4 курс / Общая токсикология (доп.) / Toxikologicheskaya_khimia_Ekzamen

64.Химико-токсикологический анализ производных 1,4-бензодиазепина: оксазенам, нитразепам, диазепам, хлордиазепоксид - по нативным веществам и метаболитам.

Исследование производных 1,4-бснзодиазспина по нативным веществам является более сложным и проводится в том случае, если в результате исследования по продуктам гидролиза получен положительный результат.Изолирование и очистка. Для изолирования нативных соединений из биологических объектов используют модифицированный метод Васильевой (в качестве экстрагента используют подкисленную хлористоводородной кислотой воду). Экстракцию производных 1,4- бснзодиазспина проводят органическим растворителем из кислой среды при рН=2 (т.к. ряд этих соединений является очень слабыми основаниями) и из щелочной среды при рН=9-10.

Идентификация. Для обнаружения препаратов производных 1,4- бензодиазепина проводят исследование элюатов методом ТСХ в общих и частных системах растворителей, при этом возможно разделение нативных веществ и их метаболитов. Детектирование веществ на хроматограмме проводят: 1)по окраске пятен с реактивом Драгендорфа (нативные вещества и метаболиты основного характера),

2)по реакции образования азокрасителя (бензофеноны, имеющие свободную первичную ароматическую аминогруппу).Реакцию образования азокраситсля проводят на хроматограмме сразу (обнаруживаются продукты метаболизма - бензофеноны) и после проведения кислотного гидролиза непосредственно на пластинке: на стартовую линию стеклянной пластинки с закрепленным слоем силикагеля наносят исследуемый раствор и стандартные растворы метчиков в виде точек, опрыскивают концентрированной хлористоводородной кислотой, накрывают пластинку предметным стеклом, помещают её в сушильный шкаф на 30 минут при 120°С, вынимают, охлаждают, помещают в систему растворителей бензол (нативные вещества и продукты метаболизма при этом гидролизуются до аминобензофенонов). После пробега фронта растворителей пластинку высушивают до полного удаления запаха растворителей, проявляют 2 н раствором хлористоводородной кислоты, 0,1% раствором натрия азотистокислого, раствором (3-нафтола в 10% растворе натрия гидроксида. Пятна бензофенонов проявляются в виде оранжевых пятен. Заключение об обнаружении производных 1,4-бензодиазепина дают после сравнения значений Rf исследуемых веществ и стандартных. После элюирования веществ проводят исследование в УФ-области спектра. В спектрахнативных соединений производных 1,4-

бснзодиазспина имеются три полосы поглощения: 200-215 нм, 220-240 нм (обусловлены наличием вструктуре веществ фенильных радикалов), 290-

330 нм (поглощение азомстиновой группы). Характер спектров поглощения может меняться в зависимости от значения pH среды в связи с протонированисм и дспротонированисм атомов азота, входящих в цепь сопряжения, а также за счет лактим-лактамной таутомерии.Для исследования извлечений рекомендуются методы ГЖХ, ВЭЖХ, позволяющие эффективно разделить нативные вещества и метаболиты, сочетать возможност ипроведения качественного и количественного анализа в одной пробе.Для количественного определения производных 1,4-бснзодиазспина можно использовать методы спектрометрии в УФ-области спектра (по собственному поглощению) и в видимой области спектра (по реакции образования азокраситсля).

42.Способы и методы очистки извлечений и экстрактов из биологического материала, содержащих барбитураты.

Выбор метода счистки зависит, в основном, от количества изолированного вещества и до некоторой степени от его химического строения. При больших количествах барбитуратов чаще используют экстракционный метод очистки и микросублимацию (возгонку).

Экстракционная очистка основана на способности барбитуратов к имцдо- имидольной таутомерии и на различной растворимости имидной и имедольной форм в воде и органических растворителях. Используя реакстракцию барбитурата раствором гидроксида натрия из органической фазы, тем самым освобождаются от сопутствующих веществ, не растворимых в воде (натриевые соли хорошо растворимы в воде и извлекаются ею). Последующее выделение барбитурата из водной фазы проводят после подкисления водного раствора (pH 2) экстрагированием органическим растворителем При этом барбитурат в молекулярной форме извлекается органическим растворителем, а в водной фазе остаются балластные вещества, не растворимые в органическом растворителе

Микросублимация основана на способности барбитуратов возгоняться без разложения при нагревании. Возгонка проводится в нагревательной камере прибора Кофлера, либо, в упрощенном виде, с одного предметного стекла на другое, верхнее из которых охлаждается, а нижнее (с исследуемым остатком) нагревается.

