Лекция 4
.pdfТема: ОРГАНИЗАЦИЯ НАСЛЕДСТВЕННОГО ММААТТЕЕРРИИААЛЛАА
nЭволюция понятия "ген".
o Доказательства роли ДНК в передаче наследственной информа-
ции.
p Гипотеза "один ген - один фермент".
q Строение и функции нуклеиновых кислот.
r Центральная догма молекулярной биологии.
s
t Генетический код и его свойства.
u
c Ген - участок молекулы ДНК, определяющий последовательность
аминокислот в полипептиде или последовательность нуклеотидов в РНК. 1865г. Мендель – наследственные задатки организма.
Начало XX в. Вейсман, Бэтсон - гены стабильны и неизменяемы. 1901г. деФриз– самопроизвольность измененийнаследственныхзадатков. 1902г. Бовери и Сеттон - связь наследственных факторов с хромосомами. 1909г. Иогансен – понятие "ген".
1911г. Морган – гены расположены в хромосомах. 1925г. Надсон и Филиппов - индуцированные мутации.
1928 г. Н. К. Кольцов – ген – это участок белковой молекулы. 1928 г. Гриффитс – опыты по трансформации бактерий. 1941 г. Бидл и Татум – гипотеза "один ген – один фермент". 1952г. Циндер и Ледерберг – опыты по трансдукции вирусов.
1953г. Уотсон и Крик – химическая природа гена (модель строения ДНК). В конце 50-х годов XX века С. Бензер - ген дискретен (имеет субъеди-
ницы: мутон, рекон, цистрон.
В 60-е годы XX века Ниренберг, Очоа, Корана – генетический код.
2
d1928 г. Гриффитс – опыты по трансформации бактерий.
1944г. Эйвери установил химическую природу вещества, трансформирующего наследственные свойства бактерий. Свойство вирулентности от одного штамма пневмококков к другому передается фрагментами
ДНК.
Трансформация - способность штамма бактерий встраивать участки ДНК другого штамма и
приобретать при этом его свойства.
3
1952г. Циндер и Ледерберг – опыты по трансдукции бактерий.
Трансдукция - способность бактериофагов переносить фрагменты ДНК от одного штамма бактерий к другому и передавать соответствующие свойства.
Триптофан- |
Триптофан- |
|||
синтезирующий |
||||
несинтезирующий |
||||
штамм+ |
|
|
||
|
|
штамм |
||
бактериофаг |
||||
(лизогенный) |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Бактериальный фильтр
Трансформация и трансдукция доказали роль ДНК в передаче наследственной информации.
4
e В 1941 г. Бидл и Татум установили, что гены детрмини-
руют синтез ферментов, которые через клеточный метаболизм влияют на развитие морфологических и физиологических признаков. Они предложили гипотезу:
Один ген - один фермент
Гипотеза оказалась не совсем верной и в настоящее время она трактуется следующим образом:
Один ген - один полипептид
так как ген не всегда детерминирует синтез целой белковой молекулы, а чаще всего одной полипептидной цепочки, из совокупности которых образуется фермент.
5
|
|
f НК - это биополимеры построенные из нуклеотидов. |
5′ |
3′ |
|
|
|
Согласно модели Уотсона и Крика (1953 г.), ДНК состоит из |
|
|
|
2 полинуклеотидных цепей, закрученных вокруг общей оси с |
|
|
|||
|
|
|
образованием двойной спирали, d=1,8-2,0 |
|
|
|
|
|
нм. Расстояние между нуклеотидами в цепи = |
|
|
|
|
|
3,4 А. |
|
|
|
|
|
Нуклеотид ДНК состоит из: |
|
|
|
|
|
1) пятиуглеродного сахара - дезоксирибозы, |
3′ |
5′ |
|
|
|
2) остатка фосфорной кислоты, |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3) азотистого основания (аденин, тимин, гуанин, цитозин). |
||
|
|
|
Основу каждой спирали формирует сахаро-фосфатный |
||
5′ |
|
|
остов, образованный фосфодиэфирными связями, рас- |
||
|
|
положенными между С3′ дезоксирибозой одного нуклео- |
|||
|
|
|
|||
4′ |
|
1′ |
тида и С5′другого. Цепи антипараллельны, т. е. направле- |
||
|
3′ |
2′ |
ния образования связей в них противоположны: в одной |
||
|
|
цепи от 5′ к 3′, в другой от 3′ к 5′. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
6 |
Азотистые снования нуклеотидов, присоединенные к С1′ дезоксирибозы, направлены
внутрь спирали, между ними возникают водородные связи, поддерживающие вторичную структуру молекулы ДНК. Химическая природа азотистых оснований разная: пурины – аденин (А) и гуанин (Г), пиримидины – тимин (Т) и цитозин (Ц). Образование водородных связей строго упорядочено и происходит в соответствии с принципом комплементарности: между А и Т образуется 2 связи (А=Т), между Г и Ц – 3 (Г≡Ц).
