.2. Приборы для сбора протозойного планктона и бентоса

Независимо от типа водоема для учета планктонных простейших пробы отбираются батометром Рутнера (можно пользоваться и другими батометрами с вертикально откидывающимися крышками). Батометр крепят на шнуре (тросе лебедки) с метками (лучше всего цветными нитками) через каждые 50 см, чтобы батометр можно было опускать на соответствующую глубину. Потом воду вливают в литровые пластмассовые бутылки, закрывая их плотно пробкой. (На бутылки заранее приклеивают номера.) После отбора проб номера бутылок записываются в полевой дневник (см. образец записи в приложении 7). Бутылки до обработки в лаборатории помещают в ящики с термоизоляцией. При исследованиях микробентоса используются только верхний слой грунта толщиной 1 см, в котором обитает основная часть протозойного бентоса, и прилегающий к нему слой воды (высотой 1-2 см). Для количественного учета протозойного бентоса рекомендуются трубчатые приборы, в частности микробентометр МБ-ТЕ [7] и микробентометр С-1 конструкции Института биологии внутренних вод АН СССР. Работа микробентометра МБ-ТЕ (рис.4.1) основана на доставке со дна водоема иловых монолитов со слоем придонной воды. Для большего удобства в данной конструкции микробентометра в металлический цилиндр, извлекающий монолит, вставлен цилиндр, изготовленный из прочного плексигласа. Плексигласовый цилиндр с помощью тонкой резиновой ленты плотно закрепляется в металлическом цилиндре. Наконечник металлического, а также плексигласового цилиндров должен быть отточен. Чтобы кромки входа плексигласового цилиндра не препятствовали проходу цилиндров в грунт, в стенке металлического цилиндра сделаны вырезы, на которые опирается наконечник плексигласового цилиндра.

Рис.4.1. Микробентометр МБ-ТЕ

Рис.4.1. Микробентометр МБ-ТЕ

Микробентометр С-1 состоит из прозрачной трубки, изготовленной из синтетического материала и снабженной в верхней части вакуумным замыкателем и дополнительным грузом [4]. Оба упомянутых прибора пригодны для работы на разных грунтах, кроме каменистых и чисто песчаных, от уреза до глубины 30 м. На мелководье, где грунты песчаные, можно пользоваться стеклянными цилиндрами микробентометра МБ-ТЕ, которые вдавливаются в грунт рукой, затем с открытого конца плотно закрываются пробкой и очень осторожно извлекаются вместе с монолитом, под который в трубку быстро вставляется пробка. Плексигласовые цилиндры с пробами, закрытые снизу пробкой, помещаются до обработки в лаборатории в ящик с термоизоляцией (рис.4.2). В ящике должны быть сделаны гнезда для каждого цилиндра, т.е. они должны быть закреплены. На каждом цилиндре должен быть заранее проставлен номер, который пишется на бумаге, наклеивающейся на цилиндр с помощью липкой полиэтиленовой ленты, защищающей к тому же ее от промокания. Номер цилиндра записывается в полевой дневник (см. образец записи в приложениии 8).

Рис.4.2. Ящик для транспортировки проб с протозойным бентосом

Рис.4.2. Ящик для транспортировки проб с протозойным бентосом

Как планктонные, так и бентосные пробы должны быть обработаны в кратчайший срок в лаборатории, так как на численность простейших сильно влияют не только изменения температуры, но и присутствие планктонных рачков и коловраток.

МЕТОДЫ ОБРАБОТКИ ПРОТОЗОЙНОГО ПЛАНКТОНА И БЕНТОСА

Установление видовой принадлежности, а также количественный учет простейших проводят на живом материале. Протозойный планктон в лаборатории просчитывают под бинокуляром после концентрации на мембранных фильтрах или без предварительной обработки. Планктонные пробы концентрируют путем фильтрации на ультрамембранных фильтрах N 6 (с порами 1-2 микрона) или "Сынпор" (с порами 2,5 микрона). Для фильтрации используют фильтровальный аппарат типа Зейтца, изготовленный из плексигласа с удлиненной воронкой (диаметр воронки фильтра - 35 мм, фильтра - 30 мм) (рис.4.3). (Фильтруют без вакуума!) Когда над фильтром остаются около 10 мл воды, фильтрацию прекращают, сконцентрированную пробу слегка взбалтывают и выливают в стаканчик, куда помещают также использованный фильтр. Фильтр слегка прополаскивают. Всю полученную пробу немедленно просчитывают, перенося порциями примерно по 3 мл в камеру Богорова (рис.4.4), в живом состоянии под бинокуляром при увеличении в 50 раз. Незнакомые формы отлавливают с помощью микропипетки, помещают в маленькой капле на предметное стекло и определяют под микроскопом после просчета количественной пробы. Чтобы капля с инфузориями на предметном стекле не высохла, стекла помещают во "влажную камеру" - дно чашки Петри покрывают влажной фильтровальной бумагой соответствующего размера, а чашку закрывают.