При малых количествах выделенных веществ чаще используют хроматографические методы очистки (ионообменную и гель-хроматографию на колонке. ТСХ. ВЭТСХ, ВЭЖХ).

С точки зрения простоты, доступности и разрешающей способности наибольшего внимания заслуживают ТСХ, ВЗТСХ. Они позволяют не только очистить выделенные вещества от примесей, но и разделить целый ряд барбитуратов при их совместном присутствии, а также отделить барбитураты от их метаболитов и провести предварительную идентификацию по величине Rf.

43.Способы и методы очистки извлечений и экстрактов из биологического материала, содержащих алкалоиды.

Грубая очистка извлечений, содержащих алкалоиды, от балластных веществ, в частности белков, предусмотрена в некоторых методах изолирования. Так, в методе Стаса-Отто проводится осаждение белков абсолютным этанолом, а в методе В.Ф.Крамаренко - сульфатом аммония. Как правило, грубая очистка приводит к потерям алкалоидов за счет их соосаждения с белками.

К более тонким методам очистки относятся: экстракционная очистка, хроматография ,электродиализ

1)Экстракиионная очистка связана с экстракцией балластных веществ органическими растворителями из кислого водного раствора. При этом алкалоиды в виде солей остаются в водной фазе. Для выделения очищенных алкалоидов из водного раствора водную фазу подщелачивают гидроксидом аммония или натрия. При этом алкалоиды-соли переходят в алкалоиды-основания, которые экстрагируют органическим растворителем (хлороформом). Органическую фазу отделяют, растворитель испаряют, и остаток исследуют на наличие алкалоидов. При сильно загрязненных извлечениях счистку повторяют. Экстракционная очистка связана с частичными потерями алкалоидов за счет их перераспределения между водной и органической фазами. Такой вид очистки предусмотрен в методе В.Ф.Крамаренко, где балластные вещества экстрагируются из кислой водной фазы эфиром.

2)Хроматографические методы очистки являются более экономичными по сравнению с экстракционными. Используются следующие разновидности метода:

*Адсорбционная колоночная хроматография применена Л.М.Власенко для выделения и очистки морфина.

* Гель-хроматография - разновидность колоночной хроматографии (предложена В Ф.Крамаренко)

*Хроматография о тонком слое сорбента (ХТС)

*Электрофорез - применен для выделения и очистки резерпина Л.В.Песаховичем.

Наибольшего внимания из перечисленных методов очистки заслуживает ХТС благодаря своей доступности, простоте выполнения и высокой разрешающей способности.

з. Зпектоодиализ применен Н.И Вестфаль для очистки пахикарпина и стрихнина при выделении их из биологического материала. При этом в диализаторе создается электрическое поле, под действием которого ускоряется переход алкапоидов в водное извлечение через полупроницаемую мембрану, которая не пропускает крупные молекулы белков и продукты их распада, за счет чего и достигается очистка.

45.Тонкослойная хроматография в общей и частных системах растворителей, используемых в анализе лекарственных средств основного характера, при проведении общей судебно-химической экспертизы.

В тонкослойной хроматографии роль неподвижной фазы выполняет Фиксированный тонкий слой сорбента (0.1-0,5мм), содержащий определенное количество воды, нанесенный на хроматографическую пластинку из стекла, Фольги, полимера. В качестве сорбентов чаще используют силикагель и окись алюминия. Для лучшего удерживания на пластинке в сорбент добавляют связующий компонент - гипс, крахмал и др. Роль подвижной фазы выполняет индивидуальный растворитель или их смесь, так называемая «хроматографическая система».

В процессе хроматографирования. по мере того как растворитель поднимается вверх по пластинке за счет капиллярных сил, происходит разделение смеси веществ согласно их коэффициентам распределения между подвижной и неподвижной фазами.

Детектирование (обнаружение) веществ на хроматограмме проводят, в основном, следующим образом: А)визуально, если вещество имеет собственную окраску, Б)облучая пластинку УФ-светом - для веществ, обладающих флуоресценцией (свечением), или способных поглощать УФ-излучение (темные пятна на флуоресцирующем фоне), В) с помошью хромогенных реакций: бесцветные вещества переводят в окрашенные соединения, обрабатывая хроматографическую пластинку соответствующими реагентами.

