Азитромицин

Азитромицин (ФС 42-0213-07)

(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезок-си-3-C-метил-3-O-метил--L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-[[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)--D-ксило-гексопирано-зил]окси]-2-этил-1-окса-6-аза-циклопентадекан-15-он, дигидрат

С₃₈H₇₂N₂O₁₂^.2Н₂О М.м. 785,0

С₃₈H₇₂N₂O₁₂ М.м. 749,0 (безводный)

Cодержит не менее 94,0 % и не более 102,0 % С₃₈H₇₂N₂O₁₂ в пересчете на безводное, не содержащее органических растворителей вещество.

1 мг С₃₈H₇₂N₂O₁₂ (азитромицина) соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца азитромицина.

Если в спектрах обнаруживаются различия, регистрируют спектры растворов субстанции и азитромицина стандарта с концентрацией 90 г/л в хлористом метилене.

Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора (раздел «Количественное определение») должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора азитромицина стандарта.

Удельное вращение. От –45 до –49 º в пересчете на безводное, не содержащее органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в этаноле).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл этанола должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B₉.

рН. От 9,0 до 11,0 (0,1 г субстанции растворяют в 25 мл метанола и разбавляют водой до 50 мл).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Количественное определение».

Хроматографируют испытуемый раствор А, раствор сравнения А и раствор сравнения Б. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора А должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания пика азитромицина.

На хроматограмме испытуемого раствора А площадь пика примеси В должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 2,0 %); площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %); суммарная площадь пиков примесей должна быть не более пятикратной площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 5,0 %).

Хлориды. 0,75 г субстанции встряхивают с 25 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01 % в субстанции).

Вода. Не менее 1,9 % и не более 6,5 %. Определение проводят методом К.Фишера из точной навески около 0,5 г субстанции.

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Буферный раствор с рН 6,5. 34,84 г калия фосфата двузамещенного растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 6,5 85 % фосфорной кислотой, разбавляют водой до 1000 мл и перемешивают.

Испытуемый раствор А. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в смеси ацетонитрил – вода (2:3), доводят объем раствора той же смесью до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор Б. 5 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, доводят объем раствора смесью ацетонитрил – вода (2:3) до метки и перемешивают.

Стандартный раствор А. Около 0,05 г (точная навеска) стандартного образца азитромицина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в смеси ацетонитрил – вода (2:3), доводят объем раствора той же смесью до метки и перемешивают.

Раствор сравнения А. 1 мл стандартного раствора А разбавляют смесью ацетонитрил – вода (2:3) до 25 мл.

Раствор сравнения Б. 0,002 г стандартного образца примеси В азитромицина (3-дезоксиазитромицин; стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 25 мл смеси ацетонитрил – вода (2:3).

Раствор для проверки пригодности системы. 0,002 г азитромицина и 0,002 г стандартного образца примеси А азитромицина (6-дезметил-азитромицин; стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 20 мл раствора сравнения Б.

Хроматографические условия

Колонка 250 × 4,6 мм с октадецилсилил силикагелем (С18), 5 мкм

Температура 70 ºС

Подвижная буферный раствор с рН 6,5 – ацетонитрил – вода фаза (ПФ) (2:7:11)

Скорость потока 1 мл/мин

Детектор спектрофотометрический, 215 нм

Объем пробы 100 мкл

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика азитромицина около 26 мин. Относительное время удерживания пика примеси А около 0,42, пика примеси В около 1,7. Разрешение (R) между пиками азитромицина и примеси А должно быть не менее 7,0.

Пять раз хроматографируют стандартный раствор А. Относительное стандартное отклонение для площади пика азитромицина должно быть не более 2,0 %.

Хроматографируют испытуемый раствор Б и стандартный раствор А и определяют площади пиков азитромицина.

Содержание С₃₈H₇₂N₂O₁₂ в процентах (Х) вычисляют по формуле:

S₁ × а₀ × Р × 2

Х = = ——————— ,

S₀ × а₁

где S₁ - площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора Б;

S₀ - площадь пика азитромицина на хроматограмме стандартного раствора А;

а₁ - навеска субстанции в граммах;

а₀ - навеска азитромицина стандарта в граммах;

Р - содержание С₃₈H₇₂N₂O₁₂ в азитромицина стандарте в процентах.

Хранение. Список Б. В сухом месте.