IV. Методические указания студентам по подготовке к занятию

1. Организационно-методические указания по подготовительной части самостоятельной работы.

При подготовке к практическому занятию используется рекомендованная учебная литература (см. Раздел III.Учебно-материальное обеспечение, литература), а также конспекты лекций по теме «Клетка», образцы рисунков и таблицы (см. Раздел III.Учебно-материальное обеспечение).

2. Методические указания студентам по реализации целевых установок подготовки к занятию.

Студентам следует последовательно изучить общий план структурной организации клеток эукариот; основные постулаты клеточной теории; современные представления о значении, строении и химическом составе клеточных мембран. Особенности организации плазмолеммы, ее производные (микроворсинки, реснички, базальная исчерченность); химический состав гиалоплазмы; классификацию органелл, морфофункциональную характеристику мембранных (комплекс Гольджи, лизосомы, митоходрии, пероксисомы, эндоплазматическая сеть) и немембранных (рибосомы, микротрубочки, центриоли, микрофиламенты) органелл; понятие об органеллах специального назначения (на примере миофибрилл, нейрофибрилл, жгутиков, ресничек); виды и характеристика клеточных контактов; классификация и строение неклеточных структур. Изучить общий план строения клеточного ядра: место расположения в клетке, форма, размеры, хроматин, его уровни компатизации, половой хроматин, далее строение и функции ядрышка, кариолеммы и кариоплазмы; клеточный цикл, митоз, морфофункциональную характеристику фаз митоза. Эндорепродукция. Включения, их классификация, примеры, методы выявления. Виды смерти клетки, морфологические отличия некроза и апоптоза.

Для закрепления учебного материала студентам предлагается самостоятельно выполнить следующие задания:

1.Зарисовать в альбоме строение митохондрий, комплекса Гольджи, эндоплазматической сети, используя учебные электронные микрофотографии, и назовите функциональное значение структур.

2.Составить схему классификации структур клетки по функциональному признаку, отметив роль каждого типа органелл.

3.Составить схемы взаимоотношений органелл: эндоплазматической сети и комплекса Гольджи, комплекса Гольджи и лизосомально-вакуолярного аппарата.

4. Составить схему классификации структур ядра по функциональному признаку, отметив роль каждого компонента.

5. Составить схему классификации пигментных включений по химической природе, приведите примеры каждого вида.

6. Зарисовать схему клеточного цикла для различных типов клеток (постоянно делящихся, факультативно делящихся и терминально дифференцированных), привести примеры каждого типа.

3. Задачи на предстоящее занятие.

Студент должен быть подготовлен к занятию по теоретическому блоку (используя основную и дополнительную учебную литературу, а также конспективные материалы лекции по данной теме). С собой на занятии необходимо иметь рабочую тетрадь, лекционный конспект, альбом, карандаши. На первом часе занятия студент должен быть готов ответить с места или у доски, дополнить ответы других студентов, принять участие в дискуссии при разборе учебного материала, задать вопросы, требующие разъяснения, у преподавателя. На втором часе занятия САМОСТОЯТЕЛЬНО изучить электронные микрофотографии:

• гранулярная эндоплазматическая сеть аденоцита гипофиза;

• митохондрии в нейросекреторных клетках;

• комплекс Гольджи эпителиальной клетки ворсинки тонкой кишки;

• реснички мерцательной эпителиальной клетки трахеи;

• эпителий крипт тонкой кишки;

• фагоцитоз;

• лизосомы в нейросекреторной клетке;

• ацинозная клетка поджелудочной железы;

Самостоятельная работа на практическом занятии: изучить и зарисовать следующие препараты:

1. Мазок крови человека Окраска гематоксилином и эозином. На малом, а затем и на большом увеличении микроскопа увидеть и зарисовать в альбомах округлые безъядерные клетки розового цвета – эритроциты.

2. Отростчатая нервная клетка. Срез спинного мозга. Импрегнация нитратом серебра. Под малым увеличением в передних рогах найти самые крупные клетки, имеющие звездчатую или треугольную форму. Под большим увеличением рассмотреть и зарисовать одну из клеток, обратив внимание на нерезко контурированное светлое ядро с крупным ядрышком и на характер распределения нейрофибрилл в перикарионе и отростках.

3. Симпласт. Срез языка. Окраска железным гематоксилином. Под малым увеличением видно, что главную массу языка образуют перерезанные в различных направлениях мышечные волокна (симпласты). Каждое мышечное волокно содержит большое количество богатых хроматином удлиненных ядер, лежащих по периферии волокна, непосредственно под сарколеммой. Под большим увеличением в мышечном волокне различима продольная и поперечная исчерченность. Зарисовать 2-3 мышечных волокна.