Идентификацию веществ на хроматограммах проводят по коэффициенту Rf -(«эр эф», скорость фракционирования).

Rr - это величина, численно равная отношению длины пробега анализируемого вещества к длине пробега растворителя.

ТСХ-скрининг в анализе веществ основного характера, экстрагируемых хлороформом из щелочного раствора (рН 8-10) Из лекарственных веществ, имеющих определенное токсикологическое

значение, в извлечениях из щелочного раствора могут быть алкалоиды и синтетические вещества основного характера. Пластинку помещают в систему

растворителей: хлороформ – диоксан – ацетон – 25%-ный раствор аммиака (45:47,5:5:2,5). Когда растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку

вынимают, высушивают и обрабатывают реагентами в следующей

последовательности:

• 10%-ный раствор хлорида железа(III). При этом обнаруживаются

производные пиразолона и фенотиазина.

• 16%-ный раствор серной кислоты в этаноле. Обнаруживаются

производные фенотиазина.

• 10%-ная серная кислота и УФ-свет. Обнаруживается хинин.

• модифицированный реактив Драгендорфа. Обнаруживаются

соединения, содержащие в структуре третичный азот.

• 10%-ная серная кислота. Для повышения чувствительности и усиления

окраски пятен с реактивом Драгендорфа.

Если ни в одной из зон не проявилось ни одного пятна, то делают заключение о ненахождении веществ в извлечении из щелочного раствора.

46 Хроматографические методы анализа лекарственных средств. Методы высокоэффективной жидкостной хроматографии, газожидкостной хроматографии. Хроматографические скрининговые методыВ настоящее время в качестве ме-одов хроматографического скрининга наибольшее применение нашли:1.ТСХ - тонкослойная хроматография (хроматография в тонких слоях сорбента).2.ВЭТСХ - высокоэффективная тонкослойная хроматография.3)ГЖХ газожидкостная хроматография.4)ВЭХХ - высокоэффективная жидкостная хроматография Хроматографию можно рассматривать как метод разделения веществ, в основе которого лежит разница в коэффициентах распределения этих веществ между подвижной и неподвижной фазами.

Высокоэффективная жидкостная хроматография ВЭЖХ, является вариантом колоночной жидкостной хроматографии где элюент подается на колонку под большим давлением, что ускоряет проведение анализа. Разделение веществ проводится на колонках, заполненных мелкодисперсным сорбентом (силикагель, окись алюминия) или полимерным сорбентом. При работе с колонками, заполненными силикагелем, в качестве элюента используются углеводороды, иногда с добавлением небольшого количества спирта или других растворителей. В качестве детекторов обычно применяют спектрофотометрическии детектор ,Могут быгь использозаны и другие детекторы рефрактометрический, флуорометрический, ионизационно-пламенный, масс- спектрометрический, электрохимический и т.д.Выходящие из колонки вещества регистрируются на хроматограмме в виде ряда хроматографических пиков. Идентификацию веществ проводят по параметрам удерживания и спектрам . Количественное определение - по площади пика, которая пропорциональна количеству вещества в пробе. При этом предварительно строигся калибровочный график с использованием методов абсолютной калибровки или внутреннего стандарта. Метод ВЭЖХ может быть использован в качестве общего и частного скрининга Он позволяет сочетать изолирование и очистку вещества с его идентификацией и количественным определением. Значительным преимуществом этого метода перед ГЖХ является возможность анализа термолабильных нелетучих соединений как с малой, так и с большой молекулярной массой. Особенно удобен метод ВЭЖХ для работы в клинических лабораториях токсикологических центров при исследовнии биологических жидкостей. Газожидкостная хроматография ГЖХ нашла применение в анализе лекарственных веществ в качестве скринингового метода благодаря своей универсальности.Необходимым условием является переведение исследуемого вещества в летучее состояние. Метод используется в анализе барбитуратов, алкалоидов и других лекарственных веществ в качестве общего и частного скринингаИдентификация веществ проводится по относительным временам удерживания (или по индексам удерживания Ковача). Количественное определение - по высоте или площади пика с использованием метода внутреннего стандарта. Достоверность определения повышается за счет хроматографирования на колонках, обладающих различней полярностью. Детектор - пламенно-ионизационный.Подтверждающие исследования лучше проводить методами,отличающимися от скринингового, с равной или бопьшей чувствительностью: тонкослойной хроматографии, масс-спектрометрии.

