2. Количественный анализ

В области количественного анализа ТСХ может дать ответ только на вопрос: “Не превышает ли содержание примеси определенный уровень”. При применении денситометров этот вопрос можно конкретизировать до “Сколько содержится данного вещества в смеси?”, но только в том случае, если имеется калибровка по определяемому веществу. Однако, относительная погрешность измерения в этом случае достаточно велика. Достоверность анализа по системе “не больше” в силу этого превышает достоверность по системе “сколько”. Кроме того, применение качественных денситометров значительно удорожает процесс. Для определения количественного состава смеси использование жидкостного хроматографа предпочтительнее.

При ответе на первый вопрос (“не превышает ли…?”) на хроматограмму наносят строго определенное количество анализируемого вещества, рядом – одно или несколько пятен обнаруживаемой примеси с разным ее содержанием (свидетели). После элюирования пластинки пятна проявляют подходящим образом и сравнивают интенсиность окраски и площадь пятна с этими же параметрами свидетелей. Если для анализируемого вещества имеется НТД, строго регламентирующая содержание примеси на определенном уровне, то используют только один свидетель с заданным содержанием примеси. В этом случае положительный (соответствует) или отрицательный (не соответствует) результат анализа определяется по тому, превышает или не превышает по совокупности площади и интенсивности окраски пятно примеси пятно свидетеля. При этом наиболее надежный (достоверный) результат получается в том случае, если количество анализируемого образца подобрано таким образом, чтобы в нем примесь содержалась на границе обнаружения, а в свидетеле – пятно было четко различимым и надежно определяемым. Так, например, в амиксине регламентируется содержание 2-[2–(диэтиламино)этокси]флуоренона-9 – “не более 0.1 %”. Чувствительность обнаружения этой примеси составляет 0.05 мкг. Тогда, при нанесении 200 мкг амиксина и 0.2 мкг 2-[2–(диэтиламино)этокси]флуоренона-9 (0.1 % основного вещества и в 4 раза боьше предела обнаружения) и наличии на хроматограмме слабо различимого пятна примеси при четком пятне свидетеля, можно с высокой степенью достоверности утверждать, что содержание этой примеси в амиксине меньше заданного предела.

iБранд Дж., Эглинтон Г. Применение спектроскопии в органической химии: Пер. с англ. – М.: Мир, 1967. – 280 с.

iiГеккелер К.Е., Экштайн X. Аналитические и препаративные лабораторные методы: Справочник: Пер. с нем. – М.: Химия, 1994. – 416 с.

iiiСильверстейн Р., Басслер Г., Моррил Т. Спектрометрическая идентификация органических соединений. – М.: Мир, 1977. – 590 с.

ivНаканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений: Практическое руководство: Пер. с англ. – М.: Мир, 1965. – 216 с.

vКазицына Л.А., Куплетская Н.Б. Применение УФ-, ИК- и ЯМР-спектроскопии в органической химии: Учебное пособие. – М.: Высшая школа, 1971. – 264 с.

viЖунке А. Ядерный магнитный резонанс в органической химии. – М.: Мир, 1974. – 176 с.

viiСвердлова О.В. Электронные спектры в органической химии. – 2-е изд. перераб. – Л.: Химия, 1985. – 248 с.

viiiБраун Д., Флойд А., Сейнзбери М. Спектроскопия органических веществ: Пер. с англ. – М.: Мир, 1992. – 300 с.

ixЛевшин Л.В., Салецкий А.М. Оптические методы исследования молекулярных систем: Учебное пособие. – М.: Изд-во МГУ, 1994. – Ч. 1: Молекулярная спектроскопия. – 320 с.

xТонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: Пер. со словацк.: В 2-х ч. Ч. 1 / Гадрабова В., Гержманек С., Гривняк Я., Губик И., Маер Я., Михалец Ч., Перении Ф., Шварц В., Шаршунова М., Толдьеши Ю. – М.: Мир, 1980. – 296 с.

xiТонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: Пер. со словацк.: В 2-х ч. Ч. 2 / Гадрабова В., Гержманек С., Гривняк Я., Губик И., Маер Я., Михалец Ч., Перении Ф., Шварц В., Шаршунова М., Толдьеши Ю. – М.: Мир, 1980. – 322 с.

xiiЛабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам: В 2-х ч. Ч.2: Пер. с англ. / Туркова Я., Мелоун Б., Мотл О., Новотный Л., Комерс Р., Крейчи М., Прохазка 3., Прусик 3., Микеш О. - М.: Мир, 1982. - 381 с.