4. Неклеточные структуры (межклеточное вещество). Срез гиалинового хряща. Окраска гематоксилином и эозином. При малом, а затем и при большом увеличениях обратить внимание на наличие между клетками базофильного межклеточного вещества.

5. Сетчатый аппарат Гольджи в нервных клетках спинального ганглия. Окраска осмиевой кислотой. При малом увеличении видно множество характерных, довольно крупных нервных клеток, имеющих округлую форму и отделенных друг от друга прослойками соединительной ткани. Пластинчатый комплекс при большом увеличении представляет собой непрерывную широкопетлистую сеть, интенсивно окрашенную осмиевой кислотой в черный цвет и расположенную в цитоплазме вокруг ядра. Зарисовать несколько клеток, выделив черным карандашом комплекс Гольджи.

6. Низкий и высокий призматический эпителий канальцев почки. Окраска гематоксилином и эозином. Под малым увеличением найти поперек срезанные трубочки с хорошо различимым просветом – почечные канальцы. Под большим увеличением рассмотреть строение клеток, выстилающих трубочку изнутри, обратив внимание на кубическую и цилиндрическую форму клеток, на тесный контакт их друг с другом, на круглую или овальную форму ядра. Зарисовать канальцы, выстланные кубическим и цилиндрическим эпителием.

7. Всасывающая каемка микроворсинок и митохондрии в эпителиальных клетках кишечника. Окраска кислым фуксином по Альтману. Под малым, а затем и под большим увеличением виден пласт высоких и узких цилиндрических эпителиальных клеток. На апикальной поверхности эпителиальных клеток видна более ярко окрашенная в темнорозовый цвет четко контурированная кайма. В цитоплазме эпителиоцитов заметны многочисленные темнорозовые округлые зернышки или короткие палочки – митохондрии. Зарисовать демонстрационный препарат.

8. Включения гликогена в гепатоцитах. ШИК-реакция.Найдите плотно расположенные полигональные клетки (гепатоциты). В цитоплазме найдите скопления гликогена, имеющие фиолетовый или бордовый цвет. Изучите и зарисуйте одну из клеток под большим увеличением, обозначив перечисленные структуры: цитоплазму, зерна гликогена.

9. Пигментные включения в клетках кожи головастика. Неокрашенный препарат. Под малым увеличением найдите скопления крупных клеток коричневатого цвета. Под большим увеличением изучите структуру и зарисуйте одну из пигментных клеток, обратив внимание на обильные цитоплазматические включения коричневого пигмента меланина, имеющие вид компактных зернистых скоплений. Обозначьте названные структуры.

10. Жировые клетки соединительной ткани. Окраска суданом III. Под малым увеличением рассмотрите общую структуру ткани, состоящей из относительно крупных, округлых клеток. Под большим увеличением детальнее изучите строение одной из клеток, обратив внимание на цитоплазматические включения, имеющие вид крупной липидной капли, оттесняющей цитоплазму на периферию. При докраске препарата гематоксилином визуализируется эксцентрично расположенное палочковидной формы, интенсивно окрашенное ядро. На обычных гистологических препаратах липидные включения имеют вид пустот в связи с растворением жировых веществ в процессе гистологической обработки материала спиртами и ксилолом. Зарисуйте 2-3 клетки.

11. Митоз растительной клетки. Корешок лука. Окраска железным гематоксилином. На малом увеличении обнаруживается скопление клеток удлиненной формы, вплотную прилегающих друг к другу. Под большим найдите клетки на разных стадиях митотического деления. Найдите клетку, у которой хроматин (хромосомы) образует скопление в виде клубка - стадия профазы, клетку с хромосомами в виде “звезды” - стадия метафазы, клетку с концентрацией дочерних хромосом (хроматид) на полюсах - стадия анафазы. Сравните найденные митотические клетки с дифференцированными интеркинетическими клетками в других участках препарата. Зарисуйте и обозначьте найденные клетки под большим увеличением.

12. Митоз (кариокинез) животной клетки. Окраска железным гематоксилином.

При слабом увеличении находим делящиеся клетки, на большом увеличении рассмотрите и зарисуйте клетки на разных стадиях кариокинеза.

13. Гликоген в клетках печени. Окраска кармином по методу Беста докраска ядер гематоксилином.

На препарате при слабом, а затем и при сильном увеличении легко найти крупные клетки, в которых расположены глыбки гликогена различной формы, окрашенные кармином в ярко красный цвет. Зарисовать 1-2 клетки при сильном увеличении.