41 ЧАСТНЫЕ МЕТОДЫ ИЗОЛИРОВАНИЯ ЛЕК. СРЕДСТВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ НАПРАВЛЕННОГО СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА(МЕТОД КРАМОРЕНКО И МЕТОД ВАЛОВА)ДОСТОИНСТА И НЕДОСТАТКИ. Частный метод изолирования алкалоидов (по Крамаренко)

44 ОСНОВЫ ПРОВЕДЕНИЯ ОБЩЕГО СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ЛЕК СРЕДСТВ.ТСХ-СКРИНИНГ.ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ В ОБЩИХ И ЧАСТНЫХ СИСТЕМАХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ДЛЯ ВЕЩЕСТВ НЕЙТРАЛЬНОГО, СЛАБООСНОВНОГО, КИСЛОГО ХАРАКТЕРА Этапы идентификации ЛС:1)предварительный, который позволяет выявить принадлежность яда к определенному классу химических соединений;2)подтверждающий, который позволяет эксперту дать заключение о конкретном веществе, найденном в объекте.

положительном результате предварительного проводят подтверждающее исследование.

Скрининг - научно обоснованная система поиска неизвестного яда, когда в процессе последовательных операций поэтапно «отсеиваются» (или определяются) группы веществ или индивидуальные вещества.Проводится с помощью аналитических методов, к которым предъявляются требования: высокая чувствительность (мкг), экспрессность, возможность выполнения серии анализов, точность (+ 10%), групповая специфичность, возможность сочетания с другими методами анализа. Этим требованиям соответствуют хроматографические, иммунохимические и спектральные методы анализа. С помощью данных методов можно провести общий скрининг, направленный на обнаружение определенной группы веществ (например, группы барбитуратов, производных фенотиазина и др.).Критерием выбора систем общих растворителей в ТСХ-скрининге является разделение анализируемых веществ на определенные группы, локализованные в хроматографические зоны. Чаще 44 всего в общем скрининге используются следующие системы:Система № 1: хлороформ - ацетон (9:1) - для веществ кислого, нейтрального и слабооосновного характера, экстрагируемых органическим растворителем из кислого раствора.Система № 2: диоксан - хлороформ — ацетон - 25% NH4OH (47,5 : 45 : 5 : 2,5) - для веществ основного характера, экстрагируемых органическим растворителем из щелочного раствора.

44(2)Система № 3: толуол - ацетон этанол - 25% NH4OH (45 : 45: 7,5 : 2,5) - используется в экспресс-

анализе острых интоксикаций наркотическими веществами.ТСХ в общих системах растворителей для веществ кислого, нейтрального и слабоосновного характера Объект исследования - эфирный экстракт из кислого извлечения (рН=2).Условия хром атографирования:1.Сорбент - закрепленный слой силикагеля.2.Система растворителей: ацетон-хлороформ1:9.

Схема нанесения соединений на хроматографическую пластинку. Зона А - «метчики» - (М). В качестве их используют лекарственные вещества, имеющие самое низкое, самое высокое и самое среднее значение Rr в данной системе растворителей.

Зона Б- 1/25 эфирного извлечения из кислой вытяжки. Зона В- «метчик» - (М) - стандартный раствор циклобарбитала. Зона Г— 1/10 часть эфирного извлечения из кислой вытяжки.

Обнаружение соединений на хромятогрямме

Зоны А, Б, В при закрытой зоне Г обрабатывают реагентами в следующей последовательности: 1. 5% раствор HgSO4 в конц. Н2SO4 и раствор дифенилкарбазона в хлороформе (для обнаружения барбитуратов). 2.10% раствор FeCl3 (для обнаружения производных пиразолона: антипирин). 3.Модифицированный реактив Драгендорфа (для соединений, содержащих в структуре вторичный и третичный атом азота, например, производные 1,4-бензодиазепина). 4.10% раствор H2SO4 - используется для повышения чувствительности реактива Драгендорфа.

В зависимости от величины Rf все соединения на хроматограмме располагаются в трех хроматографических зонах:

28(продолж)а) I зона - Rf = 0,0 - 0,25 — производные пиразолона, кофеина,

б) II зона - Rf = 0,31 - 0,41 - барбитураты,

в) III зона - Rf = 0,41 - 0,64 некоторые производные 1,4- бензодиазепина.