Рис.4.3. Фильтровальный аппарат Зейтца с удлиненной воронкой

Рис.4.3. Фильтровальный аппарат Зейтца с удлиненной воронкой (из прозрачного плексигласа)

Рис.4.4. Камера Богорова (по И.А.Киселеву)

Рис.4.4. Камера Богорова (по И.А.Киселеву)

Движение инфузорий можно ограничивать свежеприготовленным клеем из айвовых косточек, очень легким нагреванием (соблюдая осторожность, чтобы капля не испарилась) предметного стекла над спиртовой лампой, обработкой парами осмиевой кислоты не более 2-3 с (так как при более длительной обработке происходит фиксация простейших). Камеру Богорова можно заменить самодельной камерой, а именно, в расплавленный парафин помещают все четыре края предметного стекла с таким расчетом, чтобы в середине осталась камера шириной примерно 0,5 см (рис.4.5).

Рис.4.5. Камера для обработки протозойного планктона и бентоса

Рис.4.5. Камера для обработки протозойного планктона и бентоса (предметное стекло с парафином)

Расчет количества инфузорий в 1 л пробы проводится исходя из объема профильтрованной воды, который измеряется после фильтрации. Поэтому колбу Бунзена, в которую вставляется воронка, нужно заранее проградуировать, чтобы сразу определить объем профильтрованной воды. Объем воды, самотеком проходящий через фильтр, зависит как от трофности водоема, так и от мутности воды и времени года. Для условий олиготрофного водоема* достаточно профильтровать 500-1000 мл, для эвтрофных водоемов этот объем сокращается до 200-300 мл, а в период массового развития водорослей - до 100-150 мл. При наличии в воде большого количества простейших, а также механической взвеси (в районах поступления сточных вод), учет протозойного планктона следует проводить без предварительной фильтрации, используя при этом не менее 50 мл воды. Можно просматривать этот объем воды порционно в камере Богорова, однако удобнее применять камеру Сорокина типа пенала глубиной 1,5 мм. Организмы просчитывают в 10-20 полях зрения при увеличении в 50 раз. Потом пересчитывают количество простейших на 1 л (или 1 м) воды. Результаты записывают в протокольную карточку (см. приложение 9).________________ * По биологической классификации все водоемы делят на три большие группы: 1) эвтрофные (кормные), с богатой органическими веществами водой, пышной литоральной растительностью, высокой плотностью планктонных популяций; 2) олиготрофные (малокормные), характеризующиеся значительной глубиной, скудной литоральной растительностью, низкой плотностью планктона; 3) дистрофные (недостаточно кормные), представляющие неглубокие заболоченные водоемы с торфянистыми отложениями на дне. В бентосных пробах сначала оценивают характер грунта. Потом с помощью резиновой груши, соединенной со стеклянной трубкой, осторожно, чтобы не взбалтывать поверхностный слой грунта, отсасывают воду (рис.4.6), оставляя над грунтом слой воды высотой примерно 5-10 см. Далее пипеткой с отрезанной суженной частью или стеклянной трубочкой площадью сечения 0,5 смиз цилиндра извлекается часть пробы с контактного слоя вода-грунт. При этом в пипетку должны входить сантиметровый слой придонной воды и верхний слой грунта. Содержимое переносят в камеру Богорова и разбавляют профильтрованной водой, слитой из поверхностного слоя цилиндра. Потом под бинокуляром или под микроскопом с малым увеличением, используя основные пособия [3-6, 8-17], проводят определение видового состава и количества простейших. Методика определения видового состава такая же, как описанная выше методика определения видового состава планктонных простейших. Подсчет бентосных простейших из одного цилиндра всегда проводит не менее трех раз.

Рис.4.6. Резиновая груша для отсасывания воды из проб микробентоса

Рис.4.6. Резиновая груша для отсасывания воды из проб микробентоса

Методы отбора планктонных организмов.

Рис.5.3. Качественная сеть Апштейна

Рис.5.3. Качественная сеть Апштейна [10]

Таблица 5.1