Комплементарность лежит в основе закономерностей нуклеотидного состава ДНК (правила Чаргафа):
¾А=Т и Г=Ц;
¾А+Г = Ц+Т;
Свойства ДНК: репликация и репарация.
Функции ДНК: хранение и воспроизведение генетической информации.
7
РНК представляет собой полинуклеотид. Структура РНК сходна с ДНК, но имеются следующие отличия: вместо дезоксирибозы - рибоза; вместо тимина - урацил; РНК представлена 1 цепочкой (у вирусов - двумя).
А |
т-РНК составляют 10-20% всей РНК клетки, состоит из |
|
75-95 нуклеотидов. По форме молекула напоминает “лист |
||
Ц |
||
Г Ц |
клевера”, образована короткими двуххцепочечными фраг- |
|
|
ментами, (“стебли”); другие участки остаются одноцепочеч- |
|
|
ными, формируя “петли”. Антикодоновая петля имеет специ- |
|
|
фический триплет (антикодон). Акцепторный стебель – место |
|
|
прикрепления транспортируемой АК. Функция т-РНК: транс- |
|
|
порт АК из цитоплазмы в рибосомы. |
|
|
и-РНК составляют 3-4% от всей РНК. Они переносят |
информацию от гена к рибосомам, выполняя роль матриц для синтезируемого полипептида. И-РНК состоит из 1 цепи, длина которой зависит от длины полипептида, который должен синтезироваться на этой матрице.
р-РНК составляет 80-85% от всей РНК. Участвует в формировании рибосом и обеспечивает контакт и-РНК и т-РНК в процессе трансляции.
8
gПуть передачи информации от ДНК к РНК и белку, Крик (1958) назвал
"центральной |
догмой |
|
|
|
ДНК |
РНК |
белок |
||
молекулярной биологии": |
|
|
|
В 1960 г. Жакоб и Моно высказали предположение, что такая гипотеза неверна, так как р-РНК не может служить матрицей для сборки белка, и только и-РНК является посредником между ДНК и белоксинтезирующей системой. Открытие механизма репликации ДНК и обнаружение ДНК-зависимой
РНК-полимеразы |
изменили |
|
|
|
||
Транскрипция |
Трансляция |
|||||
формулу догмы: |
|
|
||||
|
|
ДНК |
и-РНК |
белок |
||
В 1975 г. Дульбеко, Темин и |
||||||
Репликация |
|
|
||||
Балтимор открыли |
явление |
|
|
|||
|
|
|
||||
обратной транскрипции (пе- |
|
|
|
|
||
|
Транскрипция |
Трансляция |
||||
редачи информации от и- |
|
|||||
ДНК |
и-РНК |
белок |
||||
РНК к ДНК с помощью об- |
||||||
|
Обратная |
|
|
|||
ратной транскриптазы |
(ре- |
Репликация транскрипция |
|
|
||
вертазы)), открытой у РНК- |
|
|||||
содержащих вирусов и эукариотических клеток. |
||||||
|
|
|
|
|
9 |
h Репликация ДНК - протекает в S период интерфазы полуконсерва-
тивным способом. Новая молекула ДНК состоит из 1 «старой» цепочки и 1 «новой».
Репликация одновременно начинается в нескольких местах молекулы ДНК. Участок ДНК от точки начала одной репликации до точки начала другой,
|
|
|
|
″Материнская″ |
называется репликоном. |
Нуклеоид бактерий |
|
|
|
|
содержит 1 репликон, хромосомы эукарит - много |
||
5′ |
3′ |
|
||||
|
спиральДНК |
|||||
|
репликонов. |
|
||||
|
|
|
″Дочерние″ |
|
||
|
|
|
Репликон имеет контролирующие элементы: |
|||
|
|
|
спиралиДНК |
|||
|
|
|
Репликационная |
точка начала (инициируется репликация), точка |
||
|
|
|
вилка |
окончания (репликация останавливается). Точка, в |
||
|
|
|
|
ДНК-полимераза |
которой происходит репликация - репликационная |
|
|
|
″Материнская″ |
вилка. Она движется вдоль молекулы ДНК от точки |
|||
|
|
спиральДНК |
||||
|
|
|
|
|
начала. |
|
|
|
В |
|
каждой вилке |
синтез новых цепей ДНК |
ведут одновременно |
несколько ДНК-полимераз, движущихся в противоположных направлениях. Это антипараллельный и прерывистый принцип синтеза.
10