Помимо значений Rf рассчитывают значение Rx — это отношение Rf исследуемого вещества к R,- циклобарбитала («метчик»).

В случае положительного результата .исследования в общей системе растворителей проводят второй этап исследования: для этого снимают слой сорбента из зоны Г, расположенной параллельно окрашенному пятну в зоне Б, и проводят элюирование лекарственных соединений: для веществ, расположенных в I хроматографической зоне используют метанол, для веществ, расположенных в II и III - ацетон. Далее проводят хроматографирование в частных системах растворителей.Например, для барбитуратов частная система растворителей: хлороформ - н-бутанол - 25% NH4OH (70:40:5).

47 СПЕКТРАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА. СПЕКТРОФТОМЕТРИЯ В УФ И ВИДИМОЙ ОБЛАСТИ СПЕКТРА.ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ.

Для скрининга лекарственных веществ могут быть применены: 1) Абсорбционная спектроскопия в видимой и УФ областях; 2.)ИК-спектроскопия; 3)Спектроскопия ЯМР (ядерного магнитного резонанса); 4) МС (масс-спектрометрия).Из перечисленных методов более доступным и в то же время достаточно информативным и чувствительным является метод абсорбционной спектроскопии в видимой и УФ областях.Абсорбционная спектроскопия. Основана на квантово-механических представлениях о поглощении веществом света.Идентификацию веществ в условиях скрининга проводят по спектрам поглощения. Кривая зависимости светопоглощения от длины волны называется спектром поглощения и является качественной характеристикой вещества. Характер спектра может меняться в зависимости от: 1)природы растворителя (тонкая структура в неполярных растворителях);2)pH раствора для веществ, способных к ионизации.

по характеру спектра можно провести их количественное определение, измеряя интенсивность поглощения в области максимума.

В условиях скрининга сравнивают спектры поглощения исследуемого вещества со спектрами эталонов (стандартов)

В настоящее время предложен групповой скрининг для 450 лекарственных веществ

К достоинствам спектральных методов анализа следует отнести:1)универсальность, что позволяет анализировать различные классы химических соединений;2) высокую чувствительность (мкг); 3)достаточную информативность

К недостаткам - необходимость высокой степени чистоты исследуемых вещеста, поэтому рекомендуется сочетать спектральные методы анализа с предварительной очисткой веществ, например, с помощью ТСХ или других методов

48.Спектральные методы анализа лекарственных средств. Масс спектроскопия. Принципы метода и его сочетание с другими физико химическими методами.

Для скрининга лекарственных веществ могут быть применены: 1) Абсорбционная спектро-скопия в видимой и УФ областях; 2.)ИК-спектроскопия; 3)Спектроскопия ЯМР (ядерно-го магнитного резонанса); 4) МС (масс-спектрометрия).

Масс-спектрометрия метод исследования вещества, основанный на определении отношения массы к заряду ионов, образующихся при ионизации представляющих интерес компонентов пробы. Один из мощнейших способов качественной идентификации веществ, допускающий также и количественное определение. Можно сказать, что масс-спектрометрия — это «взвешивание» молекул, находящихся в пробе. широкое применение масс-спектрометрия находит в анализе органических веществ, поскольку обеспечивает уверенную идентификацию как относительно простых, так и сложных молекул. Единственное общее требование — чтобы молекула поддавалась ионизации. приборы, которые используются в этом методе, называются масс-спектрометры.

49.Иммунологические методы анализа. Гомогенный и гетерогенный иммуноанализ. Иммуноферментный анализ и его применение в химико­токсикологических исследованиях.Иммунохимические методы исследований - методы, основанные на специфической реакции взаимодействия антигена с антителом. Современные иммунохимические методы анализа лекарственных средств и наркотических веществ отличаются такими особенностями, как высокая чуствительность, специфичность, экспрессность, простота исполнения.

Минус: широкое применение этих методов сдерживается тем, что для них требуются особые реагенты (особо чистые сыворотки, ферменты), которых отечественная промышленность не производит. В основе всех методов ИХА лежит специфическая реакция «антиген - антитело», где антигеном является определяемое вещество, чужеродное для организма. При введении в живой организм чужеродного соединения (антигена АГ) образуются антитела АТ, которые сразу связываются с антигеном. Образующийся комплекс (АГ+АТ) выпадает в осадок. Реакция взаимодействия (АГ+ АТ) является специфичной и протекает количественно. wo и используется в анализе.

