Практика тсх
Формирование тонкого слоя
Незакрепленный слой и его особенности
Основное требование к хроматографическим пластинкам – равномерность толщины слоя адсорбента и активность сорбента в уже подготовленных пластинках. Анализ в незакрепленных слоях сорбентов в настоящее время является достаточно экзотичным методом, капризен и крайне друдоемок, поэтому используется крайне редко.
Наиболее простым методом нанесения тонкого слоя для аналитической ТСХ заключается в следующем. Две сложенные одна к другой (“спина к спине") стеклянные пластинки погружают, удерживая пинцетом, в суспензию сорбента в малополярном сухом органическом растворителе (хлороформ, четыреххлористый углерод), перемешивают суспензию этими пластинками, извлекают их, сразу же разнимают и помещают слоем вверх для просушки. Практически немедленно после высыхания (это легко контролируется визуально) пластинки используют для ТСХ-анализа. Адсорбция частиц силикагеля (особенно если используется мелкая фракция) достаточна, чтобы удерживать их на поверхности пластинки даже при ее вертикальном положении. Недостатком такого метода формирования слоя (как, впрочем, и любого другого незакрепленного) является его чезвычайная “мягкость“ – слой легко повредить даже при легком прикосновении устройства для нанесения (капилляр, микродозатор, шприц, пипетка).
Следует иметь в виду, что при описываемом способе нанесения сорбента, слой получается очень тонким и, следовательно, пластинку легко “перегрузить” веществом, что значительно ухудшит качество разделения. При “нормальном” нанесении проба вещества на пластинке оказывается очень маленькой, что в свою очередь накладывает определенные требования к чувствительности определения примесей.
Техника нанесения
|
Рисунок |
4.6 |
– Формирование тонкого слоя специальным “разравнивающим” |
бруском. Суспензию сорбента наливают на горизонтально помещеннцю пластинку, устанавливают брусок нужной стороной (каждая из граней бруска по краям имеет ступеньку разной толщины) и проводя им вдоль пластинки получают слой постоянной заданной толщины. Приспособление удобно для нанесения на несколько пластин.
|
Рисунок |
4.7 |
– Формирование тонкого слоя специальным аппликатором. |
Набор пластинок закрепляют в станке, сверху размещают аппликатор, в который вносят суспензию сорбента. При проведении аппликатора вдоль станка суспензия вытекает из щели (ее толщина произвольно регулируется, диапазон зависит от производителя, но, как правило 0 – 5 мм) и формирует ровнй слой. Прибор особенно удобен для нанесения на большое количество пластин.
Нанесение образца
Наилучшим методом нанесения образца на пластинки с незакрепленным слоем сорбента следует признать метод “висящей капли” – анализируемый раствор аккуратно выдавливают из дозирующего устройства так, чтобы на его конце образовалась микрокапля, а затем аккуратно подносят ее, избегая контакта собственно дозирующего устройства с поверхностью, к сорбенту так, чтобы капля соприкоснулась с ним. Капиллярными силами каплю “всасывает” в слой, после чего дозатор сразу же отводят от поверхности, избегая образования пятна большой площади. После высыхания (при такой технике следует растворять анализируемое вещество в легколетучем растворителе) нанесение можно повторить для получения достаточной для целей анализа пробы вещества на пластинке.