно на сухую

поверхность материала колонки или, если вязкость пробы превышает вязкость

элюента, проба может наслаиваться на поверхность материала колонки под элюент. Другой конец колонки обычно присоединяют к соответствующему

детектору с приспособлением, регистрирующим и обеспечивающим контроль

соответствующих концентраций распределенных компонентов пробы. Обычно используют детекторы: фотометрический, рефрактометрический или

люминесцентный. При необходимости, может быть присоединен автоматический коллектор фракций.

В качестве наполнителя может использоваться или мягкий материал,

такой как набухший гель, или твердый, такой как пористое стекло, силикагель или подходящий для данного растворителя поперечно-сшитый органический

полимер. При использовании твердых материалов обычно применяют принудительную подачу подвижной фазы под давлением, что ускоряет разделение. Подвижную фазу выбирают исходя из природы пробы, наполнителя и метода детектирования.

Указания по обработке материала для заполнения колонки перед выполнением распределения и наполнения колонки представлены в соответствующей частной статье или инструкции изготовителя.

# Условия хроматографирования, такие, например, как размер колонки,

скорость подвижной фазы, объем вводимой пробы и другие параметры, обозначенные в частной статье, не являются строго регламентированными и могут

варьировать. При этом должны выполняться условия теста «Пригодность хроматографической системы» (2.2.46), и данный тест может учитывать влияние таких изменений на полученные результаты.

Определение относительного компонентного состава смесей

Распределение проводят, как описано в частной статье. При возвожности записывают хроматограмму, полученную в процессе распределения, и измеряют площадь соответствующих пиков. Если чувствительность одинаковая для всех компонентов пробы (например, они имеют одинаковое удельное оптическое поглощение), относительное содержание каждого компонента рассчитывают как отношение площади пика соответствующего компонента к сумме площадей пиков всех компонентов. Если для разных компонентов пробы чувствительность разная, содержание каждого компонента рассчитывают с помощью градуировочных графиков, полученных с использованием соответствующих стандартных веществ для градуировки, как указано в частной статье.

Определение молекулярных масс

Эксклюзионная хроматография может быть использована для определения молекулярных масс веществ путем сравнения с соответствующими стандартными веществами для градуировки, указанными в частной статье.

Для молекулярных масс стандартных веществ строят график зависимости объема удерживания от логарифма молекулярных масс.

График, выстроенный в пределах, ограниченных значениями объема эксклюзии и полного объема проникновения обычно приближается к прямой

линии для данной колонки в данных экспериментальных условиях. На основании этого графика могут быть рассчитаны молекулярные массы. Использование метода градуировки для молекулярно-массового разделения позволяет получать достоверные результаты лишь для частных случаев систем высокомолекулярное вещество/растворитель в описанных экспериментальных условиях.

Определение молекулярно-массового рапределения полимеров

Эксклюзионная хроматография может быть использована для определения молекулярно-массового распределения полимеров. Однако сравнить между собой результаты можно лишь в одинаковых экспериментальных условиях. Стандартные вещества, используемые для градуировки, и методики анализа описывают в соответствующих частных статьях.

2.2.31. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

ОБЩИЙ ПРИНЦИП

Под действием электрического поля заряженные частички, растворенные или диспергированные в растворе электролита, передвигаются в направление к электроду противоположной полярности, # а молекулы с положительными и отрицательными зарядами передвигаются в направлении их суммарного заряда.

# Скорость передвижения прямо пропорциональна суммарному заряду частицы и обратно пропорциональна ее размеру, либо молекулярной массе.

# Электрофоретическая подвижность является величиной, характерной для данного вещества. Различают абсолютную и относительную электрофоретическую подвижность. Абсолютная электрофоретическая подвижность под влиянием градиента потенциала 1 В на 1 см измеряется в сантиметрах в секунду. Относительная электрофоретическая подвижность есть отношение подвижности исследуемого вещества к подвижности другого вещества, принятого за стандарт.