Для детектирования результатов реакции один из компонентов (антиген или антитело) метят специальной меткой. В зависимости от природы метки и способа ее детектирования выделяются различные виды ИХА:

Сфера применения - для определения концентрации химических веществ, содержащихся в очень низких концентрациях в биологическом материале. Специфичность: 95-98%, позволяют дифференцировать химические вещества, имеющие очень схожую молекулярную структуру. Гомогенный и гетерогенный иммуноанализГомогенный иммуноанализ - об образовании комплекса АГ-АТ судят по появлению новых свойств метки (потеря активности). Нет необходимости в этапе их физического разделения. Гетерогенный иммуноанализ - одна из фракций прикрепляется к твердой фазе, покрытой антигеном или антителом, поэтому другие фракции должны быть удалены (отмыты, отцентрифугированы). Используются 2 основных подхода - конкурентный и неконкурентный иммуноанализ.

В ИФА в качестве метки для антигенов ( те.определяемых веществ) используются ферменты. Как правило, это различные оксидазы, способные окислять специальное химическое вещество - хромогенный субстрат- с образованием окрашенных продуктов. По интенсивности окраски и судят о количестве искомого вещества.

50 ФЕНОБАРБИТАЛ И БУТОБАРБИТАЛ В ХИМИКО-ТОКС ОТНОШЕНИИ

Фенобарбитал

Изолирование. Водой, подкисленной щавелевой или серной кислотами, центрифугированием, получением элюатов, экстракционным концентрированием при помощи хлороформа и настаивании на кипящей водяной бане. Сухие остатки – для идентификации и количеств.определения.

Обнаружение. 1)Фенобарбитал+изопропиламин и соли кобальта-фиолетовая окраска.2)Фенобарбитал с солями кобальта и щелочью – розовая или красная окраска.3)Реакция образования мурексида. 4) Фенобарбитал+концентрированная серная кислота- кристаллический осадок кислотной формы (бесцветные игольчатые кристаллы, сростки из них, сфероиды).5)Фенобарбитал+смесь соли железа (III) и иодида калия - оранжево-коричневые или коричневые кристаллы (призмы и их сростки). 6)Реакция образования n-нитрофенилбарбитуровой кислоты Вещество+ конц. серной кислоты+ нитрата калия и нагревают в течение 10 мин на кипящей водяной бане. Охлаждают и прибавляют воды. При наличии фенобарбитала образуется кристаллический осадок n-нитрофенилбарбитуровой кислоты. Осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из этилового спирта.. Нитрогруппу в n-нитрофенилбарбитуровой кислоте можно восстановить в аминогруппу, а затем n-аминофенилэтилбарбитуровую кислоту можно обнаружить при помощи реакции диазотирования. Эта реакция специфична для фенобарбитала, но малочувствительна. Ее можно использовать для обнаружения фенобарбитала в порошках, таблетках и др. 8) УФ- и ИК-спектрам; 9)Обнаружение фенобарбитала методом хроматографии

Количественное определениеНа ФЭКе по реакции Поповой. Сухой остаток растворяют в хлороформе+раствор ацетата кобальта в метиленовом спирте+раствор изопропиламина в метиловом спирте. Полученный раствор фиолетового цвета фотометрируют. Раствор сравнения – смесь перечисленных реактивов. Метаболизм. Метаболизируется несколькими путями.Часть принятой дозы фенобарбитала выделяется с мочой в неизмененном виде.

Обнаружение бутобарбитала 1. При взаимодействии бутобарбитала с изопропиламином и солями кобальта появляется фиолетовая окраска.

2. Бутобарбитал с солями кобальта и щелочами образует соединение, имеющее розовую или красную окраску. 3. При взаимодействии бутобарбитала с пиридином и солями меди образуются фиолетовые сростки в виде сфероидов.

4. От прибавления к бутобарбиталу концентрированной серной кислоты образуются кристаллы в виде прозрачных призм и сростков из них

Токсич д-е: оказывают угнетающее действие на межнейронную передачу нервных импульсов в различных образованиях ЦНС (коре полушарий, лимбической системе, афферентных путях) и общеугнетающее влияние на функции ЦНС. Проявления отравления барбитуратами характеризуются 4 стадиями развития: I — засыпания; II — поверхностной комы; III — глубокой комы; IV — посткоматозного периода.