1. Выявление токсигенности возбудителя дифтерии в реакции преципита­ции в геле по Оухтерлони.

Ингредиенты:

Исследуемый материал содержит

Диагностический препарат содержит

На рисунке обозначьте: фильтровальная бумага, смоченная антитокси­ческой сывороткой; испытуемые культуры: а) нетоксигенные б) токсигенные линии преципитации.

2. Реакция флоккуляции

Принцип метода: _________________________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Сфера применения: _________________________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Ингредиенты:

Исследуемый материал содержит

Диагностический препарат содержит

	Количество антитоксической сыворотки в мл
	0,01	0,02	0,03	0,04	0,05	0,06	0,07
Помутнение (+/ –)

Примечание: Доза токсина, внесенного в каждую пробирку - ___________ АЕ.

Расчет активности сыворотки:

Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Гиперчувствительность.

Механизм основных типов аллергических реакций.

Тип	Ведущее звено патогенеза	Основные клинические формы
I тип
II тип
III тип
IV тип

Методы выявления сенсибилизации

Кожные аллергические пробы.

Цель постановки	Тип гиперчувстви-тельности ГЗТ/ГНТ)	Диагностический препарат

Принцип метода: Внутрикожно или накожно в организм человека вводися небольшое ко­личество аллергена. При наличии сенсибилизации через некоторое время на месте введе­ния препарата возникает местная реакция.

Положительный результат кожной аллергической пробы – ______________________________________ Отрицательный результат кожной аллергической пробы – ______________________________________

Занятие № 8 Дата______________

Тема: иммунитет: иммунные реакции с использованием меченых антител или антигенов. Иммунобиологические препараты.

Цель: Изучить основные иммунобиологические препараты, их особенности, получение и применение в медицине. Получить представление о принципах приготовления диагностических препаратов, меченых флюорохромами, радиоактивными элементами, ферментами; чувствительности отдельных иммунных реакций и областях их применения..

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. Вакциопрофилактика и вакцинотерапия.

2. Состав и классификация вакцин.

3. Живые вакцины, получение и применение.

4. Инактивированные вакцины, получение и применение.

5. Синтетические и полусинтетические вакцины, получение и применение.

6. Ассоциированные вакцины.

7. Календарь профилактических прививок.

8. Серопрофилактика и серотерапия.

9. Сывороточные иммунные препараты.

10. Получение и применение моноклональных антител.

11. Иммуномодуляторы.

12. Реакции с мечеными диагностическими компонентами (ИЛМ, РИФ, ИФА, РИА, иммуноблоттинг).

Тема для самостоятельной проработки - опсоно-фагоцитарная реакция.

Иммуно-люминесцентный метод (ИЛМ, РИФ)

Принцип метода: Антитела, соединенные с ФИТЦ (флюоресцсина изотиоционат), фикси­руются на соответствующих антигенах. После промывки, в люминесцентном микроскопе виден искомый микроорганизм или пораженная клетка макроорганизма, светящиеся на темном фоне.

Ингредиенты:

1. Аг - клетка микроорганизма или пораженная клетка макроорганизма.

2. Люминесцирющая сыворотка против искомого антигена.

3. Нелюминесцирующая кроличья сыворотка против искомого Аг.

4. Люминесцирующая сыворотка против иммуноглобулинов кролика.

5. Комплемент.

6. Люминесцирующая сыворотка против комплемента.

Схема реакций (отметьте соответствующие компоненты цифрами)

Прямой метод
Непрямой двухэтапный метод
Непрямой трехэтапный метод

Перечислите ингредиенты для ИЛМ (РИФ) с целью:

а) Индикации возбудителя дизентерии в молоке

	В прямой РИФ	В непрямой двухэтапной РИФ
Исследуемый материал
Диагностические препараты

б) Серодиагностики сифилиса в непрямой двухэтапной РИФ

	В непрямой двухэтапной РИФ
Исследуемый материал
Диагностические препараты

Иммуно-ферментный анализ ИФА.

Принцип метода: Антитела к искомому антигену фиксируются на носителе. Вносят иссле­дуемый материал, добавляют антитела, меченые ферментом, и хромогенный субстрат. Между всеми операциями интенсивно промывают. При соответствии антигенов и антител, содержимое пробирки окрашивается, причем интенсивность окрашивания пропорцио­нальна количеству искомого компонента.

Схема ИФА

Обнаружение антител

Обнаружение антигена

ИФА с целью обнаружения вируса гепатита В в сыворотке больного

Ингредиенты:

Исследуемый материал содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

	Исследуемые сыворотки					Контроли
	A	B	C	D	E	положительный	отрицательный
Результат

Ответ: _____________________________________________________________ ____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

ИФА с целью серодиагностики сифилиса

Ингредиенты:

Исследуемый материал содержит _______

Диагностические препараты 1._________________________содержит _______

2._________________________содержит _______

	Исследуемые сыворотки					Контроли
	A	B	C	D	E	положительный	отрицательный
Результат

Ответ: _____________________________________________________________ ____________________________________________________________________

Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Иммуноблоттинг (выявление антител в сыворотках больных к определенным антигенам возбудителя).

Принцип метода: 1. Разделенный с помощью электрофореза комплекс антигенов наносят на полоску из нитроцеллюлозы. При этом разные антигены фиксируются в различных участках полоски. 2. Дальнейшие исследования проводят по схеме обычного ИФА

Иммуноблоттинг для диагностики ВИЧ-инфекции

Антигены ВИЧ

Ответ: ______________________________________________ ______________________________________________ Вывод: ______________________________________________ ______________________________________________

Радио-иммунный метод (РИМ)(Радиоиммунологический анализ, РИА)

Принцип метода отличается от ИФА тем, что диагностические сыворотки метят радиоак­тивной меткой, а результат учитывают при помощи счетчика радиоактивности.

Общий вывод (сделайте вывод об экспресс-диагностике и серодиагностике, их возможностях, достоинствах, недостатках):

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Задачи, решаемые с помощью серодиагностики:

1______________________________________________________________

2______________________________________________________________

3______________________________________________________________

ВАКЦИНЫ

	Живые	Убитые	Синтетические	Анатоксины
Содержат
Получены путем
Применяются для
Примеры

Аутовакцина - _______________________________________________________ ____________________________________________________________________

Комбинированная вакцина - _________________________________________ ____________________________________________________________________

Ассоциированная вакцина - __________________________________________ ____________________________________________________________________

Сорбированная вакцина - ___________________________________________ ____________________________________________________________________

СЫВОРОТОЧНЫЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

Сыворотка - ________________________________________________________ ____________________________________________________________________

Гамма-глобулин - ___________________________________________________ ____________________________________________________________________

Моноклональные антитела - _________________________________________ ____________________________________________________________________

Схема получения моноклональных антител:

Применение моноклональных антител:

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для экстренной специфической профилактики используют - ___________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для заблаговременной специфической профилактики используют - ____ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Для вакцинотерапии используют - __________________________________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________

ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ

Иммуномодуляторы - _______________________________________________ ____________________________________________________________________

Примеры иммуномодулирующих препаратов:

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Занятие № 9 Дата______________