Изучение свойств PGEk СОСТАВ КОМПЛЕКСОВ

Зависимости относительной удельной флуоресценции клеток линии А431 (кривые 1 и 2) и К562 (кривые 3 и 4) от молярного избытка PGEk в смесях с олигонуклеотидами TMS (кривые 1 и 3) и TMO (кривые 2 и 4). Концентрация олигонуклеотидов = 200 нМ.

Изучение свойств PGEk

In vitro

Универсальность и селективность

Изучение свойств PGEk

In vitro

Внутриклеточная локализация

Микрофотографии клеток линии SCOV3 после 24 часовой инкубации с комплексом PGEk- TMS-5'FAM.

- ядра - олигонуклеотид

СУПЕРПОЗИЦИЯ

Изучение свойств PGEk

In vitro

Эффективность

•Цитотоксическая активность комплексов PGEk с фосфотиоатными олигонуклеотидами-антисенсами в отношение В-клеточной лимфомы Namalva. Инкубация 120 час., 2-кратное добавление.

Изучение свойств PGEk

In vitro

Защита олигонуклеотидов от внутриклеточной деградации

•Определение цитотоксической активности комплексов антисенса AS-TMO-PO и его фосфотиоатного аналога (AS-TMO-PS) с PGEk в отношении культуры опухолевых клеток карциномы молочной железы человека (линия MCF-7).

Изучение свойств PGEk Комплекс PGEk-ДНК. Модели

Модели взаимодействия PGEk с одноцепочечной и дуплексной ДНК (на основе расчета для ДНК- связывающего домена PGEk в вакууме.)

Изучение свойств PGEk

Комплекс PGEk-ДНК. Инструментальный анализ.

•Образование комплексов регистрировали независимыми методами, анализируя динамику процесса по данным КД-спектроскопии (Метод А), флуориметрии Trp- остатков PGEk (Метод B) и

поляризованной флуориметрии этидия (Метод C).

•PGEk быстро образует устойчивые комплексы с линейными, дуплексными и квадруплексными олигонуклеотидами.

•Кооперативный механизм связывания. Взаимодействие боковых поверхностей молекул вектора.

•Константы связывания олигонуклеотид- PGEk

•

•PGEk частично разворачивает четвертичную спираль G- квадруплекса, т.е. обладает некоторым хеликазным свойством по отношению к структуре внутримолекулярного G-квадруплекса.

Изучение свойств PGEk СОСТАВ КОМПЛЕКСОВ PGEk-ДНК.

Изучение свойств PGEk СОСТАВ КОМПЛЕКСОВ PGEk-ДНК.