В гель-электрофорезе движение частиц замедляется взаимодействием с

окружающей матрицей геля, что действует как молекулярное сито. Встречные

взаимодействия электрической силы и молекулярного сита приводят к

диференциации скорости передвижения частиц в зависимости от их размеров, форм и зарядов. В ходе электрофореза из-за различия физико-химических свойств,

разные макромолекулярные смеси передвигаются с разной скоростью и, таким

образом, разделяются на дискретные фракции. Электрофоретическое разделение может быть проведено в системах без неподвижных фаз (например, свободное

разделение раствора в капилярном электрофорезе) и в стабилизированных средах,

таких как тонкослойные пластинки, пленки или гели.

# Существует два различных метода электрофореза: фронтальный и

зональный. Фронтальный электрофорез проводят в свободной незакрепленной

среде, и он является единственным способом определения абсолютной электрофоретической подвижности. Зональный электрофорез проводят в закрепленной среде, роль которой состоит в стабилизации электрофоретических зон.

ЭЛЕКТРОФОРЕЗ СО СВОБОДНОЙ ИЛИ ПОДВИЖНОЙ ГРАНИЦЕЙ

Этот метод обычно используется для определения электрофоретической подвижности, экспериментальной характеристики веществ, непосредственно измеренной и воспроизведенной. Этот метод обычно применяется для веществ с

высокой молекулярной массой, которые имеют малую диффузию. Границы

первоначально определяются физическими методами, например, рефрактометрией или кондуктометрией. Под действием определенного электрического поля в

течение точно измеряемого времени определяют новые границы и их относительное положение. Условия испытания подбирают так, чтобы можно было определять столько границ, сколько веществ присутствует в испытуемом образце.

ЗОНАЛЬНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ФАЗЫ НОСИТЕЛЯ

Этот метод обычно используется лишь для небольших образцов испытуемых

веществ.

Природа носителя, например, бумага, гель агара, ацетат целлюлозы,

крахмал, агароза, полиакриламид, смешанный гель, служит причиной ряда дополнительных факторов, влияющих на подвижность:

-а) вследствие наличия каналов в фазе носителя, среднее растояние, которое

проходит вещество, становится меньше реально пройденного расстояния;

-б) некоторые фазы носителя электрически не нейтральны. Поскольку носители являются неподвижной фазой, это иногда может приводить к значительно

большему электроэндоосмотическому потоку;

-в) какое-нибудь нагревание в результате эффекта Джоуля может вызвать

некоторое испарение жидкости с фазы носителя, что, в следствие капиллярности, приводит к движению раствора в направлении от краев к центру.

Ионная сила в этом случае возрастает.

Следовательно, скорость передвижения зависит от таких главных факторов: подвижности заряженной частицы, потока скорости электроэндоосмоса и испарения жидкости с фазы носителя, а также силы (напряжения поля). Поэтому необходимо

проводить испытание в строго определенных экспериментальных условиях и, по возможности, использовать стандартные вещества.

Прибор для электрофореза состоит из:

-источника постоянного тока, напряжение которого можно контролировать и, желательно, стабилизировать;

-электрофоретической камеры. Обычно это камера из стекла или твердой

пластмассы, которая состоит из двух отдельных резервуаров – анодного и

катодного, содержащих раствор электролита. В каждый резервуар камеры погружается электорд, напрмер, платиновый или графитовый. Они присоединяются изолированной схемой к соответствующему выходу источника питания и образуют анод и катод. Уровень жидкости в обоих резервуарах камеры поддерживается одинаковым для избежания переливания через сифон.

Электрофоретическая камера снабжена воздухонепроницаемой крышкой,

которая поддерживает атмосферу насыщенной влажности на протяжении

испытания и уменьшает испарение растворителя. При снятии крышки ток отключается предохранителем. Если электродвижущая сила измерена в интервале,

превышающим 10 В, желательно охладить носитель;

-приспособления установки носителя:

Электрофорез на полосках. Полоски с носителем, поочередно смоченные электродным раствором, погружают в электродный резервуар, закрепляют и фиксируют соответствующим держателем для предупреждения диффузии

электролита. Такими держателями можут быть горизонтальная рамка,

направленный V-образный штатив или однородная поверхность с точками контакта через определенные интервалы.